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乳中IgA和IgM含量的变化及其影响因素的机理研究

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-10页
第一章 前言及文献综述第10-19页
 1 牛奶中的免疫球蛋白研究进展第10-14页
   ·免疫球蛋白的基本结构和功能第10-12页
   ·血液及乳中的免疫球蛋白种类及含量第12-13页
   ·乳品加工技术对乳中免疫球蛋白的影响的研究进展第13-14页
   ·乳中免疫球蛋白含量的影响因素第14页
 2 动物多聚免疫球蛋白受体(pIgR)研究概况第14-18页
   ·多聚免疫球蛋白受体(pIgR)的分子结构第15页
   ·多聚免疫球蛋白受体(pIgR)的生物学功能第15-17页
   ·动物多聚免疫球蛋白受体(pIgR)的研究概况第17-18页
 3 本研究的意义第18-19页
第二章 初乳、常乳和免疫乳中的免疫球蛋白含量的变化规律及其SDS-PAGE 分析第19-32页
 1 试验目的及意义第19页
 2 材料与方法第19-22页
   ·抗原缓释剂ARD第19-20页
   ·试验奶牛饲养管理及样品的收集第20-21页
   ·乳清和血清中免疫球蛋白的测定第21页
   ·SDS-PAGE 电泳及相对定量分析第21页
   ·统计分析第21-22页
 3 结果与分析第22-29页
   ·ARD 埋植后血清和乳清中的免疫球蛋白含量的变化规律第22-23页
   ·初乳中的免疫球蛋白含量的变化规律及其与免疫乳的比较第23页
   ·免疫球蛋白的相关性分析第23-26页
   ·SDS-PAGE 电泳及其相对定量分析第26-29页
 4 讨论第29-31页
   ·ARD 埋植后血清和乳清中的免疫球蛋白含量的变化规律第29页
   ·初乳中的免疫球蛋白含量的变化规律及其与免疫乳的比较第29页
   ·免疫球蛋白的相关性分析第29-30页
   ·SDS-PAGE 电泳及其乳清中主要蛋白的相对定量分析第30-31页
 5 结论第31-32页
第三章 正常泌乳奶牛其乳中IgA 和IgM 含量的影响因素研究第32-41页
 1 试验目的及意义第32页
 2 材料与方法第32-33页
   ·试验奶牛的选择第32页
   ·样品的采集和体细胞数(SCC)的测定第32页
   ·夹心ELISA 测定乳中IgA 和IgM 的含量第32页
   ·数据处理与统计分析第32-33页
 3 结果第33-38页
   ·正常泌乳奶牛乳中IgA 和IgM 的含量和分布第33-34页
   ·奶牛胎次对乳中IgA 和IgM 含量的影响第34页
   ·奶牛泌乳阶段对乳中IgA 和IgM 含量的影响第34-35页
   ·奶牛日产奶量对乳中IgA 和IgM 含量的影响第35页
   ·体细胞数评分(SCS)对乳中IgA 和IgM 含量的影响第35-36页
   ·对各影响因素进行多元回归分析和通径分析第36-38页
 4 讨论第38-40页
   ·胎次对乳中IgA 和IgM 浓度的影响第38-39页
   ·泌乳阶段对乳中IgA 和IgM 浓度的影响第39页
   ·产奶量对乳中IgA 和IgM 浓度的影响第39页
   ·SCS 对乳中IgA 和IgM 浓度的影响第39-40页
   ·对各影响因素进行多元回归分析和通径分析第40页
 5 结论第40-41页
第四章 多聚免疫球蛋白受体基因5’侧翼区的SNP 检测及其与牛奶和血液中的IgA 和IgM 含量的相关性研究第41-48页
 1 试验目的及意义第41页
 2 材料与方法第41-43页
   ·样品采集及DNA 的提取第41-42页
   ·血液和牛奶中IgA 和IgM 含量的ELISA 检测第42页
   ·主要试剂第42页
   ·PCR 扩增、纯化后测序发现并确定SNP 位点第42页
   ·SNP Stream 进行基因分型第42页
   ·统计分析第42-43页
 3 结果与分析第43-46页
   ·DNA 提取效果及PCR 扩增结果第43页
   ·PCR 产物测序分析发现SNP 位点第43-44页
   ·基因型频率、单倍型和单倍型组合频率第44页
   ·不同SNP 位点、单倍型组合与IgA 和IgM 含量的关联分析第44-46页
 4 讨论第46-47页
 5 结论第47-48页
第五章 小鼠免疫刺激后乳腺中pIgR 基因mRNA 的表达及特异性IgA 含量的变化第48-59页
 1 试验目的及意义第48页
 2 材料与方法第48-52页
   ·小鼠及饲养管理第48页
   ·试验设计第48-49页
   ·样品采集第49页
   ·分子生物学主要试剂耗材及仪器设备第49-50页
   ·检测指标及方法第50-52页
   ·数据统计分析第52页
 3 结果与分析第52-57页
   ·小鼠乳腺总RNA 的提取效果及其引物的PCR 检测第52-53页
   ·小鼠乳腺中特异性IgA 含量的变化第53-54页
   ·小鼠乳腺中pIgR 基因的mRNA 的表达量第54-57页
 4 讨论第57-58页
   ·小鼠血浆和乳中特异性IgA 含量的变化第57-58页
   ·小鼠乳腺中pIgR 基因的mRNA 表达量的变化第58页
 5 结论第58-59页
参考文献第59-66页
总结论第66-67页
本文创新点及后续研究思路第67-68页
附录第68-81页
 附录一 夹心ELISA 测定IgG/IgA/IgM 含量的方法第68-71页
 附录二 SDS-PAGE 电泳及Quantity One 定量分析第71-74页
 附录三 奶牛pIgR 基因5’侧翼区的序列及其转录位点的预测第74-77页
 附录四 12 重SNPstream 基因分型系统操作手册第77-81页
致谢第81-82页
攻读学位期间发表的学术论文目录第82-83页

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