致谢 | 第1-11页 |
摘要 | 第11-12页 |
ABSTRACT | 第12-13页 |
第一章 文献综述部分 | 第13-27页 |
1 稻瘟病与稻瘟病菌 | 第13-15页 |
·稻瘟病 | 第13页 |
·稻瘟病菌的侵染循环 | 第13-15页 |
2 CAMP-PKA信号途径概述 | 第15-20页 |
·酵母中cAMP-PKA信号途径研究进展 | 第15-18页 |
·稻瘟病菌中cAMP-PKA信号途径概述 | 第18-20页 |
3 稻瘟病菌中与孢子发育分化过程有关的转录因子研究概述 | 第20-21页 |
4 甲硫氨酸代谢(METHIONINE CYCLE)和MTHFR概述 | 第21-27页 |
·甲硫氨酸循环与叶酸循环 | 第21-23页 |
·MTHFR概述 | 第23-27页 |
·MTHFR的分子系统发育 | 第23-24页 |
·真菌中MTHFR的分类:MET12和MET13 | 第24-27页 |
第二章 材料与方法 | 第27-45页 |
1 实验材料 | 第27-31页 |
·供试菌株 | 第27页 |
·质粒载体 | 第27页 |
·供试植物 | 第27页 |
·试剂 | 第27-28页 |
·培养基 | 第28-30页 |
·缓冲液 | 第30-31页 |
2 DAN和RNA的操作 | 第31-45页 |
·稻瘟病菌基因组的提取 | 第31-32页 |
·快速小量抽提稻瘟病菌基因组方法 | 第31页 |
·Plant DNAzol法大量提取基因组DNA | 第31-32页 |
·稻瘟病菌RNA抽提 | 第32页 |
·cDNA第一链合成 | 第32-33页 |
·质粒操作 | 第33-34页 |
·质粒提取(CTAB法) | 第33页 |
·质粒酶切体系 | 第33-34页 |
·DNA片段的凝胶回收 | 第34页 |
·酶切片段的去磷酸化(SAP) | 第34页 |
·连接反应 | 第34页 |
·PCR反应和质粒转化 | 第34-36页 |
·常规PCR反应 | 第34-35页 |
·质粒转化 | 第35-36页 |
·稻瘟病菌原生质体的制备与转化 | 第36-37页 |
·稻瘟病菌基因组southern杂交 | 第37-40页 |
·DIG-DNA标记 | 第37页 |
·稻瘟病菌基因组DNA的消化、电泳及变性 | 第37-38页 |
·DNA转膜 | 第38-39页 |
·Southern杂交过程 | 第39页 |
·免疫显色 | 第39-40页 |
·稻瘟病菌性状观察实验 | 第40-41页 |
·致病性测定实验 | 第40页 |
·有性生殖实验 | 第40页 |
·洋葱表皮穿透实验 | 第40-41页 |
·附着胞诱导实验 | 第41页 |
·载体构建 | 第41-45页 |
·缺失载体构建 | 第41-44页 |
·异源互补载体构建 | 第44-45页 |
第三章 结果与分析 | 第45-60页 |
1 受MOSOM1 调控的基因的敲除与功能分析 | 第45-50页 |
·缺失突变体的获得及基因缺失验证 | 第46-48页 |
·敲除突变体的生物学性状分析 | 第48-50页 |
2 其它基因的敲除及功能研究 | 第50-53页 |
·转化子的验证及致病性观察 | 第51-53页 |
3 稻瘟病菌中与甲硫氨酸途径相关的基因功能研究 | 第53-60页 |
·Δmomet12和Δmomet13敲除验证 | 第54-56页 |
·甲硫氨酸途径相关基因在MoMET相关突变体中的表达分析 | 第56-59页 |
·FgMET13异源互补Δmomet13突变体 | 第59-60页 |
第四章 全文总结讨论 | 第60-63页 |
参考文献 | 第63-69页 |
附录 | 第69-71页 |