| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 英文缩略词表 | 第10-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-14页 |
| 第二章 材料与方法 | 第14-27页 |
| ·试剂与仪器 | 第14-17页 |
| ·主要试剂 | 第14-15页 |
| ·主要仪器 | 第15页 |
| ·主要工作液的配制 | 第15-17页 |
| ·实验分组及MPO干预浓度、干预时间的确定 | 第17页 |
| ·实验分组 | 第17页 |
| ·MPO干预浓度的确定 | 第17页 |
| ·MPO干预时间的确定 | 第17页 |
| ·HUVEC-12细胞株及其生物学特征 | 第17-18页 |
| ·人脐静脉血内皮细胞的培养 | 第18页 |
| ·倒置显微镜观察各组细胞形态 | 第18页 |
| ·MTT法检测细胞增殖凋亡情况 | 第18-19页 |
| ·流式细胞术检测细胞凋亡情况 | 第19页 |
| ·细胞中总RNA提取(Trizol法) | 第19-20页 |
| ·总RNA纯度鉴定及定量 | 第20页 |
| ·RNA完整性鉴定 | 第20页 |
| ·RNA逆转录成cDNA | 第20-21页 |
| ·逆转录PCR及Real-time PCR检测caspase-3、bax基因的表达 | 第21-23页 |
| ·引物设计与合成 | 第21-22页 |
| ·PCR反应体系 | 第22页 |
| ·PCR反应条件 | 第22页 |
| ·PCR操作步骤 | 第22页 |
| ·逆转录PCR琼脂糖凝胶电泳检测cDNA | 第22-23页 |
| ·逆转录PCR及Real-time PCR结果分析 | 第23页 |
| ·细胞中总蛋白的提取及浓度测定 | 第23-24页 |
| ·提取总蛋白 | 第23页 |
| ·测定蛋白浓度 | 第23-24页 |
| ·Western-blot检测细胞中caspase-3及bax蛋白的表达 | 第24-26页 |
| ·蛋白电泳凝胶的制备 | 第24页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第24-25页 |
| ·转膜 | 第25页 |
| ·封闭 | 第25页 |
| ·孵育一抗 | 第25-26页 |
| ·洗脱 | 第26页 |
| ·孵育二抗 | 第26页 |
| ·洗脱 | 第26页 |
| ·显色 | 第26页 |
| ·扫描分析 | 第26页 |
| ·统计分析 | 第26-27页 |
| 第三章 结果 | 第27-45页 |
| ·倒置显微镜下观察HUVEC-12细胞形态 | 第27-28页 |
| ·MTT法检测不同浓度MPO对细胞增殖影响 | 第28-30页 |
| ·Annexin-V-FITC/PI双染法检测不同浓度MPO对细胞凋亡影响 | 第30-33页 |
| ·MPO对内皮细胞caspase-3 mRNA及蛋白表达的影响 | 第33-39页 |
| ·细胞总RNA完整性鉴定 | 第33页 |
| ·RT-PCR检测内皮细胞caspase-3 mRNA的表达 | 第33-35页 |
| ·Real-time PCR检测内皮细胞caspase-3 mRNA的表达 | 第35-37页 |
| ·Western-blot法检测内皮细胞caspase-3蛋白的表达 | 第37-39页 |
| ·MPO对内皮细胞bax mRNA及蛋白表达的影响 | 第39-45页 |
| ·细胞总RNA完整性鉴定 | 第39-40页 |
| ·RT-PCR检测内皮细胞bax mRNA的表达 | 第40-41页 |
| ·Real-time PCR检测内皮细胞bax mRNA的表达 | 第41-43页 |
| ·Western-blot法检测内皮细胞bax蛋白的表达 | 第43-45页 |
| 第四章 讨论 | 第45-48页 |
| 第五章 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-52页 |
| 综述 | 第52-61页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 攻读学位期间主要的研究成果 | 第62页 |
