| 致谢 | 第1-4页 |
| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-22页 |
| ·杨树的概述及分子生物学研究进展 | 第9-12页 |
| ·杨树的简介 | 第9页 |
| ·杨树的育种研究进展 | 第9页 |
| ·杨树的主要分子生物学研究进展 | 第9-12页 |
| ·分子标记技术在杨树遗传改良中的应用 | 第10-11页 |
| ·杨树抗性分子生物学的研究进展 | 第11页 |
| ·杨树基因组计划 | 第11-12页 |
| ·其它方面的分子生物学研究进展 | 第12页 |
| ·植物转录因子 | 第12-15页 |
| ·转录因子的结构特征 | 第12-13页 |
| ·主要的植物转录因子 | 第13页 |
| ·AP2／ERF 转录因子家族 | 第13-14页 |
| ·转录因子发挥作用的途径 | 第14-15页 |
| ·植物转录因子的主要功能 | 第15页 |
| ·ERF 类转录因子 | 第15-20页 |
| ·ERF 转录因子的结构 | 第15-16页 |
| ·ERF 转录因子分类 | 第16-17页 |
| ·ERF 转录因子调控的特点 | 第17页 |
| ·ERF 转录因子的功能 | 第17-19页 |
| ·ERF 转录因子在植物信号转导途径中的作用 | 第17-18页 |
| ·ERF 转录因子对下游基因的调控 | 第18-19页 |
| ·ERF 转录因子主要研究进展 | 第19-20页 |
| ·基因克隆技术—RACE 技术 | 第20-21页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第21-22页 |
| 第二章 ERF 家族部分成员的基因全长的 cDNA 克隆 | 第22-42页 |
| ·实验材料 | 第22-23页 |
| ·植物材料 | 第22页 |
| ·载体 | 第22页 |
| ·试剂与试剂盒 | 第22页 |
| ·缓冲液及培养基 | 第22-23页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备 | 第23页 |
| ·仪器设备 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-33页 |
| ·杨树 ERF 基因序列的获取 | 第23-24页 |
| ·杨树 DNA 提取 | 第24页 |
| ·杨树总 RNA 提取 | 第24-25页 |
| ·RNA 纯化 | 第25页 |
| ·RNA 检测 | 第25页 |
| ·RACE 引物设计 | 第25-26页 |
| ·3’ RACE 套式 PCR | 第26-28页 |
| ·3’ RACE 反转录反应 | 第26-27页 |
| ·3’ RACE Outer PCR | 第27页 |
| ·3’ RACE Inner PCR | 第27-28页 |
| ·5’ RACE 套式 PCR | 第28-30页 |
| ·去磷酸化反应 | 第28页 |
| ·去帽子反应 | 第28页 |
| ·5’ RACE Adaptor 的连接 | 第28-29页 |
| ·反转录反应 | 第29页 |
| ·5’ RACE Outer PCR | 第29-30页 |
| ·5’ RACE Inner PCR | 第30页 |
| ·编码区序列的获取 | 第30-32页 |
| ·引物设计 | 第30-31页 |
| ·基因编码区序列的克隆 | 第31页 |
| ·DNA 为模板克隆基因的编码区 | 第31-32页 |
| ·目的片段回收及载体连接 | 第32-33页 |
| ·大肠杆菌 Top10 转化及阳性克隆的 PCR 验证 | 第33页 |
| ·结果与分析 | 第33-42页 |
| ·ERF 成员基因全长的获得 | 第33-35页 |
| ·RNA 质量检测 | 第33-34页 |
| ·RACE 的 PCR 检测 | 第34页 |
| ·基因编码区 PCR 检测 | 第34-35页 |
| ·cDNA 全长的拼接 | 第35页 |
| ·ERF 基因一级结构及理化特性分析 | 第35-36页 |
| ·杨树 ERF 二级结构预测 | 第36页 |
| ·杨树 ERF 蛋白亲/疏水性分析 | 第36-37页 |
| ·ERF 进化树分析 | 第37-38页 |
| ·ERF 基因序列多重比对与特异位点分析 | 第38-40页 |
| ·ERF 三级结构预测 | 第40-42页 |
| 第三章 ERF 基因的表达模式分析 | 第42-52页 |
| ·实验材料与试剂 | 第42页 |
| ·植物材料 | 第42页 |
| ·真菌材料 | 第42页 |
| ·实验试剂 | 第42页 |
| ·仪器设备 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-45页 |
| ·实验材料的处理 | 第42-43页 |
| ·RNA 提取 | 第43-44页 |
| ·总 RNA 的纯化与检测 | 第44页 |
| ·实时定量 PCR | 第44-45页 |
| ·引物设计 | 第44页 |
| ·反转录 cDNA 合成 | 第44-45页 |
| ·Realtime PCR | 第45页 |
| ·结果与分析 | 第45-52页 |
| ·RNA 质量检测 | 第45-46页 |
| ·ERF 在不同组织表达模式 | 第46页 |
| ·ERF 在温度胁迫下的表达模式 | 第46-47页 |
| ·ERF 在干旱胁迫下表达模式 | 第47-48页 |
| ·ERF 在盐胁迫诱导下表达模式 | 第48-49页 |
| ·ERF 在物理伤害诱导下的表达模式 | 第49页 |
| ·ERF 在不同激素诱导下的表达模式 | 第49-50页 |
| ·ERF 在几丁寡糖诱导下表达模式 | 第50页 |
| ·ERF 基因在杨生褐盘二孢菌侵染后的表达模式 | 第50-52页 |
| 第四章 杨树 ERF 基因的细胞定位 | 第52-57页 |
| ·实验材料与试剂 | 第52页 |
| ·植物材料 | 第52页 |
| ·实验试剂 | 第52页 |
| ·缓冲液的配制 | 第52页 |
| ·仪器设备 | 第52页 |
| ·实验方法 | 第52-55页 |
| ·基因编码区克隆 | 第52-53页 |
| ·目的片段连接入门载体 | 第53页 |
| ·表达载体构建 | 第53-54页 |
| ·质粒的提取 | 第54页 |
| ·杨树叶肉原生质体制备 | 第54-55页 |
| ·PEG 法转化原生质体 | 第55页 |
| ·结果与分析 | 第55-57页 |
| 第五章 主要结论与讨论 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 附录 | 第65-67页 |