内容提要 | 第1-5页 |
中文摘要 | 第5-8页 |
ABSTRACT | 第8-16页 |
前言 | 第16-18页 |
第1章 综述 | 第18-32页 |
·HER-2 基因 | 第18-19页 |
·HER-2 结构 | 第18-19页 |
·HER-2 与 EGFR 家族 | 第19页 |
·HER-2 信号传导通路 | 第19-20页 |
·受体二聚化 | 第19-20页 |
·细胞内信号转导通路 | 第20页 |
·HER-2 与肿瘤 | 第20-22页 |
·HER-2 过表达与肿瘤的发生 | 第20-21页 |
·HER-2 与肿瘤的浸润、转移 | 第21页 |
·HER-2 与肿瘤血管形成 | 第21-22页 |
·HER2 与抑制肿瘤细胞凋亡 | 第22页 |
·HER2 与乳腺癌 | 第22-25页 |
·HER2 与 ER、PR | 第22-23页 |
·抗 HER2 治疗策略 | 第23页 |
·HER2 与抗体 | 第23-24页 |
·HER-2 与放疗 | 第24-25页 |
·RNAI | 第25-29页 |
·RNAi 简介 | 第25-26页 |
·RNAi 的发现历史 | 第26-27页 |
·RNAi 与 siRNA、shRNA | 第27页 |
·RNAi 的特征 | 第27页 |
·RNAi 的优势 | 第27-28页 |
·RNAi 的应用领域 | 第28页 |
·RNAi 与 HER-2 阳性乳腺癌研究进展 | 第28-29页 |
·自噬与乳腺癌 | 第29-30页 |
·自噬 | 第29页 |
·细胞自噬机制 | 第29页 |
·自噬与乳腺癌 | 第29-30页 |
·本课题研究的意义及前景展望 | 第30-32页 |
第2章 材料与方法 | 第32-46页 |
·主要试剂及器材 | 第32-35页 |
·试剂 | 第32-34页 |
·器材 | 第34页 |
·主要仪器 | 第34-35页 |
·细胞株培养 | 第35-36页 |
·细胞株 | 第35页 |
·细胞培养试剂的配制 | 第35-36页 |
·慢病毒载体的构建 | 第36-38页 |
·LB 液体培养基的配制; LB 固体培养基的配制: | 第36页 |
·质粒和细胞株 | 第36-38页 |
·SKBR-3 SHRNA 慢病毒载体的构建、鉴定及抽提 | 第38-39页 |
·SKBR-3shRNA 序列的设计及合成 | 第38页 |
·HER2shRNA 的重组质粒载体的构建及鉴定 | 第38-39页 |
·转染级重组质粒的抽提 | 第39页 |
·慢病毒的包装、收获、浓缩及滴度测定 | 第39页 |
·慢病毒感染目的细胞及基因表达沉默效果检测 | 第39-43页 |
·SKBR3 细胞的培养、计数、冻存、复苏及传代 | 第39页 |
·靶细胞感染 | 第39-40页 |
·SKBR3 细胞病毒感染实验 | 第40-41页 |
·沉默效果检测 | 第41-43页 |
·集落形成法与 MDC 法 | 第43-44页 |
·实验分组 | 第43页 |
·集落形成法 | 第43-44页 |
·MDC 荧光染色检测自噬 | 第44页 |
·DAPI 检测细胞凋亡 | 第44-45页 |
·照射条件 | 第45页 |
·统计学分析 | 第45-46页 |
第3章 实验结果 | 第46-51页 |
·不同处理组细胞的 HER2 蛋白表达水平 | 第46页 |
·不同处理组细胞中 HER2MRNA 表达水平 | 第46-47页 |
·通过集落形成法检测辐射敏感性 | 第47-48页 |
·MDC 法检测细胞自噬 | 第48-49页 |
·DAPI 检测细胞凋亡 | 第49-51页 |
第4章 讨论 | 第51-54页 |
·慢病毒载体介导 RNAI 优势 | 第51-52页 |
·沉默 HER2 基因表达后,细胞对电离辐射敏感性的变化 | 第52页 |
·沉默 SKBR3 细胞对自噬及凋亡的影响 | 第52-54页 |
第5章 结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-61页 |
作者简介及在学期间取得的科研成果 | 第61-62页 |
致谢 | 第62页 |