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DSPP、Enamelin基因片断的克隆及其在牙胚的表达检测

摘要第1-3页
Abstract第3-4页
中文文摘第4-6页
目录第6-8页
第1章 绪论第8-24页
   ·牙齿的发育第8-11页
     ·牙齿的形态发育第8页
     ·牙齿早期发育过程中上皮与间充质的相互作用第8-9页
     ·上皮与间充质之间相互作用的分子机制第9-11页
     ·生长因子及转录因子在上皮与间充质相互作用过程中的作用第11页
   ·牙本质发生第11-16页
     ·牙本质发生的基本过程第11页
     ·成牙本质细胞分化机制第11-13页
     ·成牙本质细胞的分化指标第13页
     ·牙本质基质蛋白第13-15页
     ·人、小鼠DSPP基因第15-16页
   ·釉质发生第16-20页
     ·成釉细胞的分化与釉基质的分泌第16-17页
     ·釉质矿化第17-18页
     ·牙釉质基质蛋白第18-20页
     ·人、小鼠Enamelin基因第20页
   ·牙齿再生第20-23页
     ·牙齿再生研究进展第21-22页
     ·牙齿再生的可能技术路线第22-23页
   ·本研究的研究目的和意义第23-24页
第2章 实验材料第24-28页
   ·主要仪器第24页
   ·主要药品第24-25页
   ·菌株和载体第25页
   ·软件第25页
   ·常用培养基和缓冲液第25-28页
第3章 实验方法第28-38页
   ·序列分析及引物设计第28-30页
   ·基因组DNA提取第30页
   ·PCR扩增第30-31页
   ·PCR产物的T-A克隆及其酶切鉴定第31-32页
   ·序列测定及序列分析第32页
   ·mRNA反义探针转录第32页
   ·RNA电泳第32页
   ·RNA纯化第32-33页
   ·组织切片制备第33-34页
     ·人牙胚的培养第33页
     ·人、小鼠牙胚脱钙固定时间的确定第33-34页
     ·组织切片及HE染色第34页
   ·原位杂交第34-38页
第4章 结果与分析第38-50页
   ·序列分析及引物设计结果第38页
   ·PCR结果第38-39页
   ·酶切鉴定第39-40页
   ·测序结果的相似性比较及序列分析第40-44页
   ·模板制备第44-45页
   ·mRNA反义探针转录第45-46页
   ·人、小鼠牙胚固定脱钙时间的确定第46-47页
   ·原位杂交检测DSPP及 Enamelin 基因表达确认探针特异性第47-50页
     ·原位杂交检测DSPP基因表达确认DSPP探针特异性第47-49页
     ·原位杂交检测Enamelin基因表达确认 Enamelin探针特异性第49-50页
第5章 结论第50-52页
   ·DSPP探针第50页
   ·Enamelin探针第50-51页
   ·移植人牙胚在裸鼠肾囊膜中的继续发育时间第51-52页
附录一 测序结果第52-56页
附录二 构建的质粒图谱第56-58页
参考文献第58-62页
攻读学位期间承担的科研任务与主要成果第62-64页
个人简历第64-66页
致谢第66页

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