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转诱导型生长激素基因猪研究

摘要第1-11页
ABSTRACT第11-14页
缩略语中英文对照第14-16页
第一篇 文献综述第16-36页
 第一章 转生长激素基因动物研究综述第16-28页
  1 生长激素概述第16-20页
   ·生长激素的生物学研究第16-19页
   ·生长激素在动物生产上所具有的经济价值第19-20页
  2 转生长激素基因动物第20-23页
   ·生产转GH基因动物的必要性第21页
   ·转GH基因动物种类第21-22页
   ·生产转GH基因动物出现的问题第22-23页
  3 总结第23页
  参考文献第23-28页
 第二章 四环素调控表达系统研究综述第28-36页
  1 哺乳动物基因诱导表达系统简介第28页
  2 四环素调控系统第28-32页
   ·TetO诱导表达系统的建立第28-29页
   ·Tet-On/Tet-Off作用机制比较第29-30页
   ·TetO诱导表达系统的优点第30-31页
   ·常用TetO诱导表达系统的载体第31-32页
   ·TetO诱导表达系统的应用第32页
  3 研究目的与意义第32-33页
  参考文献第33-36页
第二篇 试验部分第36-116页
 第一章 利用显微注射线性DNA片段的方法生产转Tet-On诱导的pGH基因猪研究第36-64页
  1 材料方法第36-50页
   ·试验材料第36-38页
   ·试验方法第38-50页
  2 结果第50-60页
   ·pGH基因rtTA Advanceed基因和扩增及测序第50页
   ·pGH基因信号肽分析第50-51页
   ·诱导表达载体鉴定第51-52页
   ·大白猪PEF系的建立第52页
   ·目的基因表达分析第52-54页
   ·注射用DNA第54-55页
   ·转基因后代的鉴定第55-60页
  3 讨论第60-61页
  参考文献第61-64页
 第二章 稳定表达转诱导型pGH基因细胞系的建立第64-86页
  1 材料方法第64-70页
   ·材料第64-66页
   ·实验方法第66-70页
  2 试验结果第70-82页
   ·梅山猪胎儿成纤维细胞系第70-71页
   ·慢病毒对细胞系的筛选第71-76页
   ·睡美人系统筛选诱导表达细胞系第76-82页
  3 讨论第82-84页
  参考文献第84-86页
 第三章 肝脏强效特异表达启动子的构建第86-104页
  1 材料方法第87-93页
   ·材料第87页
   ·方法第87-93页
  2 试验结果第93-100页
   ·猪白蛋白核心启动子生物信息学分析第93-95页
   ·启动子荧光素酶检测载体的鉴定第95-97页
   ·荧光素酶活性分析第97-100页
  3 讨论第100-102页
  参考文献第102-104页
 第四章 GHR、IGFⅠR和IGFⅡR基因表达规律研究第104-116页
  1 材料方法第104-106页
   ·材料第104页
   ·方法第104-106页
  2 试验结果第106-111页
   ·GHR时空表达模式第106-107页
   ·IGFⅠR时空表达模式第107-109页
   ·IGFⅡR时空表达模式第109-111页
  3 讨论第111-113页
  参考文献第113-116页
附录第116-131页
 附录一 主要溶液的配制第116-118页
 附录二 显微注射DNA片段(TRE-Tight-BI-GH-rtTA-Advanced)序列第118-119页
 附录三 G0代转基因猪与非转基因猪后代的PCR鉴定第119-123页
 附录四 白蛋白启动子转录因子结合位点分析第123-127页
 附录五 GHR、IGFⅠR、IGⅡR和GAPDH定量引物标准曲线第127-131页
全文结论第131-132页
创新之处第132-134页
需要进一步研究的内容第134-135页
攻读博士期间发表的论文第135-136页
致谢第136页

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