GeXP多重RT-PCR技术在病毒性脑炎病原检测中的应用
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 插图或附表清单 | 第11-12页 |
| 注释说明清单 | 第12-14页 |
| 引言 | 第14-17页 |
| 1 研究背景 | 第17-21页 |
| ·GeXP系统的原理及应用 | 第17-19页 |
| ·病毒性脑炎研究进展 | 第19-21页 |
| 2 病毒性脑炎GeXP多重检测体系的建立 | 第21-43页 |
| ·试验材料 | 第21-22页 |
| ·病毒来源 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·主要仪器耗材 | 第21-22页 |
| ·缓冲液及细菌培养基配置 | 第22页 |
| ·核酸电泳缓冲液 | 第22页 |
| ·细菌培养基(LB培养基) | 第22页 |
| ·试验方法 | 第22-33页 |
| ·引物设计 | 第22-23页 |
| ·病毒样品处理 | 第23-24页 |
| ·病毒核酸提取前准备 | 第23页 |
| ·核酸提取 | 第23-24页 |
| ·单引物特异性验证 | 第24-25页 |
| ·构建单克隆质粒 | 第25-27页 |
| ·PCR产物纯化 | 第25页 |
| ·连接 | 第25-26页 |
| ·转化 | 第26-27页 |
| ·质粒的提取及线性化 | 第27-29页 |
| ·质粒提取 | 第27-28页 |
| ·提取质粒线性化 | 第28-29页 |
| ·参考品的制备 | 第29-31页 |
| ·体外转录RNA的制备 | 第29页 |
| ·体外转录后去DNA模板 | 第29-30页 |
| ·体外转录后去盐类及核苷酸 | 第30-31页 |
| ·多重检测体系的建立 | 第31-32页 |
| ·多重体系特异性验证 | 第31-32页 |
| ·多重体系多引物单模板灵敏度分析 | 第32页 |
| ·多重体系多引物多模板灵敏度分析 | 第32页 |
| ·GeXP多重体系验证 | 第32-33页 |
| ·试验结果 | 第33-43页 |
| ·引物设计 | 第33页 |
| ·单引物特异性验证 | 第33-34页 |
| ·质粒的提取及线性化 | 第34-36页 |
| ·多重体系特异性验证 | 第36-37页 |
| ·多重体系多引物单模板灵敏度结果 | 第37-40页 |
| ·多重体系多引物单模板灵敏度结果 | 第40-41页 |
| ·多重体系验证结果 | 第41-43页 |
| 3 实验讨论 | 第43-45页 |
| 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 附录A | 第50-61页 |
| 后记或致谢 | 第61-62页 |
| 作者简介及读研期间主要科研成果 | 第62页 |
