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宿主限制因子APOBEC3、BST-2的抗病毒功能及免疫缺陷病毒突破宿主防御系统的分子机制研究

中文摘要第1-7页
Abstract第7-14页
第1章 前言第14-36页
   ·病毒感染因子 Vif 蛋白的研究现状第14-21页
     ·HIV-1 及 FIV 简介第14-17页
     ·病毒辅助蛋白及宿主限制因子第17-18页
     ·Vif 蛋白的功能及性质第18-21页
   ·APOBEC3 蛋白的功能及与 Vif 蛋白相互作用研究现状第21-25页
     ·APOBEC3 蛋白的发现与抗病毒原理第21-23页
     ·Vif 蛋白拮抗 APOBEC3 蛋白的作用途径第23-25页
   ·BST-2 蛋白的功能及与 Vpu 蛋白相互作用研究现状第25-29页
     ·BST-2 蛋白的发现与抗病毒原理第25-28页
     ·免疫缺陷病毒对 BST-2 蛋白的拮抗作用第28-29页
   ·SAMHD1 蛋白的发现及功能第29-32页
     ·SAMHD1 蛋白的发现及抗病毒原理第29-31页
     ·Vpx 蛋白拮抗 SAMHD1 蛋白的作用途径第31-32页
   ·猫宿主限制因子研究意义及现状第32-35页
   ·立题依据第35-36页
第2章 材料与方法第36-50页
   ·材料及常规仪器第36-42页
     ·质粒以及相关突变体构建第36-42页
   ·仪器与设备第42-43页
   ·方法与试剂第43-50页
     ·细胞培养及转染第43-44页
     ·逆转录 PCR第44-45页
     ·免疫印记分析第45页
     ·病毒的制备与收获第45-46页
     ·指示细胞测定病毒相对感染性第46页
     ·免疫沉淀第46-47页
     ·免疫荧光第47页
     ·流式细胞术第47-48页
     ·蛋白纯化及 N 端测序第48页
     ·原核细胞蛋白纯化第48-49页
     ·荧光素酶分析法检测 NF-κB 活性第49-50页
第3章 结果与讨论第50-98页
   ·FIV Vif 蛋白与猫 APOBEC3 蛋白相互作用研究第50-65页
     ·相关基因的调取构建及分析第50-53页
     ·FIV Vif 通过形成 E3 复合物利用蛋白酶体途径降解猫 A3s 蛋白第53-54页
     ·Cul5 以及 EC 突变体对降解过程的影响第54-56页
     ·FIV Vif 的 BC-box 区域突变对其功能的影响第56-58页
     ·FIV Vif 通过一种新的机制与 Cul5 结合第58-61页
     ·讨论第61-63页
     ·小结第63-65页
   ·猫 BST-2 蛋白与猫 BCA2 蛋白相互作用研究第65-72页
     ·相关基因的预测,调取和构建表达第66-67页
     ·猫 BST-2 蛋白多克隆抗体的制备第67页
     ·猫 BST-2 蛋白野生型与合成型的抗病毒能力比较第67-69页
     ·猫 BST-2 蛋白野生型与合成型与 BCA2 蛋白结合能力比较第69-70页
     ·讨论第70-71页
     ·小结第71-72页
   ·BST-2 蛋白突变体的功能研究第72-91页
     ·BST-2 截短体功能预实验第72-73页
     ·BST-2 不同突变体的设计与构建表达第73-75页
     ·BST-2 不同突变体的抗病毒能力检测第75-78页
     ·BST-2 ΔN20 蛋白纯化及 N 端测序第78-79页
     ·BST-2 不同突变体的糖基化程度测试第79-80页
     ·BST-2 不同突变体的胞内定位检测第80-81页
     ·BST-2 不同突变体的表面分布分析第81-83页
     ·BST-2 ΔN20 的 N 端融合表达不同标签对功能和性质的影响第83-87页
     ·BST-2 不同突变体激活 NF-κB 活性的能力第87-88页
     ·讨论第88-90页
     ·小结第90-91页
   ·不同种属 SAMHD1 蛋白的基本性质研究第91-98页
     ·不同种属 SAMHD1 基因的预测,调取和构建表达第91-93页
     ·不同种属 SAMHD1 重要功能区预测第93-94页
     ·不同种属 SAMHD1 蛋白胞内定位分析第94-96页
     ·讨论第96页
     ·小结第96-98页
结论第98-100页
参考文献第100-114页
作者简历第114-116页
致谢第116页

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