| 中文摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-18页 |
| 第一章 文献综述 | 第18-36页 |
| 1 叉状头转录因子 O 亚族（FOXO） | 第18-28页 |
| ·FOXO 的结构与表达特征 | 第18-19页 |
| ·FOXO 转录活性的调节 | 第19-21页 |
| ·FOXO 的生物学功能 | 第21-28页 |
| 2 昆虫变态发育时期的程序性细胞死亡（PCD） | 第28-36页 |
| ·细胞凋亡与自噬的特征 | 第28-30页 |
| ·蜕皮激素与 PCD | 第30-32页 |
| ·饥饿与 PCD | 第32页 |
| ·变态期细胞凋亡和自噬之间的联系 | 第32-34页 |
| ·家蚕是研究自噬与凋亡的优良材料 | 第34-36页 |
| 第二章 研究目的与内容 | 第36-38页 |
| 1 目的与意义 | 第36页 |
| 2 研究内容 | 第36-37页 |
| ·Foxo 基因全长克隆 | 第36页 |
| ·Foxo 基因表达谱分析 | 第36-37页 |
| ·蜕皮激素对 Foxo 基因表达的影响 | 第37页 |
| ·饥饿对 Foxo 基因表达的影响 | 第37页 |
| ·Foxo 基因干涉处理 | 第37页 |
| 3 研究路线 | 第37-38页 |
| 第三章 主要试剂与常用实验方法 | 第38-57页 |
| 1 常用材料与试剂 | 第38-42页 |
| ·蚕品种与细胞系 | 第38页 |
| ·菌株 | 第38页 |
| ·主要生化试剂 | 第38-39页 |
| ·主要试剂盒 | 第39页 |
| ·Marker | 第39页 |
| ·培养基 | 第39-40页 |
| ·缓冲液和常用试剂的配制 | 第40-42页 |
| 2 主要仪器设备 | 第42-43页 |
| 3 常用实验方法 | 第43-57页 |
| ·总 RNA 的抽提 | 第43页 |
| ·基因组 DNA 消化 | 第43-44页 |
| ·RNA 反转录 | 第44页 |
| ·PCR 扩增反应程序及加样体系 | 第44页 |
| ·DNA 琼脂糖凝胶电泳 | 第44-45页 |
| ·PCR 产物的回收 | 第45页 |
| ·3′-RACE 反应 | 第45-47页 |
| ·5′-RACE 反应 | 第47-50页 |
| ·连接反应 | 第50-51页 |
| ·CaCl2法制备 E. coli 感受态细胞 | 第51页 |
| ·重组 DNA 的转化 | 第51-52页 |
| ·重组质粒的筛选 | 第52页 |
| ·碱裂解法少量制备质粒 DNA | 第52页 |
| ·限制性内切酶反应 | 第52页 |
| ·实时定量 PCR（Real time PCR | 第52页 |
| ·细胞传代培养的基本操作 | 第52-54页 |
| ·Western-Blot 操作流程 | 第54-57页 |
| 第四章 家蚕 Foxo 基因的克隆鉴定和序列分析 | 第57-69页 |
| 1 材料与方法 | 第57-59页 |
| ·实验动物和材料 | 第57页 |
| ·引物设计 | 第57页 |
| ·家蚕脂肪体总 RNA 的提取及反转录合成 cDNA | 第57页 |
| ·片段克隆拼接验证 | 第57-58页 |
| ·RACE 反应 | 第58页 |
| ·测序结果拼接及长片段克隆验证 | 第58-59页 |
| ·序列分析 | 第59页 |
| 2 结果与分析 | 第59-67页 |
| ·拼接片段 PCR 结果 | 第59-60页 |
| ·RACE PCR 结果 | 第60页 |
| ·长片段验证结果 | 第60-61页 |
| ·家蚕 Foxo 基因的序列分析 | 第61页 |
| ·家蚕 FOXO 蛋白序列分析 | 第61-67页 |
| 3 结论与讨论 | 第67-69页 |
| 第五章 家蚕 Foxo 基因及 FOXO 蛋白的表达分析 | 第69-76页 |
| 1 材料与方法 | 第69-71页 |
| ·实验动物 | 第69页 |
| ·引物设计 | 第69-70页 |
| ·不同发育期蚕体和组织总 RNA 的提取 | 第70页 |
| ·电子表达谱查询 | 第70页 |
| ·家蚕 Foxo 基因的组织表达分析 | 第70页 |
| ·家蚕 Foxo 基因的发育时期表达分析 | 第70-71页 |
| ·家蚕 Foxo 基因及 FOXO 蛋白在丝腺中的表达分析 | 第71页 |
| 2 结果与分析 | 第71-74页 |
| ·芯片表达谱 | 第71页 |
| ·组织表达谱 | 第71-72页 |
| ·发育时期表达谱 | 第72页 |
| ·家蚕 Foxo 基因及 FOXO 蛋白在丝腺中的表达分析 | 第72-74页 |
| 3 讨论 | 第74-76页 |
| ·家蚕 Foxo 基因表达谱特征 | 第74-75页 |
| ·家蚕 Foxo 基因与 FOXO 蛋白的高表达可能与丝腺退化消亡有关 | 第75-76页 |
| 第六章 蜕皮激素对家蚕 Foxo 基因表达的影响 | 第76-88页 |
| 1 材料与方法 | 第77-80页 |
| ·材料与试剂 | 第77页 |
| ·蜕皮激素处理方法 | 第77-78页 |
| ·引物设计 | 第78-79页 |
| ·细胞死亡率统计 | 第79页 |
| ·细胞染色观察 | 第79页 |
| ·蚕体丝腺和 BmN 细胞的总 RNA 提取 | 第79页 |
| ·正常发育及 20E 处理后的 Foxo 基因及相关基因的表达谱调查 | 第79页 |
| ·FOXO 蛋白表达调查 | 第79-80页 |
| 2 结果与分析 | 第80-85页 |
| ·正常发育家蚕的 Foxo 基因及相关基因的表达谱 | 第80-81页 |
| ·蜕皮激素对家蚕丝腺中 Foxo 基因及相关基因的影响 | 第81-83页 |
| ·蜕皮激素对 BmN 细胞的影响 | 第83-85页 |
| 3 讨论 | 第85-88页 |
| ·家蚕丝腺中蜕皮激素含量的变化情况与血淋巴中一致 | 第85-86页 |
| ·蜕皮激素能诱导 Foxo 基因上调表达 | 第86页 |
| ·FOXO 可能参与了蜕皮激素诱导的 PCD 过程 | 第86-88页 |
| 第七章 限食与饥饿对 Foxo 基因表达的影响 | 第88-97页 |
| 1 材料与方法 | 第88-90页 |
| ·材料与试剂 | 第88页 |
| ·家蚕限食模型的建立 | 第88-89页 |
| ·饥饿处理方法 | 第89页 |
| ·细胞死亡率统计 | 第89页 |
| ·细胞染色观察 | 第89页 |
| ·引物设计 | 第89页 |
| ·蚕体丝腺和 BmN 细胞的总 RNA 提取 | 第89-90页 |
| ·限食和饥饿处理后 Foxo 基因及相关基因的表达谱调查 | 第90页 |
| 2 结果与分析 | 第90-94页 |
| ·限食与饥饿对家蚕丝腺中 Foxo 基因及相关基因的影响 | 第90-91页 |
| ·饥饿对 BmN 细胞的影响 | 第91-94页 |
| 3 讨论 | 第94-97页 |
| ·饥饿与限食都能增强丝腺胰岛素信号的敏感性 | 第94-95页 |
| ·饥饿与限食对胰岛素信号敏感性的影响程度不同 | 第95页 |
| ·FOXO 可能参与了饥饿诱导的 PCD 过程 | 第95页 |
| ·家蚕细胞死亡早期可能通过细胞自噬来抑制细胞凋亡 | 第95-97页 |
| 第八章 Foxo 基因干涉的影响 | 第97-103页 |
| 1 材料与方法 | 第97-99页 |
| ·材料与试剂 | 第97页 |
| ·干涉处理方法 | 第97-98页 |
| ·干涉处理后基因的表达谱调查 | 第98页 |
| ·家蚕丝腺细胞核染色 | 第98页 |
| ·家蚕丝腺组织发生细胞凋亡的 DNA 电泳检测 | 第98-99页 |
| ·干涉处理后家蚕生长发育状况观察 | 第99页 |
| 2 结果与分析 | 第99-102页 |
| ·干涉效果调查 | 第99页 |
| ·Foxo 干涉后对丝腺 PCD 的影响 | 第99-100页 |
| ·Foxo 基因干涉后家蚕生长发育情况分析 | 第100-102页 |
| 3 讨论 | 第102-103页 |
| 第九章 综合结论 | 第103-107页 |
| 1 主要结论 | 第103-106页 |
| ·克隆鉴定了家蚕 Foxo 基因 | 第103页 |
| ·调查和分析了家蚕 Foxo 基因的表达谱 | 第103页 |
| ·家蚕 FOXO 参与了幼虫到蛹变态期丝腺 PCD 过程 | 第103-105页 |
| ·家蚕 FOXO 参与幼虫到蛹变态期丝腺 PCD 过程的可能机制 | 第105-106页 |
| 2 进一步研究方向 | 第106-107页 |
| 参考文献 | 第107-121页 |
| 研究生期间发表的文章及成果 | 第121-122页 |
| 研究生期间科研资助项目 | 第122-123页 |
| 附录 | 第123-126页 |
| 致谢 | 第126-128页 |
