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葡萄醛脱氢酶基因ALDH2B8表达及功能研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-11页
第一章 文献综述第11-19页
   ·气候变化与环境胁迫第11页
   ·植物胁迫反应及抗性机理第11页
   ·非生物胁迫相关基因产物第11-12页
   ·植物胁迫相关基因的表达调控第12-13页
     ·渗透及氧化胁迫信号途径第12页
     ·Ca~(2+)信号途径第12-13页
     ·SOS 信号途径第13页
   ·ABA 信号途径第13页
   ·胁迫诱导蛋白及渗透调节物质第13-14页
     ·LEA 蛋白第14页
     ·渗透调节物质第14页
   ·活性氧(ROS)第14页
   ·醛类分子与脂膜过氧化第14-15页
   ·醛脱氢酶研究进展第15-17页
     ·醛脱氢酶在抗逆方面功能研究第16-17页
     ·醛脱氢酶是一种 ROS 清除剂第17页
   ·研究目的及意义第17-19页
第二章 葡萄醛脱氢酶基因 ALDH2B8 克隆及表达分析第19-25页
   ·材料第19-20页
     ·植物材料第19页
     ·引物第19页
     ·主要酶、化学试剂及仪器设备第19页
     ·质粒及菌种第19-20页
     ·测序第20页
   ·方法第20-21页
     ·材料处理第20页
     ·总 RNA 提取第20页
     ·cDNA 第一链的合成第20页
     ·qRT-PCR 检测盐胁迫处理后葡萄 ALDH2B8 基因表达第20-21页
     ·葡萄 ALDH2B8 基因克隆及测序第21页
   ·结果与分析第21-24页
     ·葡萄 ALDH2B8 基因在不同组织器官中的表达分析第21-22页
     ·葡萄 ALDH2B8 基因盐胁迫处理后的表达模式分析第22页
     ·葡萄 ALDH2B8 基因克隆第22-23页
     ·葡萄 ALDH2B8 基因序列分析第23-24页
   ·讨论第24-25页
第三章 葡萄 ALDH2B8 亚细胞定位分析第25-30页
   ·材料第25页
     ·引物第25页
     ·植物材料第25页
     ·主要酶、化学试剂及仪器设备第25页
     ·质粒及菌种第25页
     ·测序第25页
   ·方法第25-26页
     ·葡萄 ALDH2B8 基因克隆及测序第25-26页
     ·葡萄 ALDH2B8 亚细胞定位载体构建第26页
     ·拟南芥原生质体制备及 PEG 转染第26页
     ·线粒体染色及检测第26页
   ·结果第26-29页
     ·葡萄 ALDH2B8 基因克隆及融合表达载体构建第26-28页
     ·葡萄 ALDH2B8 线粒体定位分析第28-29页
   ·讨论第29-30页
第四章 葡萄 ALDH2B8 转基因拟南芥抗逆功能研究第30-40页
   ·材料第30页
     ·引物第30页
     ·植物材料第30页
     ·主要化学试剂及仪器设备第30页
     ·质粒及菌种第30页
   ·方法第30-33页
     ·葡萄 ALDH2B8 基因过量表达载体构建第30-31页
     ·农杆菌感受态细胞的制备第31页
     ·农杆菌的转化第31页
     ·菌液 PCR 检测第31-32页
     ·蘸花法转化拟南芥第32页
     ·转基因拟南芥分子水平检测第32页
     ·转基因拟南芥抗逆性鉴定第32页
     ·MDA 及叶绿素含量测定第32-33页
     ·超氧阴离子(O~(2–))和过氧化氢(H_2O_2)定性测定第33页
   ·结果第33-38页
     ·葡萄醛脱氢酶 ALDH2B8 植物过量表达载体构建第33-34页
     ·拟南芥转化及转基因阳性植株获得第34-35页
     ·葡萄 ALDH2B8 在转基因拟南芥 PCR 阳性植株中的表达分析第35-36页
     ·葡萄 ALDH2B8 转基因拟南芥抗逆性分析第36-38页
   ·讨论第38-40页
第五章 结论第40-41页
参考文献第41-47页
致谢第47-48页
作者简介第48页

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