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应用5锚定PCR开发谷子微卫星标记

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-9页
引言第9-10页
1 文章综述第10-26页
   ·谷子的经济意义及研究概况第10-12页
     ·谷子研究的重要意义第10页
     ·谷子与青狗尾草的植物学分类第10-11页
     ·谷子的分子生物学研究概况及发展前景第11-12页
   ·DNA 分子标记的概述第12-17页
     ·以分子杂交为基础的分子标记第12-13页
     ·以PCR 为基础的DNA 分子标记技术第13-15页
     ·基于PCR 与限制性酶切技术结合的DNA 标记第15-16页
     ·基于单核苷酸多态性的DNA 标记第16页
     ·主要类型的DNA 分子标记的技术特点比较第16-17页
   ·谷子DNA 分子标记的研究动态第17-19页
     ·构建遗传连锁图谱第17-18页
     ·基因定位第18页
     ·品种或种质遗传多样性研究第18页
     ·谷子与其它禾谷类作物的比较遗传学的研究第18-19页
   ·常用的获得SSR 分子标记的方法第19-26页
     ·筛选基因组文库法第19页
     ·微卫星富集法第19-21页
     ·基于ISSR-PCR 的几种代表性的技术第21-24页
     ·数据库搜索第24页
     ·引物在物种间的转移性扩增第24-25页
     ·几种微卫星分离策略的比较第25-26页
2 研究报告第26-58页
   ·材料与试剂第26-27页
     ·材料第26-27页
     ·试剂第27页
     ·引物合成第27页
   ·实验方法第27-35页
     ·谷子基因组SSR 文库的构建第27-32页
     ·克隆产物测序第32页
     ·SSR 侧翼特异性引物的设计与合成第32页
     ·适宜引物的筛选第32-34页
     ·多态性引物的筛选第34页
     ·遗传多样性分析及通用性检测第34页
     ·数据分析第34-35页
   ·结果与分析第35-58页
     ·5′锚定简并引物在豫谷1 中的扩增的结果第35-37页
     ·回收产物的克隆第37-38页
     ·克隆产物的测序结果分析第38-41页
     ·特异引物的设计第41-44页
     ·适宜引物的筛选结果与分析第44页
     ·多态性引物的筛选结果与分析第44-45页
     ·多态性引物的跨物种应用及遗传多样性分析第45-58页
3 讨论第58-62页
   ·开发SSR 标记的关键性问题第58页
   ·5′锚定PCR 技术分离SSR 序列的效率第58-59页
   ·谷子微卫星的特点第59页
   ·用5′锚定PCR 的方法产生多态性SSR 标记的效率第59-60页
   ·谷子微卫星位点的等位基因数第60页
   ·SSR 引物的跨物中应用第60-61页
   ·SSR 标记的遗传多样性分析第61-62页
结论第62-63页
参考文献第63-70页
附录(一)第70-71页
附录(二)第71-79页
致谢第79-80页
攻读学位期间取得的科研成果清单第80页

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