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4个沉默鸡Ii基因慢病毒载体的构建及其效果比较

摘要第1-4页
Abstract第4-9页
本论文常用中英文缩写词第9-11页
文献综述第11-23页
引言第23-24页
1 材料与方法第24-37页
   ·实验材料第24-26页
     ·质粒、菌株与细胞株第24页
     ·工具酶与相关试剂第24页
     ·主要实验用试剂配置方法第24-26页
     ·主要实验仪器第26页
   ·实验方法第26-37页
     ·靶向鸡Ii基因shRNA序列的设计与合成第26-27页
     ·互补单链退火形成双链shRNA片段第27页
     ·慢病毒载体质粒pLL3.7的线性化第27-29页
     ·重组慢病毒载体的构建第29-30页
     ·阳性克隆的PCR筛选与鉴定第30-31页
     ·阳性克隆的单酶切验证与测序第31-32页
     ·重组慢病毒载体质粒的包装第32-34页
     ·慢病毒滴度的检测第34页
     ·荧光定量PCR检测Ii基因mRNA相对表达水平第34-37页
2 结果与分析第37-45页
   ·靶向鸡Ii基因shRNA退火后的检测第37页
   ·慢病毒载体pLL3.7的双酶切结果第37-38页
   ·重组慢病毒载体的PCR鉴定第38-39页
   ·重组慢病毒载体的酶切鉴定第39-40页
   ·重组慢病毒载体的测序结果第40-41页
   ·无内毒素重组质粒的检测第41页
   ·重组慢病毒的包装与滴度检测结果第41-42页
   ·慢病毒感染HD-11细胞及其感染效率的测定第42-43页
   ·总RNA的鉴定第43页
   ·荧光定量PCR比较4个重组载体沉默鸡Ii基因的效率第43-45页
3 讨论第45-48页
   ·RNA干扰应用方式的选择第45页
   ·shRNA的设计第45-46页
   ·慢病毒的包装与保存第46-48页
结论第48-49页
参考文献第49-57页
致谢第57-58页
作者简介第58页

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