| 第一部分拟南芥硫转运蛋白SULTR3;1定位于叶绿体并影响植物激素ABA的合成 | 第1-66页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 第1章 绪论 | 第10-20页 |
| ·硫转运蛋白在植物硫酸盐转运过程中的作用 | 第10-13页 |
| ·硫营养环境和植物激素对硫营养同化和代谢通路的调节作用 | 第13-14页 |
| ·ABA的生物合成 | 第14-17页 |
| ·ABA的合成部位 | 第14-15页 |
| ·ABA的生物合成途径及调控 | 第15-17页 |
| ·ABA生物合成缺陷型突变体 | 第17页 |
| ·ABA抑制高等植物种子萌发 | 第17页 |
| ·ABA的生物合成依赖含钼辅酶的硫化 | 第17-20页 |
| 第2章 实验结果 | 第20-39页 |
| ·SULTR3;1定位于叶绿体的双层膜上 | 第20-25页 |
| ·SULTR3;1影响叶绿体中的硫酸盐含量 | 第25-26页 |
| ·SULTR3;1基因的叶特异表达模式与其在叶绿体中的功能相一致· | 第26-28页 |
| ·SULTR3;1缺失显著下调植物中的ABA含量 | 第28-29页 |
| ·外源硫酸盐浓度对ABA和半胱氨酸含量有显著影响 | 第29-33页 |
| ·SULTR3;1的转录水平和表达模式受ABA影响 | 第33-36页 |
| ·SULTR3;1基因的缺失改变了植物在种子萌发和根系生长阶段对于外源ABA的响应 | 第36-39页 |
| 第3章 讨论 | 第39-44页 |
| ·硫转运蛋白SULTR3；1定位于叶绿体并影响叶绿体中的硫酸盐含量 | 第39-40页 |
| ·SULTR3;1基因的缺失对于ABA合成有显著影响 | 第40-41页 |
| ·硫吸收/同化通路与ABA合成通路之间的交汇可以有效帮助对于植物对抗非生物胁迫 | 第41-44页 |
| 第4章 实验材料和方法 | 第44-60页 |
| ·植物材料和生长环境 | 第44页 |
| ·SULTR3;1基因缺失突变体和功能互补突变体35S-SULTR3;1的构建 | 第44-48页 |
| ·分别用于亚细胞定位和启动子分析的SULTR3;1-GFP融合蛋白表达载体和pSULTR3;1-GUS报告基因载体的构建 | 第48-50页 |
| ·叶肉细胞原生质体的制备和GFP荧光成像 | 第50页 |
| ·完整的叶绿体的提取 | 第50-51页 |
| ·分离类囊体(thylakoid)和叶绿体双层外膜(envelope membrane) | 第51页 |
| ·SDS-PAGE电泳和western blot | 第51-52页 |
| ·总蛋白和膜蛋白提取 | 第51-52页 |
| ·SDS-PAGE电泳及电转法转膜 | 第52页 |
| ·叶绿体的硫酸盐吸收实验 | 第52-53页 |
| ·Northern blot | 第53-56页 |
| ·ABA含量测定 | 第56-57页 |
| ·GUS染色实验 | 第57页 |
| ·醛氧化酶活测定 | 第57-58页 |
| ·硫醇的提取 | 第58页 |
| ·高效液相色谱法(HPLC)定量硫醇、苯甲醛和苯甲酸 | 第58-59页 |
| ·生理实验观察种子萌发和根系生长对于ABA的响应 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 第二部分低硫诱导的miR395是一种避免ATP硫酸化酶在低硫环境下的过度聚集的保护机制 | 第66-103页 |
| 摘要 | 第67-68页 |
| Abstract | 第68-71页 |
| 第1章 绪论 | 第71-78页 |
| ·拟南芥的硫同化过程及其关键酶 | 第71-75页 |
| ·硫酸盐的活化 | 第71-72页 |
| ·拟南芥中ATP硫酸化酶基因家族 | 第72页 |
| ·硫酸盐的还原 | 第72-73页 |
| ·拟南芥中的APS还原酶基因家族和SIR基因 | 第73页 |
| ·半胱氨酸的合成 | 第73-74页 |
| ·半胱氨酸合成酶(丝氨酸乙酰基转移酶/氧-乙酰丝氨酸巯基转移酶复合体) | 第74-75页 |
| ·MiR395对植物硫同化过程的调节 | 第75-78页 |
| 第2章 实验结果 | 第78-89页 |
| ·MIR395a和MU395a过表达转化株的构建 | 第78-81页 |
| ·MiR395的过表达导致靶基因转录水平下调 | 第81-83页 |
| ·MiR395的表达模式受外源硫营养环境的影响 | 第83-85页 |
| ·MiR395的过表达导致低硫环境中植物体内ATP硫酸化酶活性降低,并进一步降低了半胱氨酸和谷胱甘肽的含量 | 第85-89页 |
| 第3章 讨论 | 第89-93页 |
| ·MiR395介导3个ATP硫酸化酶基因的转录后调控 | 第89页 |
| ·MiR395过表达影响植物体内的ATP硫酸化酶基因的酶活,并进一步影响植物体内硫醇的含量 | 第89-90页 |
| ·MiR395调节拟南芥硫同化过程的假想模型 | 第90-93页 |
| 第4章 实验材料和方法 | 第93-99页 |
| ·植物材料和生长环境 | 第93页 |
| ·MIR395a/MU395a过表达载体和启动子分析用载体的构建 | 第93-94页 |
| ·MIR395a/MU395a过表达转化株和pMIR395a-GUS启动子分析转化株的鉴定 | 第94-95页 |
| ·用于检测microRNA的PAGE Northern blot | 第95-96页 |
| ·ATP硫酸化酶活性测定 | 第96-97页 |
| ·高效液相色谱法(HPLC)定量硫醇 | 第97-99页 |
| 参考文献 | 第99-103页 |
| 致谢 | 第103-104页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的研究成果 | 第104页 |
