| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-13页 |
| 1 绪论 | 第13-23页 |
| ·问题的提出及研究意义 | 第13-15页 |
| ·国内外研究现状 | 第15-21页 |
| ·RA 的发病机理 | 第15-16页 |
| ·FLSs 的功能及在 RA 发病过程中的作用 | 第16-18页 |
| ·力学刺激对 FLSs 生物学行为的作用 | 第18-19页 |
| ·PGE2与 COX-2 | 第19-21页 |
| ·本课题的研究目的及内容 | 第21-23页 |
| ·研究目的 | 第21页 |
| ·研究内容 | 第21-22页 |
| ·创新点 | 第22-23页 |
| 2 人 FLSs 的体外原代培养及力学刺激对细胞形态和骨架的影响 | 第23-35页 |
| ·引言 | 第23-25页 |
| ·实验材料 | 第25-27页 |
| ·实验细胞 | 第25页 |
| ·主要仪器设备及耗材 | 第25-26页 |
| ·主要试剂及配制方法 | 第26-27页 |
| ·实验方法 | 第27-30页 |
| ·FLSs 的体外分离与原代培养 | 第27-28页 |
| ·RA FLSs 体外周期性力学加载 | 第28-29页 |
| ·RA FLSs 细胞骨架染色 | 第29-30页 |
| ·实验结果 | 第30-32页 |
| ·RA 和正常 FLSs 的体外原代培养 | 第30-31页 |
| ·RA 和正常 FLSs 加载后的形态学观察 | 第31页 |
| ·RA FLSs 加载后细胞骨架观察 | 第31-32页 |
| ·分析讨论 | 第32-34页 |
| ·本章小结 | 第34-35页 |
| 3 周期性力刺激对 RA FLSs 中 PGE_2 释放和 COX-2 表达的影响 | 第35-53页 |
| ·前言 | 第35-36页 |
| ·实验材料 | 第36-37页 |
| ·主要仪器设备及耗材 | 第36页 |
| ·主要试剂及配制方法 | 第36-37页 |
| ·实验方法 | 第37-43页 |
| ·RA FLSs 体外周期性力学加载 | 第37页 |
| ·RNA 提取、定量和反转录 | 第37-39页 |
| ·Real-time PCR 检测 COX-2,MMP-1 及 IκB-α/-β的基因表达 | 第39-40页 |
| ·Western blot 检测 COX-2 及 IκB-α/-β的蛋白表达 | 第40-42页 |
| ·酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测 PGE_2的表达 | 第42-43页 |
| ·统计学分析 | 第43页 |
| ·实验结果 | 第43-49页 |
| ·周期性力学刺激（6%）下调 IL-1β诱导的 MMP-1 基因表达 | 第43-44页 |
| ·周期性力学刺激（6%）下调 IL-1β诱导的 COX-2 表达 | 第44-46页 |
| ·周期性力学刺激（6%）下调 IL-1β诱导的 PGE_2表达 | 第46页 |
| ·周期性力学刺激（6%）下调 IL-1β诱导的 IκB-α/-β基因表达 | 第46-48页 |
| ·周期性力学刺激（6%）抑制细胞质中 IL-1β诱导的 IκB-α/-β蛋白降解 | 第48-49页 |
| ·分析讨论 | 第49-50页 |
| ·本章小结 | 第50-53页 |
| 4 周期性力刺激对 RA FLSs 增殖的影响 | 第53-65页 |
| ·引言 | 第53页 |
| ·实验材料 | 第53-54页 |
| ·主要仪器设备及耗材 | 第53-54页 |
| ·主要试剂及配制方法 | 第54页 |
| ·实验方法 | 第54-58页 |
| ·RA FLSs 体外周期性力学加载 | 第54-55页 |
| ·MTS 检测细胞增殖活力 | 第55页 |
| ·流式细胞术检测 RA FLSs 细胞周期 | 第55-56页 |
| ·RT-PCR 检测 RA FLSs 中细胞周期调节基因的表达 | 第56-58页 |
| ·统计学分析 | 第58页 |
| ·实验结果 | 第58-61页 |
| ·6%周期性力学刺激抑制 RA FLSs 细胞增殖活力 | 第58页 |
| ·6%周期性力学刺激抑制 RA FLSs 细胞周期转化 | 第58-60页 |
| ·细胞周期调节基因表达情况 | 第60-61页 |
| ·分析讨论 | 第61-63页 |
| ·本章小结 | 第63-65页 |
| 5 RA 和正常 FLSs 响应周期性力刺激的对比研究 | 第65-81页 |
| ·引言 | 第65页 |
| ·实验材料 | 第65-66页 |
| ·主要仪器设备及耗材 | 第65-66页 |
| ·主要试剂 | 第66页 |
| ·实验方法 | 第66-69页 |
| ·RA 及正常 FLSs 体外周期性力学加载 | 第66-67页 |
| ·RA 与正常 FLSs 中 COX-2 mRNA 表达水平的比较 | 第67页 |
| ·RA 与正常 FLSs 中 COX-2 蛋白水平的比较 | 第67页 |
| ·RA 与正常 FLSs 中 PGE_2分泌水平的比较 | 第67页 |
| ·MTS 检测不同浓度 PGE_2作用下 RA 与正常 FLSs 的增殖 | 第67-68页 |
| ·流式细胞术检测 RA 与正常 FLSs 细胞周期及凋亡 | 第68-69页 |
| ·统计学分析 | 第69页 |
| ·实验结果 | 第69-78页 |
| ·IL-1β刺激下 RA FLSs 与正常 FLSs 中 COX-2 表达的力学响应比较 | 第69-71页 |
| ·IL-1β刺激下 RA FLSs 与正常 FLSs 中 PGE_2释放的力学响应比较 | 第71页 |
| ·RA FLSs 与正常 FLSs 细胞增殖的力学响应比较 | 第71-74页 |
| ·高浓度 PGE_2促进 RA FLSs 增殖，而不促进正常 FLSs 增殖 | 第74-75页 |
| ·周期性力刺激不能抑制 PGE_2诱导的 RA FLSs 增殖 | 第75-78页 |
| ·分析讨论 | 第78-80页 |
| ·本章小结 | 第80-81页 |
| 6 选择性 COX-2 抑制剂 celecoxib 作用下周期性力刺激对 RA FLSs 增殖的影响 | 第81-93页 |
| ·引言 | 第81页 |
| ·实验材料 | 第81-83页 |
| ·主要仪器设备及耗材 | 第81-82页 |
| ·主要试剂及配制方法 | 第82-83页 |
| ·实验方法 | 第83-84页 |
| ·不同浓度的选择性 COX-2 抑制剂作用下 RA FLSs 活力检测 | 第83页 |
| ·Western Blot | 第83页 |
| ·酶联免疫吸附测定（ELISA） | 第83页 |
| ·RA FLSs 体外周期力学加载 | 第83-84页 |
| ·流式细胞术 | 第84页 |
| ·统计学分析 | 第84页 |
| ·实验结果 | 第84-89页 |
| ·选择性 COX-2 抑制剂处理后 RA FLSs 细胞活力观察 | 第84-86页 |
| ·Celecoxib 处理后 RA FLSs 中 COX-2 蛋白表达及 PGE_2分泌 | 第86-87页 |
| ·Celecoxib 作用下周期性力学刺激对 RA FLSs 细胞活力的影响 | 第87页 |
| ·Celecoxib 作用下周期性力学刺激对 RA FLSs 细胞周期的影响 | 第87-89页 |
| ·分析讨论 | 第89-91页 |
| ·本章小结 | 第91-93页 |
| 7 结论与展望 | 第93-97页 |
| ·主要结论 | 第93-94页 |
| ·后续工作展望 | 第94-97页 |
| ·RA FLSs 中力学传导机制的研究 | 第94页 |
| ·周期性力学刺激对 RA FLSs 细胞周期的调控机制研究 | 第94页 |
| ·RA FLSs 在体内受力环境的深入考察 | 第94-97页 |
| 致谢 | 第97-99页 |
| 参考文献 | 第99-113页 |
| 附录 | 第113页 |
| A. 攻读博士期间发表的论文 | 第113页 |
| B. 作者在攻读博士学位期间参加的科研项目情况 | 第113页 |
