| 目录 | 第1-11页 |
| 摘要 | 第11-14页 |
| Abstract | 第14-17页 |
| 主要缩略词表 | 第17-19页 |
| 引言 | 第19-22页 |
| 第一部分 miR-145 调控 A549 中 Klf4、Oct4 的表达 | 第22-52页 |
| 引言 | 第22-23页 |
| 材料和方法 | 第23-40页 |
| 一、 细胞培养 | 第23-24页 |
| （一） 材料、试剂和设备 | 第23页 |
| （二） 主要实验步骤 | 第23-24页 |
| 二、 针对基因 micro-145-5p 的慢病毒载体构建和慢病毒包装 | 第24-32页 |
| （一） 载体构建实验材料 | 第24-25页 |
| （二） 构建流程 | 第25-31页 |
| （三） 慢病毒包装 | 第31-32页 |
| 三、 病毒侵染 | 第32-33页 |
| （一） 实验材料及试剂 | 第32页 |
| （二） 步骤 | 第32-33页 |
| 四、 总 RNA 的提取 | 第33-34页 |
| （一） 实验材料及试剂 | 第33-34页 |
| （二） 步骤 | 第34页 |
| 五、 Realtime-PCR 分析 | 第34-37页 |
| （一） 实验材料及试剂 | 第34-35页 |
| （二） 实验方法 | 第35-36页 |
| （三） 结果与计算 | 第36-37页 |
| 六、 Western blot 实验分析 | 第37-39页 |
| （一） 试剂与仪器 | 第37-38页 |
| （二） 操作步骤 | 第38-39页 |
| 七、 统计学分析 | 第39-40页 |
| 结果 | 第40-50页 |
| 一、 细胞侵染图片 | 第40-41页 |
| （一） 病毒滴度（293T 细胞 72h） | 第40页 |
| （二） 细胞侵染图片 | 第40-41页 |
| 二、 RT-PCR 检测有效片段筛选 | 第41-46页 |
| （一） RNA 提取质量检测 | 第41-42页 |
| （二） 扩增曲线 | 第42-43页 |
| （三） PCR 扩增产物电泳图 | 第43-44页 |
| （四） 原始数据及连续计算 | 第44-46页 |
| （五） 图表 | 第46页 |
| 三、 Western blot 法检测有效干扰片段的筛选 | 第46-50页 |
| （一） 结果与分析 | 第46-48页 |
| （二） 结果与分析 | 第48-50页 |
| 讨论 | 第50-52页 |
| 第二部分 慢病毒介导的 miRNA-145 对肺腺癌细胞 A549 生物学行为影响的体外研究 | 第52-76页 |
| 引言 | 第52-53页 |
| 材料和方法 | 第53-60页 |
| 一、 细胞培养 | 第53-54页 |
| （一） 材料、试剂和设备 | 第53页 |
| （二） 主要实验步骤 | 第53-54页 |
| 二、 病毒侵染 | 第54页 |
| （一） 实验材料及试剂 | 第54页 |
| （二） 靶细胞侵染试验 | 第54页 |
| 三、 细胞流式实验 | 第54-56页 |
| （一） 细胞周期实验 | 第54-55页 |
| （二） 细胞凋亡检测 | 第55-56页 |
| 四、 CCK8 检测增值 | 第56-57页 |
| （一） 实验材料及试剂 | 第56页 |
| （二） 步骤 | 第56-57页 |
| 五、 细胞迁移 | 第57-58页 |
| （一） 实验材料及试剂 | 第57页 |
| （二） 步骤 | 第57-58页 |
| 六、 细胞侵袭 | 第58-59页 |
| （一） 实验材料及试剂 | 第58页 |
| （二） 步骤 | 第58-59页 |
| 七、 平板克隆 | 第59页 |
| （一） 实验材料及试剂 | 第59页 |
| （二） 步骤 | 第59页 |
| 八、 统计学分析 | 第59-60页 |
| 结果 | 第60-73页 |
| 一、 流式实验结果 | 第60-66页 |
| （一） 周期实验 | 第60-63页 |
| （二） 凋亡实验 | 第63-66页 |
| 二、 增殖实验数据统计 | 第66-68页 |
| 三、 细胞迁移实验 | 第68-69页 |
| （一） 细胞迁移图片 | 第68页 |
| （二） 实验数据处理 | 第68-69页 |
| 四、 细胞侵袭实验 | 第69-71页 |
| （一） 细胞侵袭图片 | 第69-70页 |
| （二） 实验数据处理 | 第70-71页 |
| 五、 平板克隆实验结果 | 第71-73页 |
| （一） 平板克隆形成差异图 | 第71-72页 |
| （二） 数据统计 | 第72-73页 |
| 讨论 | 第73-76页 |
| 第三部分 miRNA-145 对 A549 裸鼠移植瘤生长的影响 | 第76-95页 |
| 引言 | 第76-77页 |
| 材料和方法 | 第77-84页 |
| 一、 细胞培养 | 第77-78页 |
| （一） 材料、试剂和设备 | 第77页 |
| （二） 主要实验步骤 | 第77-78页 |
| 二、 细胞侵染 | 第78页 |
| （一）、 实验材料及试剂 | 第78页 |
| （二） 步骤 | 第78页 |
| 三、 细胞收样 | 第78-79页 |
| （一） 实验材料及试剂 | 第78-79页 |
| （二） 步骤 | 第79页 |
| 四、 裸鼠培养材料及方法 | 第79页 |
| 五、 细胞接种、取瘤 | 第79页 |
| 六、 总 RNA 的提取 | 第79-80页 |
| （一） 实验材料及试剂 | 第79页 |
| （二）、 步骤 | 第79-80页 |
| 七、 Real-time PCR 分析 | 第80-83页 |
| （一） 实验材料 | 第80页 |
| （二） 实验方法 | 第80-83页 |
| 八、 统计学分析 | 第83-84页 |
| 结果 | 第84-93页 |
| 一、 实验图片 | 第84-86页 |
| （一） 细胞侵染图片 | 第84页 |
| （二） 动物实验图片 | 第84-86页 |
| 二、 RT-PCR 检测肿瘤基因表达差异 | 第86-89页 |
| （一） RNA 提取质量检测 | 第86页 |
| （二） 扩增曲线 | 第86-87页 |
| （三） PCR 扩增产物电泳图 | 第87页 |
| （四） 原始数据及连续计算 | 第87-88页 |
| （五） 图表 | 第88-89页 |
| 三、 动物实验结果 | 第89-93页 |
| （一） 裸鼠体重 | 第89-90页 |
| （二） 裸鼠瘤体体积 | 第90-91页 |
| （三） 取瘤时瘤体重量差异 | 第91-93页 |
| 讨论 | 第93-95页 |
| 全文总结 | 第95-97页 |
| 综述 | 第97-106页 |
| 参考文献 | 第106-117页 |
| 论文发表情况 | 第117-118页 |
| 致谢 | 第118页 |
