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B型烟粉虱对噻虫嗪抗药性的分子机制研究

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
英文缩略表第10-15页
第一章 引言第15-26页
   ·烟粉虱的概况第15-17页
     ·起源、分布、危害第15页
     ·生物型第15-17页
     ·生物型与药剂敏感性第17页
   ·烟粉虱的防治第17-22页
     ·生物防治及 IPM 策略第17-18页
     ·化学防治第18-22页
   ·杀虫剂抗性的产生及其抗性机制第22页
   ·生物芯片技术简介第22-23页
   ·RNA-seq 表达谱技术第23-24页
   ·蛋白质组(iTRAQ)技术第24页
   ·本研究的主要目的,技术路线及研究内容第24-26页
第二章 B 型烟粉虱对噻虫嗪持续诱导的生化机制研究第26-33页
   ·材料和方法第26-29页
     ·供试昆虫的饲养与收集第26页
     ·供试试剂和化学杀虫剂第26页
     ·主要实验仪器第26-27页
     ·生物测定第27页
     ·TH-2000 样品的处理第27页
     ·蛋白质标准曲线的制备第27页
     ·蛋白含量的测定第27页
     ·谷胱甘肽-S-转移酶活力的测定第27-28页
     ·多功能氧化酶活力的测定第28-29页
   ·结果和分析第29-31页
     ·生物测定结果第29页
     ·解毒酶活力的测定第29-31页
   ·小结与讨论第31-33页
第三章 利用表达谱芯片研究烟粉虱对噻虫嗪的抗性机制第33-51页
   ·材料和方法第33-43页
     ·供试昆虫的饲养及样品收集第33页
     ·表达谱芯片探针的设计第33-35页
     ·总 RNA 的提取及纯化第35-36页
     ·cDNA 第一链及第二链的合成第36-37页
     ·aaUTP 标记 cRNA 合成第37页
     ·cRNA 纯化第37-38页
     ·cRNA 浓度测定第38页
     ·cRNA 样品荧光标记第38页
     ·荧光标记 cRNA 样品纯化第38-39页
     ·荧光分子浓度及掺入率计算第39页
     ·cRNA 样品片段化和芯片杂交第39页
     ·芯片洗涤及扫描第39页
     ·数据的预处理第39-40页
     ·发育阶段特异性差异基因的筛选第40-41页
     ·差异基因表达模式聚类和 GO,KEGG Pathway 富集分析第41-42页
     ·qPCR 验证第42-43页
   ·结果与分析第43-48页
     ·芯片杂交结果第43页
     ·数据的预处理第43页
     ·差异基因筛选第43-45页
     ·基因聚类及 GO 和 Pathway 的富集分析第45-47页
     ·抗性候选基因的筛选第47页
     ·qPCR 验证结果第47-48页
   ·小结与讨论第48-51页
第四章 RNA-seq 表达谱研究烟粉虱抗性机制第51-59页
   ·材料与方法第51-52页
     ·供试昆虫的饲养与收集第51页
     ·RNA 抽提,cDNA 文库的构建及 solexa 测序第51页
     ·原始数据的处理第51-52页
     ·与参考序列的比对第52页
     ·GO 功能注释和 Pathway 富集分析第52页
     ·差异基因筛选第52页
   ·结果与分析第52-57页
     ·测序结果分析第52-53页
     ·测序质量评估第53页
     ·基因表达量的统计第53-54页
     ·差异基因筛选第54-55页
     ·差异基因 GO,Pathway 的富集分析第55-57页
   ·小结与讨论第57-59页
第五章 iTRAQ 蛋白质组对烟粉虱抗性机制的研究第59-70页
   ·材料和方法第59-62页
     ·供试昆虫的饲养与收集第59页
     ·蛋白的提取第59页
     ·蛋白的定量及 SDS 电泳电泳检测第59-60页
     ·蛋白酶解第60页
     ·iTRAQ 标记及样品混合第60页
     ·SCX 分离及液相串联质谱第60页
     ·生物信息分析第60-61页
     ·差异蛋白的筛选第61-62页
   ·结果与分析第62-67页
     ·蛋白浓度的测定第62-63页
     ·蛋白鉴定信息第63页
     ·肽段鉴定数量分布第63-64页
     ·蛋白质丰度比分布第64-65页
     ·蛋白序列覆盖度分布第65页
     ·蛋白质 COG 功能分类第65-66页
     ·差异蛋白的 GO, pathway 的富集分析第66-67页
   ·小结与讨论第67-70页
第六章 RNA-seq 表达谱和 iTRAQ 蛋白质组的关联分析第70-76页
   ·材料与方法第70-71页
     ·供试昆虫与样品收集第70页
     ·RNA-seq 表达谱数据的分析第70页
     ·iTRAQ 蛋白质组数据的分析第70页
     ·RNA-seq 表达谱和 iTRAQ 蛋白质组数据关联分析第70-71页
     ·qRT-PCR 验证第71页
   ·结果与分析第71-75页
     ·蛋白质组与表达谱关联性分析第71页
     ·差异蛋白与表达谱的关联分析第71-73页
     ·差异蛋白与差异基因的关联分析第73-74页
     ·qRT-PCR 验证结果第74-75页
   ·小结与讨论第75-76页
第七章 全文总结第76-78页
参考文献第78-91页
致谢第91-92页
作者简介第92页

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