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草鱼抗病毒转基因P0代的构建和鱼类Chordin基因的克隆及其对金鱼尾型的影响

摘要第1-6页
abstract第6-11页
引言第11-15页
第一章 草鱼呼肠孤病毒衣壳蛋白靶向灭活转基因P0代的构建第15-23页
   ·材料和方法第15-17页
     ·实验材料第15页
     ·转基因质粒p Tgf2- EF1α-VP3-SN的构建第15-16页
     ·转基因质粒p Tgf2-Hsp70P-VP3-SN的构建第16页
     ·Tgf2转座酶m RNA的体外转录第16-17页
     ·显微注射第17页
     ·转基因阳性个体的检测与筛选第17页
   ·实验结果与分析第17-21页
     ·转基因质粒p Tgf2-EF1α-VP3-SN和p Tgf2-Hsp70-VP3-SN的构建第17-18页
     ·转基因草鱼阳性个体的观察与检测第18-19页
     ·转基因p Tgf2- EF1α-VP3-SN质粒草鱼阳性个体检测第19-20页
     ·转基因p Tgf2-Hsp70-VP3-SN质粒草鱼阳性个体检测第20-21页
   ·讨论第21-23页
     ·选用EF1α 和Hsp70启动子构建转基因载体的原因第21-22页
     ·Tgf2转座系统可提高草鱼CTVI转基因的效率第22页
     ·抗草鱼出血病转基因P0代构建的潜在价值第22-23页
第二章 团头鲂Chordin基因c DNA全序列的克隆及功能研究第23-43页
   ·实验材料、仪器和试剂第23-24页
     ·实验用鱼和胚胎第23-24页
     ·主要仪器第24页
     ·主要生物化学试剂第24页
   ·实验方法第24-34页
     ·团头鲂胚胎及成鱼组织总RNA的提取第24-25页
     ·团头鲂Chordin基因c DNA全长克隆第25-29页
     ·逆转录PCR(RT-PCR)和实时荧光定量PCR分析第29-30页
     ·整胚原位杂交第30-32页
     ·饥饿与生长激素处理第32-33页
     ·序列比对及进化树构建第33-34页
   ·实验结果与分析第34-41页
     ·团头鲂Chordin基因c DNA全长克隆与分析第34-35页
     ·团头鲂Chordin基因氨基酸序列同源性及分子进化分析第35-37页
     ·团头鲂Chordin基因的m RNA表达分析第37-40页
     ·饥饿和生长激素处理结果分析第40-41页
   ·讨论第41-43页
第三章 Chordin A基因对金鱼及其杂交鱼尾型的影响研究第43-62页
   ·实验材料与仪器第44-45页
     ·实验用鱼、胚胎及质粒第44页
     ·实验仪器第44页
     ·实验试剂第44-45页
   ·实验方法第45-50页
     ·分子检测及测序第45-47页
     ·整胚原位杂交第47-48页
     ·Chordin A基因的敲除第48-50页
   ·实验结果与分析第50-60页
     ·金鱼及其杂交鱼PCR扩增结果分析第50-51页
     ·金鱼及其杂交鱼品系尾型及Chordin A基因型分析第51-55页
     ·双尾型金鱼P_0代杂交后代表型的分析第55-56页
     ·整胚原位杂交结果比较第56-57页
     ·单尾型Chordin A基因的敲除及检测第57-60页
   ·讨论第60-62页
结论与展望第62-65页
参考文献第65-72页
附录:英文缩略语表第72-73页
致谢第73-74页
在校期间发表论文第74页

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