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树鼩呼肠孤病毒分离与核酸检测方法建立及其致病性研究

摘要第1-7页
Abstract第7-9页
前言第9-16页
第一部分 树鼩呼肠孤病毒(TRV)分离、RT-nPCR方法建立与初步应用第16-35页
 1. 实验材料第16-18页
   ·实验动物第16页
   ·细胞第16页
   ·病毒第16-17页
   ·主要试剂及耗材第17-18页
   ·主要仪器第18页
 2 实验方法第18-26页
   ·TRV的分离及电镜观察第18-19页
   ·病毒RNA的提取第19-20页
   ·TRV的PAGE电泳鉴定第20页
   ·加入外源蛋白酶促进TRV在Vero细胞的感染第20-21页
   ·TRV的RT-nPCR检测方法的建立第21-25页
   ·TRV的RT-nPCR检测方法的初步应用第25-26页
 3 结果与分析第26-31页
   ·患病树鼩临床症状第26页
   ·TRV的细胞病变和电镜形态第26页
   ·TRV的PAGE电泳图谱第26-27页
   ·糜蛋白酶增强TRV对Vero细胞的感染第27页
   ·RT-nPCR产物的序列比对第27-28页
   ·RT-nPCR的敏感性试验结果第28-29页
   ·成年树鼩患病群TRV的检测结果第29-30页
   ·离乳树鼩TRV的检测结果第30页
   ·乳树鼩TRV的检测结果第30-31页
 4 讨论第31-35页
   ·发病树鼩与TRV的关系第31页
   ·TRV的基因组带型特征分析第31-32页
   ·TRV在Vero细胞中的感染第32页
   ·建立TRV RT-nPCR检测方法的意义第32-33页
   ·树鼩种群TRV的携带率第33-35页
第二部分 树鼩呼肠孤病毒TaqMan荧光定量RT-PCR方法的建立及TRV2株致病性的研究第35-56页
 1 实验材料第35-36页
   ·实验动物第35页
   ·病毒第35页
   ·主要试剂及耗材第35-36页
   ·主要仪器第36页
 2 实验方法第36-43页
   ·树鼩呼肠孤病毒TaqMan荧光定量RT-PCR方法的建立第36-40页
   ·TRV2株致病性的研究第40-43页
 3 结果与分析第43-54页
   ·TaqMan荧光定量RT-PCR方法绘制的标准曲线第43-44页
   ·解剖病理学变化第44-46页
   ·组织病理学变化第46-50页
   ·TaqMan荧光定量RT-PCR方法检测各组织病毒载量结果第50-54页
 4 讨论第54-56页
   ·乳鼠与乳树鼩脑内注射组病理变化及病毒载量的比较第54页
   ·脑内注射与口服两种感染途径的比较第54页
   ·TRV2与其它呼肠孤病毒致病性的比较第54-56页
小结第56-57页
展望第57-58页
参考文献第58-62页
附录一 缩写词中英文对照第62-63页
附录二 主要溶液配方第63-66页
致谢第66-67页
研究生简历第67-68页

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