| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 縮略符号 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-20页 |
| ·柑橘产业发展现状 | 第12页 |
| ·柑橘全爪螨的研究现状 | 第12-14页 |
| ·柑橘全爪螨的生物学特性 | 第12页 |
| ·柑橘全爪螨的遗传结构分析研究进展 | 第12-13页 |
| ·柑橘全爪螨抗性的研究进展 | 第13页 |
| ·柑橘全爪螨抗性机理的研究进展 | 第13-14页 |
| ·几丁质酶的研究进展 | 第14-16页 |
| ·几丁质酶的分布及生物学特性 | 第14-15页 |
| ·几丁质酶在植物保护中的作用 | 第15-16页 |
| ·RNAi技术原理及其应用的研究进展 | 第16-17页 |
| ·RNAi的发现 | 第16页 |
| ·RNAi的作用机制 | 第16-17页 |
| ·RNAi的应用 | 第17页 |
| ·柑橘遗传转化再生系统的研究进展 | 第17-20页 |
| 第二章 引言 | 第20-24页 |
| ·研究的目的与意义 | 第20页 |
| ·研究的主要内容 | 第20-22页 |
| ·主要技术路线 | 第22-24页 |
| 第三章 材料与方法 | 第24-38页 |
| ·材料 | 第24-26页 |
| ·供试螨源 | 第24页 |
| ·供试柑橘品种 | 第24页 |
| ·实验菌株 | 第24页 |
| ·分子生物学试剂 | 第24-25页 |
| ·培养基的配制 | 第25页 |
| ·主要仪器 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-38页 |
| ·柑橘全爪螨总RNA的提取及检测 | 第26页 |
| ·RNA反转录cDNA | 第26-27页 |
| ·几丁质酶Unigene7021全长基因的克隆 | 第27-29页 |
| ·PCR产物的回收、纯化、测序与比对 | 第29-30页 |
| ·几丁质酶基因Unigene7021目标片段的扩增 | 第30页 |
| ·利用RNAi技术构建干扰载体 | 第30-32页 |
| ·工程菌的转化 | 第32-34页 |
| ·外植体的转化 | 第34-36页 |
| ·转化植株的初步鉴定 | 第36-38页 |
| 第四章 结果与分析 | 第38-52页 |
| ·引物设计结果 | 第38-39页 |
| ·Unigene7021基因全长cDNA克隆引物的设计 | 第38页 |
| ·Unigene7021基因构建干扰载体引物的设计 | 第38-39页 |
| ·转基因植株PCR检测引物 | 第39页 |
| ·总RNA的提取 | 第39-40页 |
| ·Unigene7021全长基因克隆的结果与分析 | 第40-42页 |
| ·Unigene7021 5'-RACE的扩增结果 | 第40-41页 |
| ·Unigene7021 3'-RAC的扩增结果 | 第41页 |
| ·Unigene7021基因RACE测序结果分析及全长基因的获得 | 第41-42页 |
| ·Unigene7021基因RNAi载体的构建 | 第42-48页 |
| ·Unigene7021正、反向干扰片段的TA克隆与PCR扩增检测与分析 | 第42-44页 |
| ·RNAi载体的构建 | 第44-48页 |
| ·RNAi载体在柑橘中的表达结果与分析 | 第48-52页 |
| ·农杆菌侵染外植体的结果与分析 | 第48-49页 |
| ·PCR阳性植株的获得 | 第49-52页 |
| 第五章 讨论 | 第52-56页 |
| ·关于几丁质酶Unigene7021作为目标基因的讨论 | 第52页 |
| ·关于全长基因及干扰片段的克隆 | 第52-54页 |
| ·全长基因的克隆 | 第52-53页 |
| ·引物和酶切位点的设计与选择 | 第53-54页 |
| ·关于构建植物RNAI表达载体的讨论 | 第54页 |
| ·关于柑橘植株转化再生体系的讨论 | 第54-55页 |
| ·关于转基因植株的抗性评价 | 第55-56页 |
| 第六章 结论 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 致谢 | 第64-66页 |
| 发表论文和参研项目 | 第66页 |
