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水相体系酶法制备甘油磷脂酰胆碱及酰基转移机理研究

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
中英文缩写词对照表第10-11页
第一章 绪论第11-23页
   ·甘油磷脂酰胆碱第11-12页
     ·甘油磷脂酰胆碱的物理、化学性质第11页
     ·甘油磷脂酰胆碱的医药应用价值第11页
     ·甘油磷脂酰胆碱的最新国内外研究进展第11-12页
   ·绿色生物酶制取技术第12-14页
     ·磷脂酶第12-13页
     ·大豆粉末磷脂第13-14页
   ·树脂-硅胶柱色谱联用技术第14-15页
     ·柱色谱纯化原理及步骤第14页
     ·树脂柱色谱第14-15页
     ·硅胶柱色谱第15页
     ·树脂-硅胶柱色谱联用技术第15页
   ·立题依据及意义第15-16页
   ·课题的主要研究内容第16-17页
 参考文献第17-23页
第二章 磷脂酶 A_1水解大豆粉末磷脂制备甘油磷脂酰胆碱第23-41页
   ·前言第23页
   ·材料与方法第23-26页
     ·试验材料、试剂第23页
     ·仪器设备第23-24页
     ·实验原理第24页
     ·酶活实验第24页
     ·实验步骤第24-25页
     ·HPLC-ELSD第25-26页
     ·响应面优化磷脂酶 A_1水解工艺条件第26页
   ·结果与讨论第26-38页
     ·HPLC-ELSD 分析第26-27页
     ·单因素试验第27-30页
     ·响应面优化酶水解反应的工艺条件第30-35页
     ·酶水解反应的机理研究第35-38页
   ·本章小结第38页
 参考文献第38-41页
第三章 磷脂酶 A_1氨基酸序列的检测及其水解机理研究第41-59页
   ·前言第41页
   ·材料与方法第41-42页
     ·试验材料第41页
     ·仪器设备第41页
     ·超滤法第41页
     ·半制备 RP-HPLC第41-42页
     ·胰蛋白酶水解磷脂酶 A_1第42页
     ·MALDI SYNAPT Q-TOF MS第42页
     ·MALDI-TOF-MS 和 TOF-MS/MS第42页
   ·结果与讨论第42-57页
     ·超滤法纯化磷脂酶 A_1第42-43页
     ·半制备 RP-HPLC 纯化磷脂酶 A_1第43-44页
     ·分析酶蛋白亚基和磷脂酶 A_1的分子量第44-45页
     ·预测磷脂酶 A_1的氨基酸序列第45-47页
     ·磷脂酶 A_1的氨基酸组成分析第47-48页
     ·磷脂酶 A_1的 3D 结构模拟第48-54页
     ·磷脂酶 A_1水解磷脂酰胆碱的机理研究第54-56页
     ·磷脂酶 A_1水解磷脂酰胆碱的微观过程分析第56-57页
   ·本章小结第57页
 参考文献第57-59页
第四章 溶血磷脂酰基转移的影响规律及机理研究第59-69页
   ·前言第59页
   ·材料与方法第59-61页
     ·试验材料第59页
     ·仪器设备第59页
     ·酰基转移机理第59-60页
     ·HPLC-RID第60页
     ·HPLC-ELSD第60-61页
     ·样品浓度测定第61页
     ·~(13)C NMR第61页
     ·数据处理第61页
   ·结果与讨论第61-67页
     ·磷脂酶 A_1水解磷脂酰胆碱过程分析第61页
     ·~(13)C NMR 验证磷脂酶 A_1的专一性第61-63页
     ·酰基转移方向性验证第63-64页
     ·工艺参数对酰基转移的影响规律第64-66页
     ·酰基转移的抑制机理第66-67页
   ·本章小结第67页
 参考文献第67-69页
第五章 树脂-硅胶柱色谱联用技术纯化甘油磷脂酰胆碱的研究第69-83页
   ·前言第69页
   ·材料与方法第69-72页
     ·试验材料第69-70页
     ·仪器设备第70页
     ·树脂柱色谱第70页
     ·硅胶柱色谱第70-71页
     ·HPLC-ELSD第71页
     ·原子吸收光谱第71页
     ·共振光散射光谱第71页
     ·比旋光度第71页
     ·L-α-GPC 定性分析第71-72页
   ·结果与讨论第72-80页
     ·HPLC-ELSD第72页
     ·去除 Ca~(2+)第72-73页
     ·去除 Cl第73-74页
     ·硅胶柱色谱洗脱剂的选择第74-75页
     ·上样量和上样浓度对柱效的影响第75-76页
     ·硅胶柱洗脱流速的选择第76页
     ·活性炭脱色第76-77页
     ·硅胶的重复使用性和再生第77页
     ·L-α-GPC 的定性分析第77-80页
   ·本章小结第80页
 参考文献第80-83页
第六章 硅胶吸附甘油磷脂酰胆碱的动力学和热力学研究第83-91页
   ·引言第83页
   ·材料与方法第83-86页
     ·试验材料第83页
     ·仪器设备第83页
     ·样品处理第83页
     ·硅胶吸附率和吸附量测定第83页
     ·静态吸附平衡第83页
     ·静态吸附等温线测定第83-84页
     ·未反应核收缩模型模拟硅胶吸附过程第84-86页
   ·结果与讨论第86-89页
     ·硅胶吸附动力学第86页
     ·吸附速率控制模型第86-87页
     ·静态吸附平衡第87页
     ·硅胶吸附热力学模型第87-89页
   ·本章小结第89页
 参考文献第89-91页
主要结论与展望第91-93页
 一、主要结论第91-92页
 二、展望第92-93页
论文主要创新点第93-94页
致谢第94-95页
攻读博士期间发表的论文和取得的学术成果第95-96页
附录一第96-97页

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