致谢 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-12页 |
第一章 绪论 | 第12-20页 |
·小肠结肠炎耶尔森菌简介 | 第12页 |
·非特异性核酸酶概述 | 第12-15页 |
·概念及发现 | 第12-13页 |
·催化作用方式 | 第13页 |
·热稳定性 | 第13-15页 |
·生物功能 | 第15页 |
·小肠结肠炎耶尔森菌非特异性核酸酶研究 | 第15-16页 |
·酶分子的定点突变技术研究进展 | 第16-18页 |
·定点突变原理 | 第16-17页 |
·酶分子的结构分析和定点突变应用进展 | 第17-18页 |
·立题意义和主要研究内容 | 第18-20页 |
·立题意义 | 第18页 |
·主要研究内容 | 第18-19页 |
·技术路线 | 第19-20页 |
第二章 Y.e.p非特异性核酸酶的生物信息学分析 | 第20-26页 |
·材料与方法 | 第20页 |
·结果与讨论 | 第20-25页 |
·Y.e.p非特异性核酸酶一级结构分析 | 第20-22页 |
·Y.e.p非特异性核酸酶二级结构分析和结构域分析 | 第22-24页 |
·Y.e.p非特异性核酸酶三级结构分析 | 第24-25页 |
·本章小结 | 第25-26页 |
第三章 活性位点对Y.e.p非特异性核酸酶酶活的影响 | 第26-34页 |
·材料 | 第26-28页 |
·菌株与质粒 | 第26页 |
·工具酶和试剂盒 | 第26页 |
·主要试剂 | 第26-27页 |
·培养基和工作液 | 第27页 |
·主要仪器 | 第27-28页 |
·实验方法 | 第28-31页 |
·定点突变引物设计 | 第28页 |
·定点突变基因的获得 | 第28-29页 |
·突变酶的诱导表达 | 第29页 |
·突变酶蛋白含量测定 | 第29-30页 |
·酶活测定 | 第30-31页 |
·结果与讨论 | 第31-33页 |
·活性位点预测 | 第31页 |
·突变位点选择 | 第31页 |
·蛋白含量测定 | 第31页 |
·酶活测定和分析 | 第31-33页 |
·本章小结 | 第33-34页 |
第四章 盐桥对Y.e.p非特异性核酸酶热稳定性的影响 | 第34-38页 |
·材料 | 第34页 |
·实验方法 | 第34-35页 |
·定点突变引物设计 | 第34页 |
·定点突变基因的获得 | 第34页 |
·突变酶的诱导表达 | 第34页 |
·突变酶蛋白含量测定 | 第34页 |
·热稳定性测定 | 第34-35页 |
·结果与讨论 | 第35-37页 |
·盐桥分析 | 第35页 |
·突变位点选择 | 第35页 |
·蛋白含量测定 | 第35-36页 |
·热稳定性测定和分析 | 第36-37页 |
·本章小结 | 第37-38页 |
第五章 二硫键对Y.e.p非特异性核酸酶热稳定性的影响 | 第38-47页 |
·材料 | 第38页 |
·实验方法 | 第38-42页 |
·二硫键质谱分析 | 第38-39页 |
·质谱分析原理 | 第38页 |
·质谱实验方法 | 第38-39页 |
·质谱数据处理 | 第39页 |
·定点突变 | 第39-42页 |
·定点突变引物设计 | 第39-40页 |
·定点突变基因的获得 | 第40-42页 |
·突变酶的诱导表达 | 第42页 |
·突变酶蛋白含量测定 | 第42页 |
·热稳定性测定 | 第42页 |
·结果与讨论 | 第42-46页 |
·二硫键预测 | 第42-43页 |
·二硫键的质谱分析 | 第43-44页 |
·突变位点选择 | 第44-45页 |
·蛋白含量测定 | 第45页 |
·热稳定性测定和分析 | 第45-46页 |
·本章小结 | 第46-47页 |
第六章 基于热不稳定和热稳定核酸酶序列比对的定点突变研究 | 第47-52页 |
·材料 | 第47页 |
·实验方法 | 第47-48页 |
·定点突变引物设计 | 第47-48页 |
·定点突变基因的获得 | 第48页 |
·突变酶的诱导表达 | 第48页 |
·突变酶蛋白含量测定 | 第48页 |
·酶活测定 | 第48页 |
·热稳定性测定 | 第48页 |
·结果与讨论 | 第48-51页 |
·突变位点选择 | 第48-49页 |
·蛋白含量测定 | 第49-50页 |
·酶活测定和分析 | 第50页 |
·热稳定性测定和分析 | 第50-51页 |
·本章小结 | 第51-52页 |
结论与展望 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-60页 |
英文缩略词 | 第60-61页 |
作者简介 | 第61-62页 |