| 摘要 | 第1-15页 |
| Abstract | 第15-18页 |
| 第一章 文献综述 | 第18-43页 |
| ·蓖麻的综合利用价值及生产存在的问题 | 第19-21页 |
| ·蓖麻矮化育种研究现状 | 第21-42页 |
| ·矮化育种技术 | 第21-23页 |
| ·蓖麻矮化资源的鉴定和创造 | 第23-25页 |
| ·RNAi 技术及在蓖麻育种领域中的应用 | 第25-33页 |
| ·细胞色素 P450 基因的功能研究进展 | 第33-35页 |
| ·蓖麻组织培养研究进展 | 第35-40页 |
| ·蓖麻转基因育种研究 | 第40-42页 |
| ·本研究的目的和设想 | 第42-43页 |
| 第二章 蓖麻细胞色素 P450 基因片段的克隆 | 第43-62页 |
| ·材料与方法 | 第43-54页 |
| ·材料 | 第43-44页 |
| ·方法 | 第44-54页 |
| ·结果与分析 | 第54-59页 |
| ·人工合成 DNA 为反应模板的 PCR 产物电泳检测 | 第54-55页 |
| ·总 RNA 的提取结果 | 第55页 |
| ·RT-PCR 结果 | 第55-56页 |
| ·重组克隆载体的 PCR 和酶切鉴定 | 第56-57页 |
| ·重组克隆载体的序列测定 | 第57-59页 |
| ·讨论 | 第59-61页 |
| ·目的基因的确定 | 第59-60页 |
| ·目的基因片段获取方法的选择 | 第60-61页 |
| ·本章小结 | 第61-62页 |
| 第三章 蓖麻细胞色素 P450 基因 RNAi 表达载体的构建 | 第62-81页 |
| ·材料与方法 | 第62-71页 |
| ·材料 | 第62-64页 |
| ·方法 | 第64-71页 |
| ·结果与分析 | 第71-79页 |
| ·pHANNIBAL 载体质粒提取 | 第71-72页 |
| ·pHAN-P450s 质粒的 PCR 和酶切鉴定 | 第72-73页 |
| ·pHAN-P450s-P450a 质粒的 PCR 和双酶切检测 | 第73-74页 |
| ·pHAN-P450s-P450a 质粒双酶切后胶回收前后电泳结果 | 第74-75页 |
| ·pBI 121 质粒提取电泳检测 | 第75页 |
| ·pBI 121 质粒双酶切后胶回收前后电泳结果 | 第75-76页 |
| ·pBI-P450-RNAi 质粒提取 | 第76页 |
| ·pBI-P450-RNAi 质粒的酶切检测 | 第76-77页 |
| ·pBI-P450-RNAi 转化农杆菌后质粒提取 | 第77页 |
| ·pBI-P450-RNAi 转化农杆菌后 PCR 检测 | 第77-78页 |
| ·pBI-P450-RNAi 转化农杆菌后双酶切检测 | 第78-79页 |
| ·讨论 | 第79-80页 |
| ·RNAi 载体的沉默效率 | 第79页 |
| ·RNAi 载体构建的实验细节 | 第79-80页 |
| ·本章小结 | 第80-81页 |
| 第四章 蓖麻植株离体再生体系的建立 | 第81-93页 |
| ·材料与方法 | 第81-84页 |
| ·材料 | 第81页 |
| ·方法 | 第81-83页 |
| ·再生植株的移栽 | 第83页 |
| ·评价指标和计算公式 | 第83-84页 |
| ·培养条件 | 第84页 |
| ·结果与分析 | 第84-89页 |
| ·不同浓度 6-BA 和 ZT 对子叶不定芽诱导的影响 | 第84-85页 |
| ·不同浓度的 IBA 对子叶生根的影响 | 第85页 |
| ·不同浓度 6-BA 和 ZT 对胚轴不定芽诱导的影响 | 第85-86页 |
| ·不同浓度 NAA 对胚轴生根的影响 | 第86-87页 |
| ·不同浓度 ZT 对子叶节不定芽诱导的影响 | 第87页 |
| ·不同浓度 NAA 对子叶节生根的影响 | 第87-88页 |
| ·不同外植体平均不定芽诱导率和平均根分化率统计 | 第88页 |
| ·不同外植体植株移栽成活率统计 | 第88-89页 |
| ·讨论 | 第89-92页 |
| ·不同类型的外植体和植物激素对植株再生的影响 | 第90-91页 |
| ·再生芽玻璃化问题 | 第91-92页 |
| ·再生植株移栽成活率低的问题 | 第92页 |
| ·本章小结 | 第92-93页 |
| 第五章 植物表达载体 pBI-P450-RNAi 对蓖麻子叶节的遗传转化 | 第93-111页 |
| ·材料与方法 | 第93-99页 |
| ·材料 | 第93-94页 |
| ·方法 | 第94-99页 |
| ·结果与分析 | 第99-106页 |
| ·Cef 抑菌效果和对子叶节再生不定芽的影响结果 | 第99页 |
| ·Kan 筛选浓度的优化 | 第99-100页 |
| ·预培养时间对子叶节遗传转化的影响 | 第100页 |
| ·农杆菌侵染浓度和侵染时间对子叶节再生不定芽的影响 | 第100-101页 |
| ·共培养时间对子叶节遗传转化的影响 | 第101-102页 |
| ·AS 对子叶节遗传转化的影响 | 第102页 |
| ·不同浓度的 NAA 和 IBA 对侵染后子叶节再生不定芽和根的影响 | 第102-103页 |
| ·抗性苗的 PCR 鉴定 | 第103-104页 |
| ·Southern blot 检测 | 第104-105页 |
| ·遗传转化全过程 | 第105-106页 |
| ·讨论 | 第106-110页 |
| ·蓖麻转基因的受体系统 | 第106-107页 |
| ·影响蓖麻遗传转化效率的因素 | 第107-110页 |
| ·本章小结 | 第110-111页 |
| 第六章 转基因蓖麻的 RAN 和蛋白表达水平分析 | 第111-123页 |
| ·材料与方法 | 第111-116页 |
| ·材料 | 第111-112页 |
| ·方法 | 第112-116页 |
| ·结果与分析 | 第116-120页 |
| ·转基因蓖麻表型特征 | 第116-117页 |
| ·Northern blot 鉴定 | 第117页 |
| ·转基因蓖麻叶片过氧化物酶和酯酶同工酶分析 | 第117-119页 |
| ·蓖麻组织总蛋白的测定 | 第119-120页 |
| ·Western blot 结果 | 第120页 |
| ·讨论 | 第120-122页 |
| ·关于蓖麻细胞色素 P450 基因的功能 | 第120-121页 |
| ·关于 Northern 杂交 | 第121页 |
| ·关于过氧化物酶和酯酶同工酶 | 第121-122页 |
| ·关于 Western blot | 第122页 |
| ·本章小结 | 第122-123页 |
| 结论 | 第123-124页 |
| 参考文献 | 第124-137页 |
| 附录 缩写词及中英文对照 | 第137-138页 |
| 致谢 | 第138-139页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第139-140页 |
