中文摘要 | 第1-12页 |
ABSTRACT | 第12-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-22页 |
·mRNA输出因子Gle1概述 | 第16-20页 |
·Gle1的结构 | 第16页 |
·Gle1的功能 | 第16-20页 |
·Gle1蛋白与疾病 | 第20页 |
·肽链释放因子与蛋白质翻译终止 | 第20-21页 |
·研究背景及本课题的意义 | 第21-22页 |
第二章 人mRNA输出因子Gle1与第一类肽链释因子的相互作用研究 | 第22-35页 |
·材料 | 第22-25页 |
·菌株与质粒 | 第22页 |
·寡聚核苷酸 | 第22-23页 |
·工具酶及试剂 | 第23页 |
·主要试剂的配制 | 第23-24页 |
·主要实验仪器 | 第24-25页 |
·方法 | 第25-28页 |
·酵母双杂交体系研究hGle1与第一类肽链释放因子heRF1的相互作用 | 第25-26页 |
·免疫共沉淀研究hGle1与第一类肽链释放因子heRF1的相互作用 | 第26-28页 |
·免疫荧光染色 | 第28页 |
·结果 | 第28-33页 |
·酵母双杂交体系研究hGle1与第一类肽链释放因子heRF1的相互作用 | 第28-31页 |
·免疫共沉淀研究hGle1与第一类肽链释放因子heRF1的相互作用 | 第31-33页 |
·hGle1与heRF1在HeLa细胞中的共定位 | 第33页 |
·讨论 | 第33-35页 |
第三章 人mRNA输出因子Gle1与第二类肽链释因子的相互作用研究 | 第35-41页 |
·材料 | 第35页 |
·菌株与质粒 | 第35页 |
·寡聚核苷酸 | 第35页 |
·工具酶及生化试剂的配制 | 第35页 |
·方法 | 第35-36页 |
·酵母双杂交体系研究hGle1与第二类肽链释放因子heRF3的相互作用 | 第35-36页 |
·免疫共沉淀研究hGle1与第二类肽链释放因子heRF3的相互作用 | 第36页 |
·hGle1与heRF3在HeLa细胞中的共定位 | 第36页 |
·结果 | 第36-40页 |
·酵母双杂交体系研究hGle1与第二类肽链释放因子heRF3的相互作用 | 第36-38页 |
·免疫共沉淀研究hGle1与第二类肽链释放因子heRF3的相互作用 | 第38-39页 |
·hGle1与heRF3在HeLa细胞中的共定位 | 第39-40页 |
·讨论 | 第40-41页 |
第四章 hGle1的过表达对HeLa细胞蛋白质翻译终止、蛋白质合成及细胞增殖的影响 | 第41-47页 |
·材料 | 第41页 |
·菌株与质粒 | 第41页 |
·寡聚核苷酸 | 第41页 |
·工具酶及试剂 | 第41页 |
·方法 | 第41-42页 |
·双荧光素酶报告基因通读率的测定 | 第41-42页 |
·重组表达质粒pCMV-Tag2B-GST的构建 | 第42页 |
·报告基因活性的测定 | 第42页 |
·MTT法检测HeLa细胞增殖 | 第42页 |
·结果 | 第42-46页 |
·hGle1的过表达对HeLa细胞蛋白质翻译终止的影响 | 第42-44页 |
·hGle1的过表达对HeLa细胞中海肾荧光素酶合成的影响 | 第44-45页 |
·hGle1的过表达对HeLa细胞增殖的影响 | 第45-46页 |
·讨论 | 第46-47页 |
第五章 人mRNA输出因子Gle1与两类肽链释因子相互作用结构域的研究 | 第47-50页 |
·材料 | 第47页 |
·菌株与质粒 | 第47页 |
·寡聚核苷酸 | 第47页 |
·主要酶及生化试剂的配制 | 第47页 |
·方法 | 第47页 |
·hGle1基因内截短突变 | 第47页 |
·酵母双杂交的共转化及β-半乳糖苷酶活性分析 | 第47页 |
·结果 | 第47-49页 |
·酵母双杂交重组质粒的构建 | 第47-48页 |
·β-半乳糖苷酶活性分析 | 第48-49页 |
·讨论 | 第49-50页 |
小结与展望 | 第50-52页 |
参考文献 | 第52-57页 |
附录 | 第57-59页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第59-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
个人简介及联系方式 | 第61-63页 |