| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-17页 |
| 常见缩略词中英文对照表 | 第17-19页 |
| 第一章 绪论 | 第19-38页 |
| 1 肝再生研究进展 | 第19-31页 |
| ·肝脏的结构和生理特点 | 第19-20页 |
| ·研究肝再生的实验模型 | 第20-22页 |
| ·肝脏中不同细胞在再生过程中的作用 | 第22-25页 |
| ·肝脏细胞外基质对肝再生的调控作用 | 第25-26页 |
| ·调控肝再生的重要细胞因子及其通路 | 第26-29页 |
| ·代谢通路对肝再生的影响 | 第29-30页 |
| ·炎症对肝再生的影响 | 第30页 |
| ·肝再生研究展望 | 第30-31页 |
| 2 寡核苷酸微阵列芯片在肝再生研究中的应用进展 | 第31-33页 |
| ·寡核苷酸微阵列芯片的原理 | 第31-32页 |
| ·基因芯片检测肝再生过程中的基因表达谱 | 第32-33页 |
| 3 Spp1 在肝再生和疾病中作用的研究进展 | 第33-36页 |
| ·Spp1 的结构 | 第33-34页 |
| ·Spp1 的受体类型及其种类 | 第34-35页 |
| ·Spp1 的生理功能及其在各种肝病中的表达 | 第35页 |
| ·Spp1 对肝再生的可能调控作用 | 第35-36页 |
| 4 研究目的和内容 | 第36-38页 |
| 第二章 CCl_4诱导肝再生过程中基因表达谱研究 | 第38-65页 |
| 1 前言 | 第38-39页 |
| 2 材料与方法 | 第39-50页 |
| ·仪器与设备 | 第39页 |
| ·试剂与药品 | 第39-40页 |
| ·试验动物与处理 | 第40-41页 |
| ·谷丙转氨酶检测 | 第41页 |
| ·组织切片与免疫组化 | 第41-42页 |
| ·总RNA 的提取和纯化 | 第42-44页 |
| ·cDNA 的合成和纯化 | 第44-46页 |
| ·cRNA 的合成和纯化 | 第46-47页 |
| ·cRNA 片段化、配制杂交液 | 第47-48页 |
| ·芯片杂交 | 第48-49页 |
| ·数据处理 | 第49页 |
| ·定量RT-PCR 验证芯片结果 | 第49-50页 |
| ·ELISA 检测小鼠肝再生过程中体内Spp1 水平 | 第50页 |
| ·氨基酸分析 | 第50页 |
| 3 结果 | 第50-61页 |
| ·CCl_4 诱导小鼠肝再生过程中细胞增殖与血清转氨酶水平变化 | 第50-51页 |
| ·mRNA 抽提与cRNA 质控 | 第51-53页 |
| ·基因表达谱分析 | 第53-55页 |
| ·信号通路分析及验证 | 第55-58页 |
| ·功能基因分析 | 第58-60页 |
| ·spp1 表达验证 | 第60-61页 |
| 4 讨论 | 第61-65页 |
| ·CCl_4 诱导肝再生模型的建立 | 第61-62页 |
| ·肝再生的基因表达谱与功能基因 | 第62-63页 |
| ·氨基酸、氮元素和尿素循环代谢信号通路对肝再生的调控作用 | 第63-64页 |
| ·Spp1 对肝再生的调控作用 | 第64-65页 |
| 第三章 小鼠spp1 基因原核表达载体构建、表达与纯化及抗体制备 | 第65-87页 |
| 1 前言 | 第65-66页 |
| 2 材料与方法 | 第66-78页 |
| ·仪器与设备 | 第66-67页 |
| ·菌种与载体 | 第67页 |
| ·酶与化学试剂 | 第67-68页 |
| ·总RNA 提取 | 第68页 |
| ·逆转录 | 第68页 |
| ·PCR 扩增spp1 基因与原核表达载体构建 | 第68-73页 |
| ·重组Spp1 的表达和纯化 | 第73-76页 |
| ·rmSpp1 蛋白活性测定 | 第76-77页 |
| ·抗小鼠Spp1 抗体制备及效价测定 | 第77-78页 |
| 3 结果 | 第78-85页 |
| ·小鼠spp1 基因的克隆及spp1-pET28a 载体构建 | 第78-80页 |
| ·rmSpp1 表达条件优化 | 第80-81页 |
| ·rmSpp1 的纯化 | 第81-85页 |
| ·Spp1 多克隆抗体制备 | 第85页 |
| 4 讨论 | 第85-87页 |
| ·小鼠Spp1 原核表达载体构建 | 第85页 |
| ·rmSpp1 的分离纯化 | 第85-87页 |
| 第四章 spp1 基因体内表达对小鼠肝脏损伤保护与促进肝再生的研究 | 第87-101页 |
| 1 前言 | 第87-88页 |
| 2 材料与方法 | 第88-93页 |
| ·仪器与设备 | 第88-89页 |
| ·质粒与菌种 | 第89页 |
| ·酶与试剂 | 第89页 |
| ·spp1-pcDNA3.1 真核表达载体构建与纯化 | 第89-91页 |
| ·试验动物分组与处理 | 第91-92页 |
| ·血清中转氨酶活性与Spp1 水平检测 | 第92页 |
| ·组织切片与免疫组化 | 第92页 |
| ·数据统计与分析 | 第92-93页 |
| 3 结果分析 | 第93-100页 |
| ·Spp1-pcDNA3.1 真核表达载体的构建 | 第93-95页 |
| ·Spp1 体内表达与转氨酶水平变化 | 第95-96页 |
| ·Spp1 体内表达对小鼠肝损伤的影响 | 第96-98页 |
| ·Spp1 体内表达对小鼠肝再生的影响 | 第98-100页 |
| 4 讨论 | 第100-101页 |
| 第五章 rmSpp1 对CCl_4诱导小鼠肝损伤的保护与肝再生的促进研究 | 第101-115页 |
| 1 前言 | 第101-102页 |
| 2 材料与方法 | 第102-104页 |
| ·仪器与设备 | 第102页 |
| ·试剂 | 第102页 |
| ·试验动物与处理 | 第102页 |
| ·血清中转氨酶活性 | 第102-103页 |
| ·组织切片与免疫组化 | 第103页 |
| ·数据统计与分析 | 第103页 |
| ·Qualitative RT-PCR 检测内源性 Spp1 的表达 | 第103页 |
| ·数据统计与分析 | 第103-104页 |
| 3 结果分析 | 第104-113页 |
| ·Spp1 对肝损伤模型小鼠体内转氨酶水平的影响 | 第104-105页 |
| ·Spp1 对肝脏损伤的保护作用 | 第105-108页 |
| ·Spp1 对肝损伤小鼠体重恢复的影响 | 第108-109页 |
| ·Spp1 对肝再生期间肝细胞增殖的影响 | 第109-113页 |
| 4 讨论 | 第113-115页 |
| ·Spp1 对肝损伤保护作用 | 第113-114页 |
| ·Spp1 对肝细胞增殖的作用 | 第114-115页 |
| 第六章 CCl_4诱导肝再生过程中Spp1 受体的表达 | 第115-121页 |
| 1 前言 | 第115页 |
| 2 材料与方法 | 第115-118页 |
| ·仪器与设备 | 第115页 |
| ·酶与化学试剂 | 第115-116页 |
| ·mRNA 提取 | 第116页 |
| ·Spp1 受体的RT-PCR | 第116-118页 |
| ·数据分析 | 第118页 |
| 3 结果 | 第118-120页 |
| ·整合素受体的表达变化 | 第118-119页 |
| ·CD44 受体的表达 | 第119-120页 |
| 4 讨论 | 第120-121页 |
| 第七章 结论与展望 | 第121-132页 |
| 1 CCl_4 诱导肝再生过程的基因表达谱 | 第121-123页 |
| 2 Spp1 对肝脏损伤保护的机理 | 第123-126页 |
| 3 Spp1 调控肝脏修复与再生 | 第126-128页 |
| ·Spp1 对肝细胞增殖调控的机理 | 第126-127页 |
| ·Spp1 调控细胞外基质的重构和细胞迁移 | 第127-128页 |
| 4 Spp1 在肝脏疾病中的表达 | 第128-130页 |
| ·Spp1 在肝癌中表达 | 第128-129页 |
| ·Spp1 在肝炎中表达 | 第129-130页 |
| ·Spp1 肝脏纤维化 | 第130页 |
| 5 总结 | 第130-132页 |
| 参考文献 | 第132-143页 |
| 附录 | 第143-147页 |
| 致谢 | 第147-149页 |
| 攻读博士学位期间发表论文 | 第149页 |
| 参加学术会议 | 第149页 |
