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转EPSPS基因抗草甘膦烟草棉花的研究

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
第一章 引言第10-28页
   ·草甘膦除草剂第12-14页
     ·草甘膦的理化性质第12-13页
     ·草甘膦的优越性第13-14页
   ·草甘膦的作用机制第14-18页
     ·抑制芳香族氨基酸的合成第15-17页
     ·抑制其它生物合成途径第17页
     ·草甘膦抑制光合磷酸化及ATP酶的活性第17-18页
   ·5-烯醇式丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶(EPSPS)研究进展第18-21页
     ·EPSP合酶的发现第18-19页
     ·EPSP合酶的分类和定位第19页
     ·EPSP合酶的三维结构与活性区第19-20页
     ·EPSP合酶的分子生物学研究进展第20-21页
   ·抗草甘膦转基因作物育种途径及研究进展第21-24页
     ·通过转入经修饰的或突变的EPSPS基因获得草甘膦抗性第21页
     ·通过转入过量表达的EPSPS基因获得草甘膦抗性第21-22页
     ·通过转入草甘膦降解酶基因获得草甘膦抗性第22页
     ·抗草甘膦转基因作物的研究进展第22-24页
   ·抗草甘膦转基因棉花的研究进展第24-26页
     ·通过诱变或无性系变异获得抗草甘膦棉花第24-25页
     ·利用基因工程的手段获得抗草甘膦棉花第25页
     ·抗草甘膦棉花的生产利用第25-26页
     ·抗草甘膦转基因棉花研究和应用展望第26页
   ·本研究的目的意义及研究思路第26-27页
   ·本研究的技术路线第27-28页
第二章 材料与方法第28-39页
   ·材料第28-30页
     ·植物材料第28页
     ·质粒和菌株第28页
     ·酶和试剂盒第28页
     ·PCR引物第28页
     ·培养基第28-29页
     ·实验仪器第29-30页
   ·方法第30-39页
     ·质粒DNA的小量提取第30页
     ·大肠杆菌感受态的制备第30页
     ·大肠杆菌的转化第30-31页
     ·冻融法回收目的基因片段第31页
     ·Kit回收DNA片段第31页
     ·植物表达载体的构建第31-32页
     ·质粒DNA的大量提取第32页
     ·花粉管通道法转化棉花第32-33页
     ·根癌农杆菌LBA4404感受态的制备第33页
     ·将重组质粒DNA转入农杆菌第33页
     ·农杆菌的活化第33页
     ·烟草遗传转化第33-34页
     ·转基因烟草的抗性检测第34页
     ·转基因棉花的抗性检测第34页
     ·烟草DNA的提取第34页
     ·棉花基因组DNA的提取第34-35页
     ·转基因烟草的PCR检测第35页
     ·转基因棉花的PCR检测第35页
     ·Southern杂交第35-39页
第三章 实验结果与分析第39-49页
   ·植物表达载体的构建结果第39-43页
   ·烟草的遗传转化第43页
   ·转基因烟草的抗性测定第43-44页
   ·转基因棉花的抗性检测第44-45页
   ·转基因烟草的PCR检测第45-46页
   ·转基因棉花的PCR和SOUTHERN杂交检测第46-49页
第四章 讨论与结论第49-52页
   ·讨论第49-51页
   ·结论第51-52页
     ·高效植物表达载体的构建第51页
     ·抗草甘膦转基因烟草的获得第51页
     ·抗草甘膦转基因棉花的获得第51-52页
参考文献第52-59页
附录第59-60页
致谢第60-61页
作者简历第61页

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