摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-25页 |
1 植物对重金属耐性的作用机理 | 第11-19页 |
·重金属对植物的毒害 | 第11-15页 |
·重金属影响植物生长发育 | 第11-12页 |
·重金属破坏植物膜系统 | 第12页 |
·重金属对酶的影响 | 第12页 |
·重金属影响植物光合作用 | 第12-13页 |
·重金属影响植物呼吸作用 | 第13页 |
·重金属影响植物细胞分裂及超微结构 | 第13-14页 |
·重金属对植物的毒害机理 | 第14-15页 |
·植物耐重金属的机理 | 第15-19页 |
·避性 | 第15-16页 |
·耐性 | 第16-19页 |
2 甲硫氨酸亚砜还原酶的研究进展 | 第19-25页 |
·甲硫氨酸亚砜还原酶的种类 | 第19-20页 |
·甲硫氨酸 | 第19页 |
·甲硫氨酸亚砜还原酶A | 第19页 |
·甲硫氨酸亚砜还原酶B | 第19-20页 |
·fR型甲硫氨酸亚砜还原酶 | 第20页 |
·MSR的结构 | 第20-21页 |
·MSR的功能 | 第21-22页 |
·立题依据及研究意义 | 第22-25页 |
第二章 OsMSRs基因的克隆与表达分析 | 第25-41页 |
1 材料与方法 | 第25-27页 |
·植物材料 | 第25页 |
·菌株与载体 | 第25页 |
·酶及试剂盒 | 第25页 |
·植物材料的培养 | 第25页 |
·RNA的提取、cDNA第一链的合成 | 第25-26页 |
·目的片段的回收、克隆及序列分析 | 第26页 |
·基因表达分析 | 第26-27页 |
2 结果与分析 | 第27-36页 |
·OsMSRA2.1和OsMSRB5基因编码区的RT-PCR扩增 | 第27-28页 |
·pMD19-OsMSRA2.1和pMD19-OsMSRB5菌落PCR及酶切验证 | 第28页 |
·OsMSRA2.1和OsMSRB5基因序列分析 | 第28-29页 |
·OsMSRA2.1和OsMSRB5基因氨基酸序列比较及进化树分析 | 第29-32页 |
·OsMSRs基因家族成员的表达分析 | 第32-35页 |
·OsMSRs基因的甲基紫精(MV)诱导表达分析 | 第35-36页 |
3 讨论 | 第36-41页 |
第三章 OsMSRA2.1和OsMSRB5基因的原核表达 | 第41-47页 |
1 材料与方法 | 第41-42页 |
·实验材料 | 第41页 |
·OsMSRs基因原核表达载体的构建 | 第41-42页 |
·融合蛋白的分离、提取 | 第42页 |
·大肠杆菌细胞的耐性分析 | 第42页 |
2 结果与分析 | 第42-45页 |
·pET-30a-MSR菌落PCR验证 | 第42-43页 |
·pET-30a-MSR酶切验证 | 第43页 |
·OsMSRs基因在大肠杆菌中的表达 | 第43-44页 |
·大肠杆菌转化子耐性分析 | 第44-45页 |
3 讨论 | 第45-47页 |
第四章 OsMSRs突变体鉴定及分析 | 第47-51页 |
1 材料与方法 | 第47-49页 |
·植物材料 | 第47页 |
·酶及试剂盒 | 第47页 |
·培养基及所需溶液配方(见附录Ⅲ) | 第47页 |
·基因型鉴定的原理(见附录Ⅳ) | 第47页 |
·突变体种子的培养 | 第47页 |
·DNA的提取 | 第47页 |
·引物选择 | 第47-49页 |
·PCR体系及反应条件 | 第49页 |
2 结果与分析 | 第49-50页 |
·突变体基因型鉴定 | 第49页 |
·突变体和野生型表型差异分析 | 第49-50页 |
3 讨论 | 第50-51页 |
全文总结及创新之处 | 第51-53页 |
全文总结 | 第51页 |
创新之处 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-59页 |
附录Ⅰ T-Vector pMD19(Simple)的结构 | 第59-60页 |
附录Ⅱ pET-30a(+)质粒结构及载体构建 | 第60-63页 |
附件Ⅲ 突变体鉴定所需培养基及溶液配方 | 第63-65页 |
附录Ⅳ 基因型鉴定的原理 | 第65-67页 |
致谢 | 第67页 |