鸽毛滴虫粘附蛋白AP65的克隆、鉴定及表面定位
| 中文摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第13-21页 |
| ·鸽毛滴虫的病原学 | 第13-16页 |
| ·病原体 | 第13页 |
| ·流行病学 | 第13-14页 |
| ·发病机理 | 第14-15页 |
| ·病理变化及临床症状 | 第15-16页 |
| ·鸽毛滴虫病诊断与防治 | 第16页 |
| ·滴虫粘附作用及粘附蛋白的研究 | 第16-19页 |
| ·粘附作用 | 第16-17页 |
| ·粘附蛋白 | 第17-18页 |
| ·铁对粘附蛋白的调控 | 第18页 |
| ·鸽毛滴虫粘附蛋白的研究进展 | 第18-19页 |
| ·AP65的研究 | 第19-21页 |
| ·AP65 | 第19-20页 |
| ·AP65作用机制 | 第20-21页 |
| ·本研究目的和意义 | 第21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-41页 |
| ·材料 | 第21-22页 |
| ·鸽毛滴虫虫株及试验动物 | 第21页 |
| ·实验菌株与载体 | 第21页 |
| ·主要试剂及试剂盒 | 第21-22页 |
| ·主要设备及仪器 | 第22页 |
| ·方法 | 第22-41页 |
| ·主要试剂配制 | 第22页 |
| ·鸽毛滴虫的分离培养 | 第22-23页 |
| ·基因组DNA和总RNA提取 | 第23页 |
| ·鸽毛滴虫AP65保守区克隆 | 第23-27页 |
| ·5’RACE PCR和 3’RACE PCR | 第27-32页 |
| ·鸽毛滴虫AP65序列确定 | 第32页 |
| ·鸽毛滴虫AP65序列分析 | 第32-33页 |
| ·检测是否存在其他鸽毛滴虫AP65 | 第33页 |
| ·重组质粒的构建 | 第33-38页 |
| ·Tg AP65-2 重组蛋白的表达纯化 | 第38-40页 |
| ·Tg AP65-2 重组蛋白免疫制备多克隆抗体 | 第40页 |
| ·鸽毛滴虫自然表达的AP65的鉴定 | 第40-41页 |
| ·鸽毛滴虫AP65蛋白的虫体表面定位 | 第41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-55页 |
| ·鸽毛滴虫AP65基因的克隆鉴定 | 第41-43页 |
| ·保守区克隆 | 第41-42页 |
| ·两端序列克隆 | 第42-43页 |
| ·获得全长序列 | 第43页 |
| ·鸽毛滴虫AP65序列分析 | 第43-50页 |
| ·序列比对 | 第43-46页 |
| ·预测分析 | 第46-50页 |
| ·其他鸽毛滴虫AP65型的检测 | 第50-51页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第51-52页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第51页 |
| ·重组蛋白的表达鉴定 | 第51-52页 |
| ·多克隆抗体的制备与鉴定 | 第52页 |
| ·虫体自然表达的AP65蛋白的鉴定 | 第52-53页 |
| ·虫体表面定位 | 第53-55页 |
| 4 讨论 | 第55-58页 |
| 5 结论 | 第58-59页 |
| 6 参考文献 | 第59-67页 |
| 7 附录 | 第67-72页 |
| 8 致谢 | 第72-73页 |
| 9 硕士期间论文发表情况 | 第73页 |
