| 摘要 | 第15-18页 |
| ABSTRACT | 第18-21页 |
| 第一章 绪论 | 第22-51页 |
| 引言 | 第22页 |
| 1.1 荧光简介 | 第22-24页 |
| 1.2 生物荧光染料 | 第24-33页 |
| 1.2.1 染料与探针的区别 | 第24-25页 |
| 1.2.2 经典的生物荧光染料 | 第25-27页 |
| 1.2.3 生物荧光探针 | 第27-33页 |
| 1.2.3.1 生物荧光分子探针的结构 | 第27-28页 |
| 1.2.3.2 荧光探针的作用机制 | 第28-33页 |
| 1.3 双光子吸收过程和双光子荧光显微镜 | 第33-36页 |
| 1.3.1 双光子吸收 | 第33-34页 |
| 1.3.2 双光子荧光显微及其成像的优点 | 第34-35页 |
| 1.3.3 双光子荧光显微技术所面临的荧光染料的问题 | 第35-36页 |
| 1.4 双光子生物荧光染料(染料及探针)的研究进展 | 第36-42页 |
| 1.4.1 双光子生物荧光染料的研究现状 | 第36-38页 |
| 1.4.2 双光子荧光生物探针的研究进展 | 第38-42页 |
| 1.4.2.1 双光子核酸探针 | 第38-40页 |
| 1.4.2.2 双光子线粒体探针 | 第40-41页 |
| 1.4.2.3 双光子内质网探针 | 第41-42页 |
| 1.5 本论文的研究意义、内容与创新 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-51页 |
| 第二章 双光子生物荧光染料分子设计合成与表征 | 第51-77页 |
| 2.1 双光子有机荧光生物染料分子设计的基本原则 | 第51-54页 |
| 2.2 双光子有机荧光生物染料分子的合成与表征 | 第54-75页 |
| 2.2.1 双光子有机荧光生物染料分子的合成路线与详细步骤 | 第55-75页 |
| 2.2.1.1 含双苯并噻唑(或苯并咪唑)染料分子的合成 | 第55-62页 |
| 2.2.1.2 1,2,3-三甲基苯并咪唑-3-碘盐衍生物分子的合成 | 第62-66页 |
| 2.2.1.3 1,2,-二甲基苯并噻唑-3-碘盐衍生物分子的合成 | 第66-70页 |
| 2.2.1.4 3-(2-羟乙基)-2-甲基苯并噻唑-3-碘盐衍生物分子的合成 | 第70-73页 |
| 2.2.1.5 3-十二烷基-2-甲基苯并噻唑-3-碘盐衍生物分子的合成 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-77页 |
| 第三章 双光子有机荧光染料平台性能研究和探针的改造 | 第77-102页 |
| 引言 | 第77页 |
| 3.1 双光子染料平台的设计 | 第77-79页 |
| 3.2 实验药品、试剂、仪器与方法 | 第79-80页 |
| 3.3 相关的计算 | 第80-82页 |
| 3.3.1 荧光量子产率 | 第80-81页 |
| 3.3.2 双光子吸收截面 | 第81-82页 |
| 3.4 细胞实验 | 第82-83页 |
| 3.4.1 活细胞培养 | 第82页 |
| 3.4.2 细胞的染色实验 | 第82页 |
| 3.4.3 共染实验 | 第82-83页 |
| 3.4.4 成像实验 | 第83页 |
| 3.4.5 细胞活性实验 | 第83页 |
| 3.5 结果与讨论 | 第83-96页 |
| 3.5.1 染料BTVPA的性能研究 | 第86-96页 |
| 3.5.1.1 BTVPA的光物理性质 | 第86-90页 |
| 3.5.1.2 BTVPA的单、双光子成像 | 第90-92页 |
| 3.5.1.3 BTVPA与PI共染实验 | 第92-93页 |
| 3.5.1.4 BTVPA的MTT实验 | 第93-94页 |
| 3.5.1.5 BTVPA与DAPI的共染实验 | 第94页 |
| 3.5.1.6 BTVPA的光稳定性实验 | 第94-96页 |
| 3.6 BTVPA染料分子在开发双光子核酸探针BTVPA-nucleic acid中的应用 | 第96-99页 |
| 3.6.1 BTVPA-nucleic acid光物理性质研究 | 第97-99页 |
| 3.6.2 BTVPA-nucleic acid的双光子细胞成像 | 第99页 |
| 3.7 本章小结 | 第99-100页 |
| 参考文献 | 第100-102页 |
| 第四章 双光子RNA探针的性能研究与其在医学诊断中的应用探讨 | 第102-130页 |
| 引言 | 第102-103页 |
| 4.1 RNA探针的设计 | 第103-105页 |
| 4.2 实验药品、试剂、仪器与方法 | 第105-106页 |
| 4.3 相关的计算 | 第106-107页 |
| 4.3.1 RNA/DNA浓度的计算 | 第106页 |
| 4.3.2 RNA结合常数 | 第106-107页 |
| 4.4 细胞实验 | 第107-109页 |
| 4.4.1 活细胞培养 | 第107-108页 |
| 4.4.2 固定细胞实验 | 第108页 |
| 4.4.3 细胞的染色实验 | 第108页 |
| 4.4.4 RNA消化实验 | 第108页 |
| 4.4.5 细胞活性实验 | 第108-109页 |
| 4.4.6 成像实验 | 第109页 |
| 4.5 结果与讨论 | 第109-126页 |
| 4.5.1 探针的光物理性质 | 第109-110页 |
| 4.5.2 探针与RNA/DNA的相互作用 | 第110-114页 |
| 4.5.3 RNA、DNA荧光滴定实验 | 第114-117页 |
| 4.5.4 细胞的单、双光子荧光成像 | 第117-118页 |
| 4.5.5 RNA消化实验 | 第118-119页 |
| 4.5.6 与S-111342共染实验 | 第119-120页 |
| 4.5.7 MTT实验 | 第120-121页 |
| 4.5.8 光稳定性 | 第121-122页 |
| 4.5.9 荧光成像研究癌细胞的核仁、核与细胞轮廓的形态及在医学诊断中的探讨 | 第122-126页 |
| 4.5.9.1 宽场、共聚焦和双光子成像研究活性和固定HeLa细胞的核仁与细胞轮廓的形态 | 第123-125页 |
| 4.5.9.2 DHTI、DMTI与Hoechest共染宽场、共聚焦和双光子成像研究活性、固定HeLa细胞的核仁、核与细胞轮廓的形态 | 第125-126页 |
| 4.6 本章小结 | 第126-127页 |
| 参考文献 | 第127-130页 |
| 第五章 双光子线粒体DNA探针的性能研究 | 第130-150页 |
| 引言 | 第130页 |
| 5.1 线粒体DNA探针的设计 | 第130-131页 |
| 5.2 实验药品、试剂、仪器与方法 | 第131-132页 |
| 5.3 相关的计算 | 第132-134页 |
| 5.3.1 DNA浓度的计算 | 第132-133页 |
| 5.3.2 DNA结合常数 | 第133-134页 |
| 5.4 细胞实验 | 第134-136页 |
| 5.4.1 活细胞培养 | 第134页 |
| 5.4.2 固定细胞实验 | 第134页 |
| 5.4.3 细胞的染色实验 | 第134-135页 |
| 5.4.4 DNA消化实验 | 第135页 |
| 5.4.5 细胞活性实验 | 第135页 |
| 5.4.6 成像实验 | 第135-136页 |
| 5.5 结果与讨论 | 第136-147页 |
| 5.5.1 光物理性质研究 | 第136-138页 |
| 5.5.2 探针DMT-M和DMT-E与DNA的相互作用 | 第138页 |
| 5.5.3 探针DMT-M和DMT-E与DNA作用前后的双光子性能 | 第138-139页 |
| 5.5.4 细胞的单、双光子荧光成像 | 第139-141页 |
| 5.5.5 细胞的共定位 | 第141-142页 |
| 5.5.6 CCCP消除膜电位实验 | 第142-143页 |
| 5.5.7 DNA消化实验 | 第143-144页 |
| 5.5.8 探针与S-111342共染实验 | 第144-145页 |
| 5.5.9 MTT实验 | 第145-146页 |
| 5.5.10 光稳定性 | 第146页 |
| 5.5.11 DMT-M和DMT-E与Hoechest共染 | 第146-147页 |
| 5.6 本章结论 | 第147页 |
| 参考文献 | 第147-150页 |
| 第六章 新型双光子内质网探针的初步探索 | 第150-161页 |
| 引言 | 第150页 |
| 6.1 新型内质网探针的设计 | 第150-151页 |
| 6.2 实验药品、试剂、仪器与方法 | 第151-152页 |
| 6.3 相关的计算 | 第152页 |
| 6.4 细胞实验 | 第152-154页 |
| 6.4.1 细胞培养 | 第152-153页 |
| 6.4.2 固定细胞实验 | 第153页 |
| 6.4.3 细胞的染色实验 | 第153页 |
| 6.4.4 成像实验 | 第153-154页 |
| 6.4.5 细胞活性实验 | 第154页 |
| 6.5 结果与讨论 | 第154-158页 |
| 6.5.1 光物理性质研究 | 第154-156页 |
| 6.5.2 活细胞的单、双光子荧光成像 | 第156-157页 |
| 6.5.3 固定细胞的单、双光子荧光成像 | 第157-158页 |
| 6.5.4 MTT实验 | 第158页 |
| 6.6 本章结论 | 第158-159页 |
| 参考文献 | 第159-161页 |
| 第七章 总结与展望 | 第161-165页 |
| 7.1 论文总结 | 第161-163页 |
| 7.2 创新点 | 第163-164页 |
| 7.3 有待开展的工作 | 第164-165页 |
| 致谢 | 第165-166页 |
| 攻读博士学位期间发表论文 | 第166-167页 |
| 附录 | 第167-179页 |
| 附件 | 第179-186页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第186页 |
