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几种检疫性有害生物分子检测技术研究

致谢第1-4页
摘要第4-5页
Abstract第5-10页
前言第10-11页
第一章 文献综述第11-16页
 1 几种检疫性有害生物发生概况第11-13页
   ·检疫性病害榆树枯萎病发生概况第11页
   ·检疫性害虫扶桑绵粉蚧发生概况第11-12页
   ·检疫性害虫新菠萝灰粉蚧的发生概况第12-13页
 2 检疫性有害生物病原检测技术研究进展第13-15页
   ·形态学在检疫性有害生物病原检测鉴定方面的应用和局限性第13页
   ·血清学在检疫性有害生物病原检测鉴定方面的应用和局限性第13-14页
   ·分子生物学方法在检疫性有害生物病原检测鉴定方面的应用第14-15页
 3 研究目的第15-16页
第二章 中国榆树对榆树枯萎病感病性研究第16-32页
 1 实验材料第16-17页
 2 实验方法第17-19页
   ·人工接种方法第17页
   ·榆树枯萎病菌感病调查方法和分级标准第17-18页
   ·榆树枯萎病人工接种实验病情调查第18页
   ·榆树枯萎病菌接种发病株的再分离与鉴定第18-19页
     ·再分离对象第18页
     ·分离材料的采集与分离第18页
     ·再分离获得的分离物形态学观察第18页
     ·再分离获得的分离物分子鉴定第18-19页
       ·再分离病原菌的 DNA 提取第18-19页
       ·再分离菌的 PCR 鉴定第19页
     ·序列测定与分析第19页
 3 结果与分析第19-30页
   ·不同中国榆树树种接种榆树枯萎病菌后感病情况第19-28页
     ·白榆感病情况第20-22页
     ·椿榆感病情况第22-24页
     ·多脉榆感病情况第24-25页
     ·黑榆感病情况第25-26页
     ·红果榆感病情况第26-27页
     ·榔榆感病情况第27-28页
   ·不同榆树种类对榆树枯萎病菌的感病性测定结果第28-29页
   ·再分离获得的分离物形态学鉴定结果第29-30页
   ·再分离获得的分离物分子鉴定结果第30页
 4 结论与讨论第30-32页
第三章 榆树枯萎病菌 PCR 检测技术研究第32-38页
 1 实验材料第32-33页
 2 实验方法第33-35页
   ·菌丝培养第33页
   ·DNA 提取第33-34页
   ·供试菌株 ITS 扩增第34页
   ·PCR 产物克隆与测序第34页
   ·特异性引物设计第34页
   ·常规 PCR 与巢式 PCR 扩增第34-35页
 3 结果与分析第35-36页
   ·榆树枯萎病菌巢式 PCR 引物反应分析第35-36页
   ·榆树枯萎病菌巢式 PCR 检测的灵敏度第36页
 4 结论与讨论第36-38页
第四章 榆树枯萎病菌荧光 PCR 检测方法研究第38-42页
 1 实验材料第38页
 2 实验方法第38-39页
   ·菌丝培养第38-39页
   ·DNA 提取第39页
   ·特异性引物设计第39页
   ·Real-time PCR 扩增反应第39页
 3 结果与分析第39-40页
   ·Real-time PCR 灵敏度检测第39-40页
 4 结论与讨论第40-42页
第五章 扶桑绵粉蚧与新菠萝灰粉蚧分子检测技术研究第42-48页
 1 实验材料第42-43页
 2 实验方法第43-44页
   ·DNA 提取第43页
   ·PCR 反应体系、反应条件的优化第43-44页
   ·PCR 产物纯化回收并测序第44页
   ·新菠萝灰粉蚧与扶桑绵粉蚧特异性引物设计第44页
   ·双重 PCR 反应体系的优化及特异性扩增第44页
     ·Mg~(2+)浓度的优化第44页
     ·特异性扩增第44页
 3 结果与分析第44-46页
   ·粉蚧类昆虫 COI 基因的扩增结果及分析第44-45页
   ·扶桑绵粉蚧特异性 PCR 检测第45页
   ·新菠萝灰粉蚧特异性 PCR 检测第45-46页
   ·扶桑绵粉蚧和新菠萝灰粉蚧双重 PCR 的特异性及灵敏性检验第46页
 4 结论与讨论第46-48页
第六章 全文总结与讨论第48-50页
参考文献第50-54页
附录第54-55页

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