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RNA干扰HER2基因对乳腺癌电离辐射敏感性、自噬及凋亡的影响

内容提要第1-5页
中文摘要第5-8页
ABSTRACT第8-16页
前言第16-18页
第1章 综述第18-32页
   ·HER-2 基因第18-19页
     ·HER-2 结构第18-19页
     ·HER-2 与 EGFR 家族第19页
   ·HER-2 信号传导通路第19-20页
     ·受体二聚化第19-20页
     ·细胞内信号转导通路第20页
   ·HER-2 与肿瘤第20-22页
     ·HER-2 过表达与肿瘤的发生第20-21页
     ·HER-2 与肿瘤的浸润、转移第21页
     ·HER-2 与肿瘤血管形成第21-22页
     ·HER2 与抑制肿瘤细胞凋亡第22页
   ·HER2 与乳腺癌第22-25页
     ·HER2 与 ER、PR第22-23页
     ·抗 HER2 治疗策略第23页
     ·HER2 与抗体第23-24页
     ·HER-2 与放疗第24-25页
   ·RNAI第25-29页
     ·RNAi 简介第25-26页
     ·RNAi 的发现历史第26-27页
     ·RNAi 与 siRNA、shRNA第27页
     ·RNAi 的特征第27页
     ·RNAi 的优势第27-28页
     ·RNAi 的应用领域第28页
     ·RNAi 与 HER-2 阳性乳腺癌研究进展第28-29页
   ·自噬与乳腺癌第29-30页
     ·自噬第29页
     ·细胞自噬机制第29页
     ·自噬与乳腺癌第29-30页
   ·本课题研究的意义及前景展望第30-32页
第2章 材料与方法第32-46页
   ·主要试剂及器材第32-35页
     ·试剂第32-34页
     ·器材第34页
     ·主要仪器第34-35页
   ·细胞株培养第35-36页
     ·细胞株第35页
     ·细胞培养试剂的配制第35-36页
   ·慢病毒载体的构建第36-38页
     ·LB 液体培养基的配制; LB 固体培养基的配制:第36页
     ·质粒和细胞株第36-38页
   ·SKBR-3 SHRNA 慢病毒载体的构建、鉴定及抽提第38-39页
     ·SKBR-3shRNA 序列的设计及合成第38页
     ·HER2shRNA 的重组质粒载体的构建及鉴定第38-39页
     ·转染级重组质粒的抽提第39页
   ·慢病毒的包装、收获、浓缩及滴度测定第39页
   ·慢病毒感染目的细胞及基因表达沉默效果检测第39-43页
     ·SKBR3 细胞的培养、计数、冻存、复苏及传代第39页
     ·靶细胞感染第39-40页
     ·SKBR3 细胞病毒感染实验第40-41页
     ·沉默效果检测第41-43页
   ·集落形成法与 MDC 法第43-44页
     ·实验分组第43页
     ·集落形成法第43-44页
     ·MDC 荧光染色检测自噬第44页
   ·DAPI 检测细胞凋亡第44-45页
   ·照射条件第45页
   ·统计学分析第45-46页
第3章 实验结果第46-51页
   ·不同处理组细胞的 HER2 蛋白表达水平第46页
   ·不同处理组细胞中 HER2MRNA 表达水平第46-47页
   ·通过集落形成法检测辐射敏感性第47-48页
   ·MDC 法检测细胞自噬第48-49页
   ·DAPI 检测细胞凋亡第49-51页
第4章 讨论第51-54页
   ·慢病毒载体介导 RNAI 优势第51-52页
   ·沉默 HER2 基因表达后,细胞对电离辐射敏感性的变化第52页
   ·沉默 SKBR3 细胞对自噬及凋亡的影响第52-54页
第5章 结论第54-55页
参考文献第55-61页
作者简介及在学期间取得的科研成果第61-62页
致谢第62页

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