| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 英文缩略词表 | 第9-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-12页 |
| 第二章 材料和方法 | 第12-22页 |
| ·材料 | 第12-14页 |
| ·实验材料 | 第12页 |
| ·试剂 | 第12-14页 |
| ·主要仪器设备 | 第14-15页 |
| ·方法 | 第15-21页 |
| ·技术路线 | 第15页 |
| ·病毒RNA的提取 | 第15-16页 |
| ·RNA浓度与纯度测定-分光光度法 | 第16页 |
| ·RNA完整性鉴定 | 第16页 |
| ·第一链cDNA合成 | 第16-17页 |
| ·PCR扩增的引物 | 第17-18页 |
| ·单重与多重普通PCR | 第18页 |
| ·nH1N1扩增片段的A-T克隆 | 第18-19页 |
| ·SYBR Green荧光定量PCR反应体系与反应条件的优化 | 第19-20页 |
| ·标准品的制备与标准曲线的建立以及重复性评价 | 第20页 |
| ·SYBR Green Ⅰ real-time PCR方法的特异性 | 第20页 |
| ·临床标本的检测 | 第20-21页 |
| ·结果分析 | 第21-22页 |
| 第三章 结果 | 第22-28页 |
| ·RNA完整性鉴定结果 | 第22页 |
| ·普通PCR体系的建立与检测结果 | 第22-23页 |
| ·荧光定量PCR的检测结果 | 第23-27页 |
| ·反应条件与反应体系的优化 | 第24页 |
| ·标准曲线的建立 | 第24-26页 |
| ·重复性评价 | 第26页 |
| ·特异性检验 | 第26-27页 |
| ·临床标本检测结果 | 第27-28页 |
| 第四章 讨论 | 第28-34页 |
| ·流感病毒样品的处理 | 第29页 |
| ·阳性对照和阴性对照的作用 | 第29-30页 |
| ·SYBR Green Ⅰ Real-time quantitative PCR体系与条件的优化 | 第30-31页 |
| ·多重PCR检测条件的优化 | 第31-32页 |
| ·前景与挑战 | 第32-34页 |
| 第五章 结论 | 第34-35页 |
| 参考文献 | 第35-40页 |
| 综述 | 第40-50页 |
| 一、常用的检测流感病毒的方法 | 第41-42页 |
| 二、Real-time quantitative PCR技术的介绍 | 第42-43页 |
| 三、Real-time quantitative PCR的特点 | 第43-44页 |
| 四、Real-time quantitative PCR在流感病毒检测中的研究及应用 | 第44-46页 |
| 五、讨论与展望 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 攻读学位期间主要的研究成果 | 第51页 |
