| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-29页 |
| ·细胞色素 P450 的简介 | 第12-16页 |
| ·细胞色素 P450 的分布 | 第12-13页 |
| ·细胞色素 P450 的结构特征 | 第13页 |
| ·细胞色素 P450 的功能和作用机理 | 第13-14页 |
| ·生物学意义及应用前景 | 第14-16页 |
| ·CYP2C9 及 CYP 55A1 简介 | 第16-22页 |
| ·人细胞色素 P4502C9 | 第16-18页 |
| ·尖镰孢菌细胞色素 P45055A1 | 第18-22页 |
| ·用于细胞色素 P450 的表达系统 | 第22-23页 |
| ·毕赤酵母真核表达系统 | 第23-28页 |
| ·毕赤酵母表达系统的组成 | 第23-27页 |
| ·外源蛋白在毕赤酵母中的表达 | 第27-28页 |
| ·细胞色素 P450 在毕赤酵母中的表达 | 第28页 |
| ·本文的研究目的和意义 | 第28-29页 |
| 第2章 人细胞色素 P4502C9 在毕赤酵母中的胞内表达 | 第29-54页 |
| ·引言 | 第29页 |
| ·实验材料、试剂及仪器设备 | 第29-34页 |
| ·菌株与质粒 | 第29-30页 |
| ·主要试剂与酶类 | 第30页 |
| ·主要溶液 | 第30-33页 |
| ·主要培养基 | 第33-34页 |
| ·主要设备仪器 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-47页 |
| ·pPIC3.5K-2C9 表达质粒载体的构建 | 第34-40页 |
| ·毕赤酵母重组子的构建 | 第40-43页 |
| ·P4502C9 毕赤酵母胞内表达及鉴定 | 第43-46页 |
| ·CYP2C9 的活性和含量检测 | 第46-47页 |
| ·结果分析 | 第47-52页 |
| ·重组表达载体 pPIC3.5K-2c9 的载体构建 | 第47-48页 |
| ·HIS+重组子的鉴定和筛选 | 第48-50页 |
| ·CYP2C9 蛋白 SDS-PAGE 及 Western Blot 检测 | 第50-52页 |
| ·讨论 | 第52-54页 |
| 第3章 尖镰孢菌细胞色素 P45055A1 在毕赤酵母中的表达 | 第54-70页 |
| ·引言 | 第54页 |
| ·实验材料、试剂及仪器设备 | 第54-56页 |
| ·菌株与质粒 | 第54-55页 |
| ·主要试剂与酶类 | 第55页 |
| ·主要溶液 | 第55页 |
| ·主要培养基 | 第55页 |
| ·主要设备仪器 | 第55-56页 |
| ·实验方法 | 第56-61页 |
| ·pPIC9-55a1 表达质粒载体的构建 | 第56-59页 |
| ·毕赤酵母重组子的构建和鉴定 | 第59页 |
| ·CYP55A1 毕赤酵母分泌表达及鉴定 | 第59-61页 |
| ·结果分析 | 第61-66页 |
| ·重组表达载体 pPIC9-55a1 的载体构建 | 第61-62页 |
| ·HIS+重组子的鉴定和筛选 | 第62-65页 |
| ·P450 活性检测及含量计算 | 第65-66页 |
| ·讨论 | 第66-70页 |
| 参考文献 | 第70-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 附录 已发表的论文目录 | 第79页 |
