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蛋鸡肉鸡成肌细胞差异蛋白鉴定及OXCT1基因功能的初步探讨

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-9页
文献综述第9-41页
 第一部分 肌肉发生第9-26页
  一、肌肉发生过程中的分子调控第10-16页
  二、肌肉生长抑制素基因研究进展第16-22页
  参考文献第22-26页
 第二部分 肌肉肥大和萎缩的分子调节机制第26-32页
  一、胰岛素样生长因子信号通路与肌肉肥大第26-27页
  三、AKT-mTOR信号通路第27-28页
  四、PI3K-Akt-GSK3β信号通路第28页
  五、泛素连接酶信号通路与肌肉萎缩第28-30页
  参考文献第30-32页
 第三部分 蛋白组研究进展第32-41页
  一、蛋白质与蛋白质组第32页
  二、蛋白质组研究的意义第32-34页
  三、蛋白质组研究技术方法的广泛应用第34页
  四、蛋白质组学研究技术的发展现状第34-35页
  五、血清蛋白质组学的研究进展第35-39页
  参考文献第39-41页
材料与方法第41-64页
 第一部分 实验材料第41-48页
  一、实验动物、细胞系、菌株和载体第41-42页
  六、引物第42-43页
  七、主要实验仪器第43-44页
  八、主要药品、试剂及溶液配制第44-48页
 第二部分 主要实验方法第48-64页
  一、细胞培养第48-49页
  八、双向电泳样品制备第49-50页
  九、2D样品蛋白定量:Bradford法第50页
  十、双向电泳(2-D)第50-54页
  十一、胶内酶切(in-geldigestion)第54-55页
  十二、重组质粒的构建第55-57页
  十三、重组蛋白质的表达第57-59页
  十四、抗血清的制备与抗体纯化第59页
  十五、WesternBlot分析第59-61页
  十六、真核细胞转染第61-63页
  十七、流式细胞术分析细胞周期分布第63页
  十八、OXCT1的活性检测第63-64页
结果第64-83页
 第一部分 蛋鸡肉鸡骨骼肌成肌细胞的差异蛋白鉴定第64-69页
  一、双向电泳预实验结果表明蛋鸡肉鸡成肌细胞存在差异第64-65页
  七、双向电泳分析示8个蛋鸡肉鸡成肌细胞差异点第65-66页
  八、LC-ESIMS结果第66-67页
  九、Real-timePCR验证4个蛋白的mRNA水平与蛋白水平一致第67-69页
 第二部分 OXCT1重组蛋白表达纯化及抗体制备第69-74页
  一、鸡OXCT1氨基酸序列的表面抗原性分析第69-70页
  十、重组OXCT1蛋白原核表达载体的构建及鉴定第70页
  十一、重组OXCT1蛋白的诱导表达第70-71页
  十二、重组OXCT1蛋白的纯化与鉴定第71-72页
  十三、OXCT1抗体的制备与鉴定第72-74页
 第三部分 OXCT1在蛋鸡肉鸡骨骼肌中的表达比较第74-77页
  一、Real-timePCR示OXCT1水平在鸡不同的发育阶段均是肉鸡高于蛋鸡第74-75页
  十九、肉鸡OXCT1蛋白水平在不同发育阶段均高于蛋鸡第75-76页
  二十、肉鸡OXCT1酶活性在不同发育阶段均高于蛋鸡第76-77页
 第四部分 OXCT1功能的初步探讨第77-83页
  一、鸡血清中3-HB水平变化第77-78页
   1 胚胎期蛋鸡3-HB水平高于肉鸡第77页
   2 短期禁食后鸡血清中3-HB水平明显升高第77-78页
  二、OXCT1过表达载体构建和OXCT1RNAi合成第78-79页
  三、293T细胞中过表达的OXCT1可以被RNAi抑制第79-80页
  四、成肌细胞中过表达的OXCT1可以被RNAi抑制第80-81页
  五、FACS分析表明OXCT1过表达促进DNA合成第81-82页
  六、Myostatin下调蛋鸡成肌细胞OXCT1水平第82-83页
讨论第83-88页
 一、鸡是生命科学科学研究极有价值的模式动物第83页
 二、蛋鸡肉鸡骨骼肌成肌细胞差异基因的未知基因的分析第83-85页
 三、OXCT1基因与蛋鸡肉鸡骨骼肌差异的可能关系第85-88页
论文小结第88-90页
展望第90-91页
致谢第91-92页
在读期间发表的学术论文第92-97页

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