| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩写词（Abbreviation) | 第8-15页 |
| 第1章 绪论 | 第15-27页 |
| 1 植物基因启动子研究进展 | 第15-22页 |
| 1.1 植物基因启动子基本结构特征 | 第15-16页 |
| 1.1.1 启动子的一般特征 | 第15页 |
| 1.1.2 上游启动子元件 | 第15-16页 |
| 1.2 启动子的种类 | 第16-18页 |
| 1.2.1 组成型启动子 | 第16页 |
| 1.2.2 组织、器官特异型启动子 | 第16页 |
| 1.2.3 诱导型启动子 | 第16-17页 |
| 1.2.3.1 非生物胁迫诱导型启动子 | 第17页 |
| 1.2.3.2 生物胁迫诱导型启动子 | 第17页 |
| 1.2.4 其他类型启动子 | 第17-18页 |
| 1.3 植物启动子克隆方法研究进展 | 第18-19页 |
| 1.3.1 基因组文库筛选克隆法 | 第18页 |
| 1.3.2 启动子探针质粒载体筛选 | 第18页 |
| 1.3.3 启动子捕获法分离启动子 | 第18页 |
| 1.3.4 基于PCR技术的启动子克隆 | 第18-19页 |
| 1.3.4.1 常规PCR | 第18页 |
| 1.3.4.2 环状PCR | 第18-19页 |
| 1.3.4.3 YADE法 | 第19页 |
| 1.3.4.4 热不对称交错PCR(TAIL-PCR) | 第19页 |
| 1.4 启动子结构与功能分析方法 | 第19-21页 |
| 1.4.1 生物信息学分析 | 第19-20页 |
| 1.4.2 植物基因启动子功能分析 | 第20-21页 |
| 1.4.2.1 瞬时表达分析 | 第20-21页 |
| 1.4.2.2 稳定表达分析 | 第21页 |
| 1.4.2.3 启动子功能元件研究方法 | 第21页 |
| 1.5 茶树基因启动子研究进展 | 第21-22页 |
| 2 茶树抗寒与休眠基因研究进展 | 第22-25页 |
| 2.1 植物抗寒与休眠分子机制研究 | 第22-23页 |
| 2.2 茶树抗寒基因研究 | 第23-24页 |
| 2.3 茶树休眠基因研究 | 第24-25页 |
| 3 研究目的与意义 | 第25页 |
| 4 研究内容与技术路线 | 第25-27页 |
| 4.1 研究内容 | 第25页 |
| 4.2 技术路线 | 第25-27页 |
| 第2章 黄金茶CsDAM2基因全长cDNA克隆与序列分析 | 第27-41页 |
| 1 材料与方法 | 第27-31页 |
| 1.1 材料 | 第27-28页 |
| 1.1.1 黄金茶材料 | 第27页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第27-28页 |
| 1.1.3 仪器设备 | 第28页 |
| 1.2 方法 | 第28-31页 |
| 1.2.1 总RNA提取与检测 | 第28-29页 |
| 1.2.2 RNA逆转录 | 第29页 |
| 1.2.2.1 5'-RACE-Ready cDNA合成 | 第29页 |
| 1.2.2.2 3'-RACE-Ready cDNA合成 | 第29页 |
| 1.2.3 引物序列 | 第29页 |
| 1.2.4 CsDAM2基因全长cDNA克隆 | 第29-30页 |
| 1.2.4.1 5'-RACE PCR反应 | 第29-30页 |
| 1.2.4.2 3'-RACE PCR反应 | 第30页 |
| 1.2.5 载体连接及测序 | 第30-31页 |
| 1.2.6 CsDAM2基因的生物信息学分析 | 第31页 |
| 2 结果与分析 | 第31-40页 |
| 2.1 总RNA提取 | 第31页 |
| 2.2 CsDAM2基因全长cDNA克隆 | 第31-32页 |
| 2.3 CsDAM2的ORF及其氨基酸序列的预测 | 第32页 |
| 2.4 氨基酸序列的同源性分析 | 第32页 |
| 2.5 CsDAM2氨基酸组成及理化性质分析 | 第32-34页 |
| 2.6 CsDAM2基因蛋白亲水/疏水性分析 | 第34-35页 |
| 2.7 CsDAM2蛋白信号肽预测 | 第35页 |
| 2.8 CsDAM2磷酸化位点预测与分析 | 第35-36页 |
| 2.9 CsDAM2蛋白二级结构预测与分析 | 第36-37页 |
| 2.10 CsDAM2蛋白三级结构及卷曲螺旋结构预测与分析 | 第37-38页 |
| 2.11 CsDAM2蛋白的系统发育树分析 | 第38-40页 |
| 3 小结 | 第40页 |
| 4 讨论 | 第40-41页 |
| 第3章 黄金茶CsDAM2基因启动子克隆与序列分析 | 第41-57页 |
| 1 材料与方法 | 第41-48页 |
| 1.1 材料 | 第41-42页 |
| 1.1.1 黄金茶材料 | 第41页 |
| 1.1.2 载体及感受态菌种 | 第41页 |
| 1.1.3 主要试剂 | 第41-42页 |
| 1.1.4 主要试剂配制 | 第42页 |
| 1.1.5 仪器设备 | 第42页 |
| 1.2 方法 | 第42-48页 |
| 1.2.1 CsDAM2基因启动子克隆文库建立 | 第42-44页 |
| 1.2.1.1 总DNA提取及完整性验证 | 第42-43页 |
| 1.2.1.2 DNA酶切 | 第43页 |
| 1.2.1.3 DNA酶切产物纯化 | 第43-44页 |
| 1.2.1.4 接头连接 | 第44页 |
| 1.2.2 引物设计 | 第44-45页 |
| 1.2.3 CsDAM2基因启动子克隆文库扩增 | 第45-46页 |
| 1.2.4 PCR产物回收纯化 | 第46页 |
| 1.2.5 CsDAM2基因启动子片段植物表达载体的构建 | 第46-48页 |
| 1.2.5.1 载体连接及感受态转化 | 第46-47页 |
| 1.2.5.2 重组质粒菌落验证及扩大培养 | 第47-48页 |
| 1.2.5.3 测序 | 第48页 |
| 1.2.5.4 CsDAM2基因启动子片段生物信息学分析 | 第48页 |
| 2 结果与分析 | 第48-55页 |
| 2.1 CsDAM2基因启动子克隆文库建立 | 第48-50页 |
| 2.1.1 总DNA提取及完整性验证 | 第48-49页 |
| 2.1.2 基因组DNA酶切与酶切产物纯化 | 第49-50页 |
| 2.2 CsDAM2基因启动子克隆文库扩增 | 第50-51页 |
| 2.3 CsDAM2基因启动子片段植物表达载体构建及重组质粒筛选 | 第51-52页 |
| 2.4 CsDAM2基因启动子片段测序及生物信息学分析 | 第52-55页 |
| 3 小结 | 第55页 |
| 4 讨论 | 第55-57页 |
| 第4章 研究结果、结论、创新点及展望 | 第57-60页 |
| 4.1 研究结果 | 第57-58页 |
| 4.1.1 黄金茶CsDAM2基因全长cDNA克隆及氨基酸序列预测分析 | 第57页 |
| 4.1.2 黄金茶CsDAM2基因启动子克隆与序列生物信息学分析 | 第57-58页 |
| 4.2 结论 | 第58页 |
| 4.3 创新点 | 第58页 |
| 4.4 展望 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 作者简介 | 第70-71页 |
