中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-9页 |
文献综述 | 第9-41页 |
第一部分 肌肉发生 | 第9-26页 |
一、肌肉发生过程中的分子调控 | 第10-16页 |
二、肌肉生长抑制素基因研究进展 | 第16-22页 |
参考文献 | 第22-26页 |
第二部分 肌肉肥大和萎缩的分子调节机制 | 第26-32页 |
一、胰岛素样生长因子信号通路与肌肉肥大 | 第26-27页 |
三、AKT-mTOR信号通路 | 第27-28页 |
四、PI3K-Akt-GSK3β信号通路 | 第28页 |
五、泛素连接酶信号通路与肌肉萎缩 | 第28-30页 |
参考文献 | 第30-32页 |
第三部分 蛋白组研究进展 | 第32-41页 |
一、蛋白质与蛋白质组 | 第32页 |
二、蛋白质组研究的意义 | 第32-34页 |
三、蛋白质组研究技术方法的广泛应用 | 第34页 |
四、蛋白质组学研究技术的发展现状 | 第34-35页 |
五、血清蛋白质组学的研究进展 | 第35-39页 |
参考文献 | 第39-41页 |
材料与方法 | 第41-64页 |
第一部分 实验材料 | 第41-48页 |
一、实验动物、细胞系、菌株和载体 | 第41-42页 |
六、引物 | 第42-43页 |
七、主要实验仪器 | 第43-44页 |
八、主要药品、试剂及溶液配制 | 第44-48页 |
第二部分 主要实验方法 | 第48-64页 |
一、细胞培养 | 第48-49页 |
八、双向电泳样品制备 | 第49-50页 |
九、2D样品蛋白定量:Bradford法 | 第50页 |
十、双向电泳(2-D) | 第50-54页 |
十一、胶内酶切(in-geldigestion) | 第54-55页 |
十二、重组质粒的构建 | 第55-57页 |
十三、重组蛋白质的表达 | 第57-59页 |
十四、抗血清的制备与抗体纯化 | 第59页 |
十五、WesternBlot分析 | 第59-61页 |
十六、真核细胞转染 | 第61-63页 |
十七、流式细胞术分析细胞周期分布 | 第63页 |
十八、OXCT1的活性检测 | 第63-64页 |
结果 | 第64-83页 |
第一部分 蛋鸡肉鸡骨骼肌成肌细胞的差异蛋白鉴定 | 第64-69页 |
一、双向电泳预实验结果表明蛋鸡肉鸡成肌细胞存在差异 | 第64-65页 |
七、双向电泳分析示8个蛋鸡肉鸡成肌细胞差异点 | 第65-66页 |
八、LC-ESIMS结果 | 第66-67页 |
九、Real-timePCR验证4个蛋白的mRNA水平与蛋白水平一致 | 第67-69页 |
第二部分 OXCT1重组蛋白表达纯化及抗体制备 | 第69-74页 |
一、鸡OXCT1氨基酸序列的表面抗原性分析 | 第69-70页 |
十、重组OXCT1蛋白原核表达载体的构建及鉴定 | 第70页 |
十一、重组OXCT1蛋白的诱导表达 | 第70-71页 |
十二、重组OXCT1蛋白的纯化与鉴定 | 第71-72页 |
十三、OXCT1抗体的制备与鉴定 | 第72-74页 |
第三部分 OXCT1在蛋鸡肉鸡骨骼肌中的表达比较 | 第74-77页 |
一、Real-timePCR示OXCT1水平在鸡不同的发育阶段均是肉鸡高于蛋鸡 | 第74-75页 |
十九、肉鸡OXCT1蛋白水平在不同发育阶段均高于蛋鸡 | 第75-76页 |
二十、肉鸡OXCT1酶活性在不同发育阶段均高于蛋鸡 | 第76-77页 |
第四部分 OXCT1功能的初步探讨 | 第77-83页 |
一、鸡血清中3-HB水平变化 | 第77-78页 |
1 胚胎期蛋鸡3-HB水平高于肉鸡 | 第77页 |
2 短期禁食后鸡血清中3-HB水平明显升高 | 第77-78页 |
二、OXCT1过表达载体构建和OXCT1RNAi合成 | 第78-79页 |
三、293T细胞中过表达的OXCT1可以被RNAi抑制 | 第79-80页 |
四、成肌细胞中过表达的OXCT1可以被RNAi抑制 | 第80-81页 |
五、FACS分析表明OXCT1过表达促进DNA合成 | 第81-82页 |
六、Myostatin下调蛋鸡成肌细胞OXCT1水平 | 第82-83页 |
讨论 | 第83-88页 |
一、鸡是生命科学科学研究极有价值的模式动物 | 第83页 |
二、蛋鸡肉鸡骨骼肌成肌细胞差异基因的未知基因的分析 | 第83-85页 |
三、OXCT1基因与蛋鸡肉鸡骨骼肌差异的可能关系 | 第85-88页 |
论文小结 | 第88-90页 |
展望 | 第90-91页 |
致谢 | 第91-92页 |
在读期间发表的学术论文 | 第92-97页 |