| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 1.文献综述 | 第12-25页 |
| ·稻瘟病菌 | 第12-14页 |
| ·稻瘟病菌功能基因组的研究 | 第12-13页 |
| ·反向遗传学方法 | 第13-14页 |
| ·T-DNA插入在真菌功能基因组研究上的应用 | 第14页 |
| ·真菌的氮代谢及其调控机制 | 第14-23页 |
| ·硝酸盐的同化 | 第15-16页 |
| ·硝酸根同化基因启动子的分析 | 第16-18页 |
| ·整体起作用的氮调控基因 | 第18-21页 |
| ·GATA因子结合DNA | 第21-22页 |
| ·AREA和NIT2识别元件 | 第22-23页 |
| ·氮代谢的调控和真菌的致病性 | 第23页 |
| ·稻瘟菌中氮饥饿中基因的表达的最新进展 | 第23-25页 |
| 2.材料与方法 | 第25-36页 |
| ·材料 | 第25-26页 |
| ·供试菌株 | 第25页 |
| ·培养基 | 第25-26页 |
| ·抗生素 | 第26页 |
| ·克隆载体和转化载体 | 第26页 |
| ·生化试剂 | 第26页 |
| ·方法 | 第26-36页 |
| ·农杆菌介导T—DNA插入稻瘟病菌突变体的转化与筛选 | 第26-27页 |
| ·硝酸盐利用缺陷型突变体的筛选方法 | 第27页 |
| ·潮霉素抗性验证 | 第27页 |
| ·稻瘟病菌基因组DNA的提取及提取质量的检测 | 第27-28页 |
| ·T-DNA插入的分子检测 | 第28-29页 |
| ·普通PCR检测方法 | 第28页 |
| ·热不对称嵌套PCR检测方法 | 第28-29页 |
| ·DNA片段的回收、克隆和测序 | 第29-30页 |
| ·DNA片段的回收 | 第29页 |
| ·DNA片段与载体pMD18-T的连接 | 第29-30页 |
| ·T-DNA插入侧翼序列的测序与插入位点的分析和验证 | 第30-31页 |
| ·有性交配及子囊孢子后代潮霉素的分离比例 | 第31页 |
| ·孢子萌发及附着胞形成实验 | 第31页 |
| ·洋葱表皮内侵染结构的观察 | 第31页 |
| ·致病性变异测定 | 第31-32页 |
| ·有性交配的子囊孢子后代致病性的分离比例研究 | 第32页 |
| ·稻瘟病菌原生质体制备和转化 | 第32页 |
| ·MGG_06042.5基因敲除突变体的载体构建 | 第32-34页 |
| ·MGG_06042.5基因互补突变体的载体构建 | 第34-36页 |
| 3.结果与分析 | 第36-45页 |
| ·构建的T-DNA插入稻瘟病菌突变体的数目 | 第36页 |
| ·硝酸盐利用缺陷型突变体的筛选与分析 | 第36-45页 |
| ·硝酸盐利用缺陷型突变体的筛选 | 第36页 |
| ·对T940002002-1-2(5)突变体的研究 | 第36-45页 |
| ·潮霉素抗性验证 | 第36页 |
| ·潮霉素基因片段扩增的验证 | 第36-37页 |
| ·T-DNA插入侧翼序列的扩增 | 第37-38页 |
| ·T-DNA插入侧翼序列及插入基因的分析 | 第38-39页 |
| ·T-DNA序列插入的方式与插入位点的验证 | 第39-40页 |
| ·交配后代潮霉素的分离比例 | 第40页 |
| ·突变体的生长与发育变化 | 第40-41页 |
| ·突变体的致病性分析 | 第41页 |
| ·有性交配的子囊孢子后代致病性的分离比例研究 | 第41-43页 |
| ·MGG_06042.5基因敲除验证 | 第43-44页 |
| ·MGG_06042.5基因功能互补验证 | 第44-45页 |
| 4.结论与讨论 | 第45-48页 |
| ·突变体的筛选方法 | 第45页 |
| ·氮代谢相关基因的分析 | 第45-46页 |
| ·插入基因MGG_06042.5的功能验证 | 第46-48页 |
| 小结 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-57页 |
| 附录 | 第57-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
