摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
英文缩略表 | 第10-15页 |
第一章 引言 | 第15-26页 |
·烟粉虱的概况 | 第15-17页 |
·起源、分布、危害 | 第15页 |
·生物型 | 第15-17页 |
·生物型与药剂敏感性 | 第17页 |
·烟粉虱的防治 | 第17-22页 |
·生物防治及 IPM 策略 | 第17-18页 |
·化学防治 | 第18-22页 |
·杀虫剂抗性的产生及其抗性机制 | 第22页 |
·生物芯片技术简介 | 第22-23页 |
·RNA-seq 表达谱技术 | 第23-24页 |
·蛋白质组(iTRAQ)技术 | 第24页 |
·本研究的主要目的,技术路线及研究内容 | 第24-26页 |
第二章 B 型烟粉虱对噻虫嗪持续诱导的生化机制研究 | 第26-33页 |
·材料和方法 | 第26-29页 |
·供试昆虫的饲养与收集 | 第26页 |
·供试试剂和化学杀虫剂 | 第26页 |
·主要实验仪器 | 第26-27页 |
·生物测定 | 第27页 |
·TH-2000 样品的处理 | 第27页 |
·蛋白质标准曲线的制备 | 第27页 |
·蛋白含量的测定 | 第27页 |
·谷胱甘肽-S-转移酶活力的测定 | 第27-28页 |
·多功能氧化酶活力的测定 | 第28-29页 |
·结果和分析 | 第29-31页 |
·生物测定结果 | 第29页 |
·解毒酶活力的测定 | 第29-31页 |
·小结与讨论 | 第31-33页 |
第三章 利用表达谱芯片研究烟粉虱对噻虫嗪的抗性机制 | 第33-51页 |
·材料和方法 | 第33-43页 |
·供试昆虫的饲养及样品收集 | 第33页 |
·表达谱芯片探针的设计 | 第33-35页 |
·总 RNA 的提取及纯化 | 第35-36页 |
·cDNA 第一链及第二链的合成 | 第36-37页 |
·aaUTP 标记 cRNA 合成 | 第37页 |
·cRNA 纯化 | 第37-38页 |
·cRNA 浓度测定 | 第38页 |
·cRNA 样品荧光标记 | 第38页 |
·荧光标记 cRNA 样品纯化 | 第38-39页 |
·荧光分子浓度及掺入率计算 | 第39页 |
·cRNA 样品片段化和芯片杂交 | 第39页 |
·芯片洗涤及扫描 | 第39页 |
·数据的预处理 | 第39-40页 |
·发育阶段特异性差异基因的筛选 | 第40-41页 |
·差异基因表达模式聚类和 GO,KEGG Pathway 富集分析 | 第41-42页 |
·qPCR 验证 | 第42-43页 |
·结果与分析 | 第43-48页 |
·芯片杂交结果 | 第43页 |
·数据的预处理 | 第43页 |
·差异基因筛选 | 第43-45页 |
·基因聚类及 GO 和 Pathway 的富集分析 | 第45-47页 |
·抗性候选基因的筛选 | 第47页 |
·qPCR 验证结果 | 第47-48页 |
·小结与讨论 | 第48-51页 |
第四章 RNA-seq 表达谱研究烟粉虱抗性机制 | 第51-59页 |
·材料与方法 | 第51-52页 |
·供试昆虫的饲养与收集 | 第51页 |
·RNA 抽提,cDNA 文库的构建及 solexa 测序 | 第51页 |
·原始数据的处理 | 第51-52页 |
·与参考序列的比对 | 第52页 |
·GO 功能注释和 Pathway 富集分析 | 第52页 |
·差异基因筛选 | 第52页 |
·结果与分析 | 第52-57页 |
·测序结果分析 | 第52-53页 |
·测序质量评估 | 第53页 |
·基因表达量的统计 | 第53-54页 |
·差异基因筛选 | 第54-55页 |
·差异基因 GO,Pathway 的富集分析 | 第55-57页 |
·小结与讨论 | 第57-59页 |
第五章 iTRAQ 蛋白质组对烟粉虱抗性机制的研究 | 第59-70页 |
·材料和方法 | 第59-62页 |
·供试昆虫的饲养与收集 | 第59页 |
·蛋白的提取 | 第59页 |
·蛋白的定量及 SDS 电泳电泳检测 | 第59-60页 |
·蛋白酶解 | 第60页 |
·iTRAQ 标记及样品混合 | 第60页 |
·SCX 分离及液相串联质谱 | 第60页 |
·生物信息分析 | 第60-61页 |
·差异蛋白的筛选 | 第61-62页 |
·结果与分析 | 第62-67页 |
·蛋白浓度的测定 | 第62-63页 |
·蛋白鉴定信息 | 第63页 |
·肽段鉴定数量分布 | 第63-64页 |
·蛋白质丰度比分布 | 第64-65页 |
·蛋白序列覆盖度分布 | 第65页 |
·蛋白质 COG 功能分类 | 第65-66页 |
·差异蛋白的 GO, pathway 的富集分析 | 第66-67页 |
·小结与讨论 | 第67-70页 |
第六章 RNA-seq 表达谱和 iTRAQ 蛋白质组的关联分析 | 第70-76页 |
·材料与方法 | 第70-71页 |
·供试昆虫与样品收集 | 第70页 |
·RNA-seq 表达谱数据的分析 | 第70页 |
·iTRAQ 蛋白质组数据的分析 | 第70页 |
·RNA-seq 表达谱和 iTRAQ 蛋白质组数据关联分析 | 第70-71页 |
·qRT-PCR 验证 | 第71页 |
·结果与分析 | 第71-75页 |
·蛋白质组与表达谱关联性分析 | 第71页 |
·差异蛋白与表达谱的关联分析 | 第71-73页 |
·差异蛋白与差异基因的关联分析 | 第73-74页 |
·qRT-PCR 验证结果 | 第74-75页 |
·小结与讨论 | 第75-76页 |
第七章 全文总结 | 第76-78页 |
参考文献 | 第78-91页 |
致谢 | 第91-92页 |
作者简介 | 第92页 |