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反义HSP90mRNA对消化系肿瘤细胞药物敏感性的影响

中文摘要第1-8页
英文摘要第8-12页
缩略词表第12-14页
前言第14-16页
文献回顾第16-44页
 一.HSP90的生物学特性及功能第16-22页
 二.HSP90与肿瘤第22-24页
 三.热休克蛋白与肿瘤耐药第24-27页
 四.肿瘤多药耐药的机制第27-39页
 五.肿瘤多药耐药的逆转第39-44页
第一部分 热休克蛋白HSP90β在人胃癌组织及耐药细胞系中的表达第44-62页
 材料和方法第44-52页
 结果第52-59页
 讨论第59-62页
第二部分 反义HSP90mRNA对消化系肿瘤细胞药物敏感性的影响第62-151页
 主要仪器设备及实验材料第62-68页
 主要实验方法第68-90页
  一.反义HSP90mRNA真核表达载体的构建第68-74页
  二.重组质粒的转染及阳性克隆的筛选第74-75页
  三.转染细胞的分子生物学鉴定(RNA表达的检测)第75-80页
  四.Western blot第80-84页
  五.转染细胞的形态和生长速度观察第84页
  六.细胞周期分析第84页
  七.体外药物敏感实验第84-85页
  八.FCM测定细胞内药物浓度第85页
  九.GST活性测定第85-87页
  十.拓扑异构酶活性测定第87-90页
 实验结果第90-136页
  一.反义HSP90mRNA真核表达载体pcDNA-HSP90的酶切鉴定第90-91页
  二.转染细胞的抗性筛选及挑选阳性克隆第91-94页
  三.转染细胞的分子生物学特性(mRNA的表达)第94-96页
  四.基因转染后对细胞HSP90蛋白表达的影响第96-101页
  五.基因转染后对各细胞系生物学行为的影响第101-136页
   1.转染细胞的形态变化第101-103页
   2.转染细胞的生长曲线第103-106页
   3.转染细胞细胞周期改变第106-110页
   4.转染细胞药物敏感性实验第110-121页
   5.FCM测定细胞内阿霉素含量第121-125页
   6.转染细胞P-GP的表达第125-128页
   7.转染细胞TOPOⅡ的表达第128-133页
   8.转染细胞GST活性改变第133-134页
   9.转染细胞TOPOⅡ活性改变第134-136页
 讨论第136-151页
致谢第151-152页
参考文献第152-159页
发表论文第159页

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