| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-19页 |
| ·猪传染性胃肠炎研究进展 | 第10-15页 |
| ·TGEV 的生物学分类地位 | 第10-11页 |
| ·TGEV 粒子结构 | 第11页 |
| ·TGEV 结构蛋白及其生物学功能 | 第11-13页 |
| ·TGEV 理化特性 | 第13页 |
| ·TGEV 疫苗的研究进展 | 第13-15页 |
| ·噬菌体展示技术的研究进展 | 第15-17页 |
| ·噬菌体随机肽库 | 第15页 |
| ·噬菌体筛选 | 第15-16页 |
| ·噬菌体展示技术的应用 | 第16-17页 |
| ·研究的目的与意义 | 第17-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-34页 |
| ·实验材料 | 第19-20页 |
| ·病毒株、细胞株、菌株及质粒 | 第19页 |
| ·主要工具酶、抗体及分子生物学试剂盒 | 第19页 |
| ·主要药品及试剂 | 第19页 |
| ·实验试剂配制 | 第19-20页 |
| ·主要实验仪器设备 | 第20页 |
| ·试验方法 | 第20-34页 |
| ·提取表达菌中的质粒 | 第20-21页 |
| ·Rosetta 感受态的制备 | 第21页 |
| ·阳性质粒转化到 Rosetta 感受态 | 第21页 |
| ·pGEX-TGEV-M 融合蛋白和 pGEX 空载体蛋白的表达 | 第21-22页 |
| ·pGEX-TGEV-M 融合蛋白和 pGEX 空载体蛋白的纯化 | 第22-23页 |
| ·表达产物的 western-blot 鉴定 | 第23页 |
| ·纯化后蛋白的复性 | 第23-24页 |
| ·噬菌体随机十二肽库对靶分子亲和配体的生物淘选 | 第24-26页 |
| ·结合克隆的特征鉴定 | 第26-28页 |
| ·所选多肽配体共有氨基酸序列的推导及合成 | 第28页 |
| ·phage-ELISA、antibody-ELSIA 与 RT-PCR 对 TGEV 的敏感性分析 | 第28-30页 |
| ·phage-ELISA 对 TGEV 的鉴别诊断实验 | 第30页 |
| ·合成多肽对 TGEV M 蛋白的特异性分析 | 第30-31页 |
| ·多肽的体外抗病毒活性检测 | 第31-34页 |
| 3 实验结果 | 第34-46页 |
| ·重组质粒的双酶切鉴定以及菌液 PCR 鉴定 | 第34-35页 |
| ·重组蛋白的表达及鉴定 | 第35-36页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第36-37页 |
| ·噬菌体十二肽库对靶分子的淘选结果及功能鉴定 | 第37-46页 |
| ·淘选产物的滴度测定 | 第37页 |
| ·噬菌体结合克隆的 ELISA 初步鉴定 | 第37-38页 |
| ·噬菌体结合克隆模板 DNA 的纯化 | 第38页 |
| ·噬菌体结合克隆的核苷酸序列测定 | 第38-39页 |
| ·phage-ELISA 与 antibody-ELISA、RT-PCR 三种检测方法的敏感性比较 | 第39-40页 |
| ·phage-ELISA 的特异性分析 | 第40-41页 |
| ·多肽对 M 蛋白的结合特异性 | 第41-42页 |
| ·蚀斑实验鉴定多肽抑制病毒的有效作用途径 | 第42页 |
| ·多肽对病毒的体外抑制作用 | 第42-46页 |
| 4 讨论 | 第46-50页 |
| ·M 蛋白、原核表达载体及宿主表达菌的选择 | 第46页 |
| ·分析 SDS-PAGE 凝胶电泳原理以及蛋白质变性复性的原因 | 第46-47页 |
| ·噬菌体淘选过程中的注意事项 | 第47页 |
| ·针对 M 蛋白所淘选的噬菌体的特殊意义 | 第47-48页 |
| ·M 蛋白亲和肽的合成与鉴定 | 第48页 |
| ·噬菌体展示技术在制备多肽药物方面的研究进展 | 第48-50页 |
| 5 结论 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第56页 |
