中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-10页 |
第一章 前言及文献综述 | 第10-19页 |
1 牛奶中的免疫球蛋白研究进展 | 第10-14页 |
·免疫球蛋白的基本结构和功能 | 第10-12页 |
·血液及乳中的免疫球蛋白种类及含量 | 第12-13页 |
·乳品加工技术对乳中免疫球蛋白的影响的研究进展 | 第13-14页 |
·乳中免疫球蛋白含量的影响因素 | 第14页 |
2 动物多聚免疫球蛋白受体(pIgR)研究概况 | 第14-18页 |
·多聚免疫球蛋白受体(pIgR)的分子结构 | 第15页 |
·多聚免疫球蛋白受体(pIgR)的生物学功能 | 第15-17页 |
·动物多聚免疫球蛋白受体(pIgR)的研究概况 | 第17-18页 |
3 本研究的意义 | 第18-19页 |
第二章 初乳、常乳和免疫乳中的免疫球蛋白含量的变化规律及其SDS-PAGE 分析 | 第19-32页 |
1 试验目的及意义 | 第19页 |
2 材料与方法 | 第19-22页 |
·抗原缓释剂ARD | 第19-20页 |
·试验奶牛饲养管理及样品的收集 | 第20-21页 |
·乳清和血清中免疫球蛋白的测定 | 第21页 |
·SDS-PAGE 电泳及相对定量分析 | 第21页 |
·统计分析 | 第21-22页 |
3 结果与分析 | 第22-29页 |
·ARD 埋植后血清和乳清中的免疫球蛋白含量的变化规律 | 第22-23页 |
·初乳中的免疫球蛋白含量的变化规律及其与免疫乳的比较 | 第23页 |
·免疫球蛋白的相关性分析 | 第23-26页 |
·SDS-PAGE 电泳及其相对定量分析 | 第26-29页 |
4 讨论 | 第29-31页 |
·ARD 埋植后血清和乳清中的免疫球蛋白含量的变化规律 | 第29页 |
·初乳中的免疫球蛋白含量的变化规律及其与免疫乳的比较 | 第29页 |
·免疫球蛋白的相关性分析 | 第29-30页 |
·SDS-PAGE 电泳及其乳清中主要蛋白的相对定量分析 | 第30-31页 |
5 结论 | 第31-32页 |
第三章 正常泌乳奶牛其乳中IgA 和IgM 含量的影响因素研究 | 第32-41页 |
1 试验目的及意义 | 第32页 |
2 材料与方法 | 第32-33页 |
·试验奶牛的选择 | 第32页 |
·样品的采集和体细胞数(SCC)的测定 | 第32页 |
·夹心ELISA 测定乳中IgA 和IgM 的含量 | 第32页 |
·数据处理与统计分析 | 第32-33页 |
3 结果 | 第33-38页 |
·正常泌乳奶牛乳中IgA 和IgM 的含量和分布 | 第33-34页 |
·奶牛胎次对乳中IgA 和IgM 含量的影响 | 第34页 |
·奶牛泌乳阶段对乳中IgA 和IgM 含量的影响 | 第34-35页 |
·奶牛日产奶量对乳中IgA 和IgM 含量的影响 | 第35页 |
·体细胞数评分(SCS)对乳中IgA 和IgM 含量的影响 | 第35-36页 |
·对各影响因素进行多元回归分析和通径分析 | 第36-38页 |
4 讨论 | 第38-40页 |
·胎次对乳中IgA 和IgM 浓度的影响 | 第38-39页 |
·泌乳阶段对乳中IgA 和IgM 浓度的影响 | 第39页 |
·产奶量对乳中IgA 和IgM 浓度的影响 | 第39页 |
·SCS 对乳中IgA 和IgM 浓度的影响 | 第39-40页 |
·对各影响因素进行多元回归分析和通径分析 | 第40页 |
5 结论 | 第40-41页 |
第四章 多聚免疫球蛋白受体基因5’侧翼区的SNP 检测及其与牛奶和血液中的IgA 和IgM 含量的相关性研究 | 第41-48页 |
1 试验目的及意义 | 第41页 |
2 材料与方法 | 第41-43页 |
·样品采集及DNA 的提取 | 第41-42页 |
·血液和牛奶中IgA 和IgM 含量的ELISA 检测 | 第42页 |
·主要试剂 | 第42页 |
·PCR 扩增、纯化后测序发现并确定SNP 位点 | 第42页 |
·SNP Stream 进行基因分型 | 第42页 |
·统计分析 | 第42-43页 |
3 结果与分析 | 第43-46页 |
·DNA 提取效果及PCR 扩增结果 | 第43页 |
·PCR 产物测序分析发现SNP 位点 | 第43-44页 |
·基因型频率、单倍型和单倍型组合频率 | 第44页 |
·不同SNP 位点、单倍型组合与IgA 和IgM 含量的关联分析 | 第44-46页 |
4 讨论 | 第46-47页 |
5 结论 | 第47-48页 |
第五章 小鼠免疫刺激后乳腺中pIgR 基因mRNA 的表达及特异性IgA 含量的变化 | 第48-59页 |
1 试验目的及意义 | 第48页 |
2 材料与方法 | 第48-52页 |
·小鼠及饲养管理 | 第48页 |
·试验设计 | 第48-49页 |
·样品采集 | 第49页 |
·分子生物学主要试剂耗材及仪器设备 | 第49-50页 |
·检测指标及方法 | 第50-52页 |
·数据统计分析 | 第52页 |
3 结果与分析 | 第52-57页 |
·小鼠乳腺总RNA 的提取效果及其引物的PCR 检测 | 第52-53页 |
·小鼠乳腺中特异性IgA 含量的变化 | 第53-54页 |
·小鼠乳腺中pIgR 基因的mRNA 的表达量 | 第54-57页 |
4 讨论 | 第57-58页 |
·小鼠血浆和乳中特异性IgA 含量的变化 | 第57-58页 |
·小鼠乳腺中pIgR 基因的mRNA 表达量的变化 | 第58页 |
5 结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-66页 |
总结论 | 第66-67页 |
本文创新点及后续研究思路 | 第67-68页 |
附录 | 第68-81页 |
附录一 夹心ELISA 测定IgG/IgA/IgM 含量的方法 | 第68-71页 |
附录二 SDS-PAGE 电泳及Quantity One 定量分析 | 第71-74页 |
附录三 奶牛pIgR 基因5’侧翼区的序列及其转录位点的预测 | 第74-77页 |
附录四 12 重SNPstream 基因分型系统操作手册 | 第77-81页 |
致谢 | 第81-82页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第82-83页 |