摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
前言 | 第9-16页 |
第一部分 树鼩呼肠孤病毒(TRV)分离、RT-nPCR方法建立与初步应用 | 第16-35页 |
1. 实验材料 | 第16-18页 |
·实验动物 | 第16页 |
·细胞 | 第16页 |
·病毒 | 第16-17页 |
·主要试剂及耗材 | 第17-18页 |
·主要仪器 | 第18页 |
2 实验方法 | 第18-26页 |
·TRV的分离及电镜观察 | 第18-19页 |
·病毒RNA的提取 | 第19-20页 |
·TRV的PAGE电泳鉴定 | 第20页 |
·加入外源蛋白酶促进TRV在Vero细胞的感染 | 第20-21页 |
·TRV的RT-nPCR检测方法的建立 | 第21-25页 |
·TRV的RT-nPCR检测方法的初步应用 | 第25-26页 |
3 结果与分析 | 第26-31页 |
·患病树鼩临床症状 | 第26页 |
·TRV的细胞病变和电镜形态 | 第26页 |
·TRV的PAGE电泳图谱 | 第26-27页 |
·糜蛋白酶增强TRV对Vero细胞的感染 | 第27页 |
·RT-nPCR产物的序列比对 | 第27-28页 |
·RT-nPCR的敏感性试验结果 | 第28-29页 |
·成年树鼩患病群TRV的检测结果 | 第29-30页 |
·离乳树鼩TRV的检测结果 | 第30页 |
·乳树鼩TRV的检测结果 | 第30-31页 |
4 讨论 | 第31-35页 |
·发病树鼩与TRV的关系 | 第31页 |
·TRV的基因组带型特征分析 | 第31-32页 |
·TRV在Vero细胞中的感染 | 第32页 |
·建立TRV RT-nPCR检测方法的意义 | 第32-33页 |
·树鼩种群TRV的携带率 | 第33-35页 |
第二部分 树鼩呼肠孤病毒TaqMan荧光定量RT-PCR方法的建立及TRV2株致病性的研究 | 第35-56页 |
1 实验材料 | 第35-36页 |
·实验动物 | 第35页 |
·病毒 | 第35页 |
·主要试剂及耗材 | 第35-36页 |
·主要仪器 | 第36页 |
2 实验方法 | 第36-43页 |
·树鼩呼肠孤病毒TaqMan荧光定量RT-PCR方法的建立 | 第36-40页 |
·TRV2株致病性的研究 | 第40-43页 |
3 结果与分析 | 第43-54页 |
·TaqMan荧光定量RT-PCR方法绘制的标准曲线 | 第43-44页 |
·解剖病理学变化 | 第44-46页 |
·组织病理学变化 | 第46-50页 |
·TaqMan荧光定量RT-PCR方法检测各组织病毒载量结果 | 第50-54页 |
4 讨论 | 第54-56页 |
·乳鼠与乳树鼩脑内注射组病理变化及病毒载量的比较 | 第54页 |
·脑内注射与口服两种感染途径的比较 | 第54页 |
·TRV2与其它呼肠孤病毒致病性的比较 | 第54-56页 |
小结 | 第56-57页 |
展望 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-62页 |
附录一 缩写词中英文对照 | 第62-63页 |
附录二 主要溶液配方 | 第63-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
研究生简历 | 第67-68页 |