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PTPRD在乳腺癌生物学行为及干细胞特性中的作用及机制的研究

中文摘要第1-16页
Abstract第16-23页
第一部分 PTPRD下调对乳腺癌细胞增生、凋亡、迁移和侵袭的影响第23-50页
 (一)前言第23-26页
 (二)材料和方法第26-37页
  1. 材料第26-31页
   ·细胞株第26页
   ·主要实验仪器及材料第26-28页
   ·主要实验试剂第28-31页
  2. 方法第31-37页
   ·细胞培养及传代第31-32页
   ·PTPRDsi RNA瞬转乳腺癌细胞第32-33页
   ·CCK8增殖实验第33页
   ·流式细胞仪检测细胞的凋亡和周期第33-34页
   ·划痕实验第34页
   ·Transwell迁移侵袭实验第34-35页
   ·Western Blot第35-37页
   ·统计学处理第37页
 (三)结果第37-42页
  1. PTPRD下调可以促进MDA-MB-231 细胞迁移和侵袭袭第37-39页
  2. PTPRD siRNA抑制细胞凋亡第39-40页
  3. PTPRD siRNA对增生、细胞周期的影响第40-41页
  4. PTPRD siRNA对上皮间质转化的影响第41-42页
 (四)讨论第42-45页
 (五)结论第45-46页
 (六)参考文献第46-50页
第二部分 PTPRD与乳腺癌干细胞之间的关系及小鼠成瘤实验第50-78页
 (一)前言第50-52页
 (二)材料和方法第52-61页
  1. 材料第52-53页
   ·细胞系与实验动物第52-53页
   ·主要实验仪器和试剂第53页
  2. 方法第53-61页
   ·乳腺球培养第53页
   ·RNA抽提第53-54页
   ·SYBRGreen染料法qRT-PCR第54-55页
   ·细胞蛋白提取及定量第55页
   ·Western Blot第55页
   ·免疫荧光细胞化学第55-56页
   ·克隆形成实验第56页
   ·流式细胞技术检测CD44~+/CD24~-细胞比例第56-57页
   ·磁珠分选CD44~+/CD24~-细胞群第57-58页
   ·裸鼠种植瘤模型的建立第58-59页
   ·组织包埋、切片第59页
   ·HE染色第59-60页
   ·组织蛋白的提取第60页
   ·组织RNA提取第60页
   ·免疫组织化学法第60-61页
   ·统计学处理第61页
 (三)结果第61-71页
  1. PTPRD siRNA对CD44~+/CD24~-细胞群比例的影响第61-62页
  2. PTPRD siRNA对乳腺癌细胞球形成能力的影响第62-63页
  3. PTPRD siRNA对乳腺癌全克隆形成的影响第63-65页
  4. PTPRD、STAT3、P-STAT3等在乳腺癌干细胞中的表达第65-66页
  5. 免疫荧光法检测PTPRD在乳腺癌干细胞及非干细胞群的表达第66-67页
  6. PTPRD下调对癌干细胞标记分子ALDH1及OCT-4 表达的影响第67-68页
  7. PTPRDsiRNA对乳腺癌MDA-MB-231 细胞裸鼠种植瘤生长的抑制作用第68-71页
 (四)讨论第71-74页
 (五)结论第74-75页
 (六)参考文献第75-78页
第三部分 PTPRD作用的分子机制的探讨第78-91页
 (一)前言第78-79页
 (二)材料和方法第79-81页
  1. 材料第79-80页
  2. 方法第80-81页
   ·IL-6 作用于细胞第80页
   ·qRT-PCR第80页
   ·Western Blot第80页
   ·流式细胞仪检测细胞的凋亡第80页
   ·划痕实验第80-81页
   ·CCK-8 实验第81页
   ·统计学处理第81页
 (三)结果第81-85页
  1. IL-6 可以促进细胞迁移,抑制凋亡第81-82页
  2. IL-6 作用过程中PTPRD、P-STAT3,EMT相关蛋白及乳腺癌干细胞标记分子水平的变化第82-84页
  3. PTPRD si RNA对STAT3表达和活化的影响第84-85页
 (四)讨论第85-88页
 (五)结论第88-89页
 (六)参考文献第89-91页
第四部分 PTPRD、P-STAT3在乳腺癌组织中的表达与临床病理特点和预后的关系第91-105页
 (一)前言第91-92页
 (二)材料和方法第92-94页
  1. 材料第92页
  2. 方法第92-94页
   ·乳腺癌组织收集、临床病理参数收集及组织芯片的制作第92页
   ·免疫组织化学法第92-93页
   ·免疫组织化学结果判定第93页
   ·临床病理资料收集及预后随访第93页
   ·统计学处理第93-94页
 (三)结果第94-100页
  1. PTPRD、P-STAT3在乳腺癌及乳腺组织中的表达第94-95页
  2. PTPRD、P-STAT3的表达与临床病理参数之间的关系第95-97页
  3. PTPRD、P-STAT3的表达与预后之间的关系第97-100页
 (四)讨论第100-102页
 (五)结论第102-103页
 (六)参考文献第103-105页
综述第105-119页
 参考文献第114-119页
攻读学位期间发表文章情况第119-120页
致谢第120-121页

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