| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-24页 |
| ·纳他霉素概述 | 第10-11页 |
| ·纳他霉素的特性 | 第10页 |
| ·纳他霉素的应用 | 第10-11页 |
| ·纳他霉素生物合成基因及其调控研究 | 第11-14页 |
| ·纳他霉素生物合成基因研究 | 第11页 |
| ·链霉菌次级代谢调控途径 | 第11-14页 |
| ·双组份系统 | 第14-23页 |
| ·磷酸双组份系统与细菌内磷酸转运 | 第15-18页 |
| ·phoR-phoP双组份系统与链霉菌的次级代谢 | 第18-21页 |
| ·链霉菌内磷酸双组份对碳源、氮源等的调节 | 第21-22页 |
| ·磷酸双组份系统对于抗生素合成的调节 | 第22-23页 |
| ·本实验研究内容 | 第23-24页 |
| 第2章 无机磷酸对恰塔努加链霉菌纳他霉素合成的抑制作用 | 第24-28页 |
| ·引言 | 第24页 |
| ·实验材料 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-26页 |
| ·恰塔努加链霉菌的培养方法 | 第24页 |
| ·恰塔努加链霉菌孢子悬液的制备 | 第24-25页 |
| ·摇瓶发酵实验 | 第25页 |
| ·发酵液中Natamycin含量测定 | 第25-26页 |
| ·结果与分析 | 第26-28页 |
| ·紫外分光光度法测定纳他霉素的标准曲线 | 第26页 |
| ·无机磷酸对纳塔霉素生物合成影响 | 第26-28页 |
| 第3章 恰塔努加链霉菌phoR-phop双组分系统缺失株的构建 | 第28-43页 |
| ·引言 | 第28页 |
| ·材料 | 第28-30页 |
| ·菌株和质粒 | 第28-29页 |
| ·实验仪器和设备 | 第29-30页 |
| ·酶和生化试剂 | 第30页 |
| ·实验方法 | 第30-38页 |
| ·基因组文库的筛选 | 第30-33页 |
| ·PCR-targeting | 第33-36页 |
| ·结合转导 | 第36页 |
| ·单交换的验证及传代 | 第36-37页 |
| ·双交换突变株验证 | 第37-38页 |
| ·结果与讨论 | 第38-42页 |
| ·基因组文库的筛选 | 第38-40页 |
| ·PCR扩增抗性敲除casette | 第40-41页 |
| ·电转后cosmid验证 | 第41页 |
| ·基因敲除的验证 | 第41-42页 |
| ·本章小结 | 第42-43页 |
| 第4章 phoR-phoP缺失株与野生型比较 | 第43-51页 |
| ·引言 | 第43页 |
| ·实验材料 | 第43-44页 |
| ·菌株 | 第43页 |
| ·培养基 | 第43-44页 |
| ·实验方法 | 第44-45页 |
| ·磷酸双组份缺失株与野生型形态比较 | 第44页 |
| ·敲除株与野生型纳他霉素产量比较 | 第44页 |
| ·敲除株对磷酸敏感程度测定 | 第44-45页 |
| ·工业培养基摇瓶发酵试验 | 第45页 |
| ·实验结果 | 第45-50页 |
| ·磷酸双组份缺失株与野生型形态比较 | 第45-46页 |
| ·敲除株与野生型纳他霉素产量比较 | 第46-48页 |
| ·敲除株对磷酸敏感程度测定 | 第48-49页 |
| ·工业培养基突变株与野生型纳他霉素产量的比较 | 第49-50页 |
| ·讨论与小结 | 第50-51页 |
| 第五章 一个新的PhoP结合位点 | 第51-62页 |
| ·引言 | 第51页 |
| ·实验方法 | 第51-55页 |
| ·phoRP-phoU双向启动子序列分析 | 第51页 |
| ·PhoP蛋白的克隆与表达纯化 | 第51-53页 |
| ·生物素标记启动子 | 第53页 |
| ·EMSA验证PhoP(phoPDBD)与phoU-phoRP启动子序列的结合 | 第53-54页 |
| ·基因组扫描 | 第54-55页 |
| ·EMSA验证PhoP(PhoPDBD)与putative manB基因结合 | 第55页 |
| ·结果与讨论 | 第55-61页 |
| ·phoRP-phoU双向启动子内部有四个PHO boxes | 第55页 |
| ·表达载体pET-30a-phop与pET-30a-phopDBD的构建 | 第55-56页 |
| ·蛋白质的表达纯化 | 第56页 |
| ·phop高亲和力的与恰塔努加链霉菌phoU-phoR启动子区域结合 | 第56-58页 |
| ·恰塔努加链霉菌基因组的扫描 | 第58-59页 |
| ·一个新的PhoP结合位点 | 第59-61页 |
| ·本章小结 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-67页 |
| 读硕士学位期间发表的学位论文 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
