| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 引言 | 第12-14页 |
| 1 文献综述 | 第14-32页 |
| ·转基因植物的安全性问题 | 第14-21页 |
| ·转基因植物的安全性争议 | 第14-15页 |
| ·影响转基因植物安全性的因素 | 第15-16页 |
| ·解决转基因植物安全性的策略 | 第16-21页 |
| ·大豆的转基因研究 | 第21-24页 |
| ·农杆菌介导法 | 第21-22页 |
| ·基因枪法 | 第22-23页 |
| ·显微注射法 | 第23页 |
| ·花粉管通道法 | 第23-24页 |
| ·植物耐盐基因工程研究进展 | 第24-26页 |
| ·耐盐相关基因的研究 | 第24-25页 |
| ·植物耐盐基因工程策略探讨 | 第25-26页 |
| ·大豆耐盐性及耐盐机理的研究 | 第26-29页 |
| ·大豆耐盐性 | 第26-27页 |
| ·大豆耐盐机理 | 第27-29页 |
| ·Na~+/H~+逆向转运蛋白基因的研究 | 第29-30页 |
| ·Na~+/H~+逆向转运蛋白基因的性质及作用机理 | 第29-30页 |
| ·转Na~+/H~+逆向转运蛋白基因植株及其耐盐性 | 第30页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第30-32页 |
| 2 大豆子房滴注转化方法的优化 | 第32-57页 |
| ·材料与方法 | 第32-43页 |
| ·实验材料 | 第32-33页 |
| ·试剂 | 第33-34页 |
| ·实验仪器 | 第34页 |
| ·苯胺蓝染色观察花粉管 | 第34页 |
| ·pUC118-smGFP质粒DNA的制备 | 第34-35页 |
| ·引物的设计与合成 | 第35页 |
| ·FITC荧光标记示踪外源DNA | 第35-36页 |
| ·smGFP基因元件的制备及检测引物位点 | 第36-37页 |
| ·smGFP基因元件导入大豆 | 第37-38页 |
| ·大豆总DNA的提取 | 第38页 |
| ·PCR检测 | 第38-39页 |
| ·转化植株的Southern杂交检测 | 第39-42页 |
| ·转化植株的RT-PCR检测 | 第42-43页 |
| ·smGFP在转化植株幼胚中的表达 | 第43页 |
| ·T_1代转基因植株遗传分析 | 第43页 |
| ·结果与分析 | 第43-54页 |
| ·苯胺蓝染色观察花粉管 | 第43-44页 |
| ·FITC荧光示踪外源DNA初步优化子房滴注法 | 第44-49页 |
| ·smGFP基因元件的制备 | 第49页 |
| ·T_0代转化植株的PCR检测 | 第49-51页 |
| ·T_0代转化植株的Southern杂交检测 | 第51-52页 |
| ·T_0代转化植株的RT-PCR检测 | 第52页 |
| ·T_0代转化植株幼胚的的荧光表达 | 第52-53页 |
| ·T_1代转基因植株的PCR检测 | 第53-54页 |
| ·讨论 | 第54-56页 |
| ·小结 | 第56-57页 |
| 3 GUS基因元件导入大豆的研究 | 第57-67页 |
| ·材料和方法 | 第57-61页 |
| ·实验材料 | 第57页 |
| ·试剂 | 第57页 |
| ·实验仪器 | 第57页 |
| ·引物的设计与合成 | 第57页 |
| ·pUC118-GUS质粒DNA的提取 | 第57页 |
| ·GUS基因元件的制备及检测引物位点 | 第57-58页 |
| ·子房滴注法转化大豆 | 第58-59页 |
| ·GUS组织化学染色 | 第59页 |
| ·大豆叶片总DNA提取 | 第59页 |
| ·PCR检测 | 第59页 |
| ·T_0代转化植株的狭缝点杂交检测 | 第59-60页 |
| ·T_0代转化植株的Southem杂交检测 | 第60页 |
| ·T_0代转化植株的RT-PCR检测 | 第60页 |
| ·T_1代转基因植株的Northern杂交检测 | 第60-61页 |
| ·T_1代转基因植株的遗传分析 | 第61页 |
| ·结果与分析 | 第61-65页 |
| ·GUS基因元件的制备 | 第61页 |
| ·T_0代转化植株GUS组织化学染色与PCR检测 | 第61-63页 |
| ·T_0代转化植株的狭缝点杂交检测 | 第63页 |
| ·T_0代转化植株的Southern杂交检测 | 第63-64页 |
| ·T_0代转化植株的RT-PCR检测 | 第64页 |
| ·T_1代转基因植株的GUS组织化学染色与分子检测 | 第64-65页 |
| ·讨论 | 第65-66页 |
| ·小结 | 第66-67页 |
| 4 Na~+/H~+逆向转运蛋白基因元件导入大豆的研究 | 第67-87页 |
| ·材料与方法 | 第67-73页 |
| ·实验材料 | 第67页 |
| ·试剂 | 第67-68页 |
| ·实验仪器 | 第68页 |
| ·A1HNX1基因元件的制备及检测引物位点 | 第68页 |
| ·子房滴注法转化大豆 | 第68-69页 |
| ·大豆叶片总DNA提取 | 第69页 |
| ·PCR检测 | 第69页 |
| ·T_0代转化植株的狭缝点杂交检测 | 第69页 |
| ·Southern杂交检测 | 第69页 |
| ·大豆叶片总RNA的提取 | 第69页 |
| ·T_0代转化植株的RT-PCR检测 | 第69页 |
| ·T_0代转化植株的Northern杂交检测 | 第69页 |
| ·T_1代转基因植株的遗传分析 | 第69页 |
| ·T_1代转基因大豆的盆栽耐盐实验 | 第69页 |
| ·T_1代转基因大豆生理生化指标的测定 | 第69-73页 |
| ·结果与分析 | 第73-84页 |
| ·A1NHX1基因元件的制备 | 第73页 |
| ·T_0代转化植株的PCR检测 | 第73-74页 |
| ·T_0代转化植株的狭缝点杂交检测 | 第74页 |
| ·T_0代转化植株的Southern杂交检测 | 第74-75页 |
| ·T_0代转化植株的RT-PCR检测 | 第75-76页 |
| ·T_0代转化植株的Northern杂交检测 | 第76页 |
| ·T_1代转基因植株PCR检测 | 第76-77页 |
| ·T_1代转基因植株Southern杂交检测 | 第77页 |
| ·T_1代转基因大豆幼苗的耐盐性 | 第77-79页 |
| ·Na~+、K~+离子含量的测定 | 第79-80页 |
| ·叶片渗透势与相对含水量 | 第80-81页 |
| ·叶片相对电导率与丙二醛含量的测定 | 第81-82页 |
| ·POD/SOD活性的测定 | 第82-83页 |
| ·净光合速率与叶绿素含量的测定 | 第83-84页 |
| ·讨论 | 第84-86页 |
| ·小结 | 第86-87页 |
| 5 结论与展望 | 第87-90页 |
| 结论 | 第87-88页 |
| 创新点摘要 | 第88页 |
| 有待进一步开展的工作 | 第88页 |
| 展望 | 第88-90页 |
| 参考文献 | 第90-100页 |
| 附录A MS培养基配方 | 第100-101页 |
| 附录B 缩略语 | 第101-103页 |
| 附录C 论文中所用的DNA Marker | 第103-104页 |
| 攻读博士学位期间发表学术论文情况 | 第104-105页 |
| 致谢 | 第105-106页 |
| 作者简介 | 第106-107页 |
