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小反刍兽疫病毒F蛋白与H蛋白相互作用及F蛋白免疫原性研究

摘要第1-4页
Abstract第4-6页
英文缩略表第6-9页
第一章 文献综述第9-25页
   ·小反刍兽疫研究进展第9-16页
     ·概况第9页
     ·病原学研究第9-12页
     ·临床学研究第12-14页
     ·诊断方法研究进展第14-15页
     ·预防与控制第15-16页
   ·副粘病毒 H、F 蛋白的研究进展第16-20页
     ·H 蛋白第16-17页
     ·F 蛋白第17-18页
     ·H 蛋白和 F 蛋白的相互作用第18-20页
   ·核酸疫苗的研究进展第20-24页
     ·核酸疫苗的发展第20-21页
     ·核酸疫苗的作用机理第21页
     ·影响核酸疫苗免疫效果的因素第21-22页
     ·核酸疫苗特点第22页
     ·核酸疫苗的应用现状第22-23页
     ·核酸疫苗存在的问题第23-24页
   ·展望第24-25页
第二章 小反刍兽疫病毒 F 蛋白的原核表达及多克隆抗体制备第25-36页
   ·试验材料第25-26页
     ·主要试剂第25页
     ·实验动物第25页
     ·主要器材第25-26页
   ·试验方法第26-30页
     ·PPRV 基因组 RNA 的提取第26页
     ·目的片段的扩增第26-27页
     ·E.coli(DH5α)感受态细胞的制备(采用 TSS 法)第27页
     ·pMD18-T/F 重组质粒的构建和鉴定第27-28页
     ·原核表达重组载体 pET-30a/F 的构建和鉴定第28页
     ·重组质粒 pET-30a/F 的诱导表达与鉴定第28-29页
     ·蛋白纯化(切胶法)第29页
     ·Western-blot 鉴定第29页
     ·PPRV 多克隆抗体的制备第29-30页
     ·多抗血清效价测定第30页
     ·F 蛋白多抗的反应原性检测第30页
   ·实验结果第30-34页
     ·RT-PCR 扩增 F 基因第30-31页
     ·重组质粒 pET-30a/F 的鉴定第31-32页
     ·重组质粒 pET-30a/F 的表达第32页
     ·重组原核蛋白的免疫原性鉴定第32-33页
     ·多抗血清效价测定第33页
     ·多抗的 Western-blot 鉴定第33-34页
   ·讨论第34-36页
第三章 小反刍兽疫病毒 H、F 蛋白真核表达载体的构建及相互作用研究第36-47页
   ·实验材料第36-37页
     ·主要试剂第36-37页
     ·主要器材第37页
   ·实验方法第37-40页
     ·RT-PCR 扩增 H、F 基因(两步法)第37-38页
     ·重组真核表达质粒的构建与鉴定第38页
     ·重组质粒与空载体质粒的提取第38页
     ·转染 BHK-21 细胞第38页
     ·间接免疫荧光检测第38-39页
     ·Western-blot 检测第39页
     ·免疫共沉淀检测 H 和 F 之间的相互作用第39页
     ·融合实验第39-40页
   ·结果第40-45页
     ·RT-PCR 扩增 H、F 基因第40-41页
     ·重组真核表达载体的构建与鉴定第41-42页
     ·间接免疫荧光检测重组质粒在 BHK-21 细胞的表达第42页
     ·Western-blot 检测重组质粒在 BHK-21 细胞的表达第42-43页
     ·免疫共沉淀检测 H 和 F 之间的相互作用第43-44页
     ·融合实验第44-45页
   ·讨论第45-47页
第四章 小反刍兽疫病毒 F 基因核酸疫苗的初步研究第47-52页
   ·实验材料第47页
     ·蛋白及实验动物第47页
     ·主要试剂第47页
   ·试验方法第47-49页
     ·重组质粒的大量制备第47-49页
     ·实验动物及其分组第49页
     ·间接 ELISA 检测 BALB/c 小鼠血清抗体第49页
   ·实验结果第49-50页
     ·ELISA 反应结果第49-50页
   ·讨论第50-52页
第五章 结论第52-53页
参考文献第53-60页
致谢第60-61页
作者简介第61-62页

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