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棉花叶绿体Cu/Zn-SOD基因植物表达载体的构建及转化

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
符号或缩略词说明第11-12页
1 文献综述第12-26页
   ·棉花早熟性及与早熟不早衰相关的研究概况第12-13页
     ·早熟性的标记指标研究第12页
     ·棉花早熟性的生理测定指标第12页
     ·短季棉早熟性构成因素的遗传规律的研究第12-13页
     ·棉花早熟不早衰生理生化机制的研究第13页
     ·有关早熟性的基因控制方面的研究第13页
   ·国内外超氧化物酶的研究进展第13-19页
     ·植物SOD的发现第13-15页
     ·植物SOD的生物学功能第15页
     ·植物SOD的分类和在细胞中的分布第15-16页
     ·植物SOD的理化性质第16-17页
     ·SOD酶的结构第17页
     ·SOD基因克隆与转基因研究第17-19页
   ·SOD与植物抗逆的关系第19-22页
     ·与温度胁迫的关系第19-20页
     ·与水分胁迫的关系第20页
     ·与病害胁迫的关系第20-21页
     ·与高盐胁迫的关系第21页
     ·与衰老的关系第21-22页
   ·SOD的功效及用途第22-24页
     ·SOD在化妆品上的应用第22页
     ·SOD在食品工业上的应用第22-23页
     ·SOD药品第23-24页
   ·转基因技术及其发展现状第24-25页
     ·转基因技术的发展第24页
     ·转基因技术常用方法第24-25页
       ·农杆菌介导法第24-25页
       ·基因枪法第25页
       ·电击和聚乙二醇(PEG)法第25页
       ·花粉管通道法第25页
   ·本试验研究的目的与意义第25-26页
2 棉花叶绿体Cu/Zn-SOD基因植物表达载体的构建第26-34页
   ·材料与方法第26-31页
     ·实验材料第26-28页
       ·菌株和质粒第26-27页
       ·引物设计第27页
       ·实验试剂第27页
       ·试验仪器与设备第27-28页
     ·实验方法第28-31页
       ·DNA片段的回收和定量第28页
       ·农杆菌LBA4404的感受态细胞制备第28-29页
       ·棉花叶绿体Cu/Zn-SOD基因植物表达载体的构建第29-30页
       ·质粒小量提取第30-31页
       ·根癌农杆菌的培养及保存第31页
   ·结果与分析第31-33页
     ·中间重组质粒的构建第31-32页
     ·棉花叶绿体Cu/Zn-SOD基因植物表达载体的构建第32-33页
   ·结论与讨论第33-34页
3 农杆菌介导的棉花叶绿体Cu/Zn-SOD基因转化烟草第34-50页
   ·实验材料第34-35页
     ·植物材料第34页
     ·试验试剂第34页
     ·试验仪器与设备第34-35页
   ·实验方法第35-41页
     ·诱导培养基的确定第35页
     ·生根培养基的确定第35页
     ·烟草的的遗传转化第35-36页
     ·转化植株的分子检测第36-40页
       ·转基因植株DNA的提取第36页
       ·PCR检测第36-37页
       ·烟草Cu/Zn-SOD基因的Southern blotting分析第37-40页
     ·SOD粗酶液的提取与同工酶活性测定第40-41页
       ·SOD粗酶液的提取第40页
       ·SOD同工酶活性的测定第40-41页
     ·转基因植株百草枯耐性试验和衰老研究第41页
       ·转基因植株百草枯耐性试验第41页
       ·转基因植株的衰老研究第41页
   ·结果与分析第41-48页
     ·诱导培养基的确定第41-42页
     ·生根培养基的确定第42页
     ·抗性筛选标记浓度对烟草转化的影响第42-43页
     ·适应侵染受体材料的农杆菌浊度和时间的选择第43-44页
     ·转基因植株的获得第44-45页
     ·转基因植株的分子检测第45-46页
       ·转基因植株的PCR检测第45-46页
       ·转基因植株的Southern blotting检测第46页
     ·转基因植株的百草枯试验和衰老研究第46-48页
       ·转基因植株的百草枯试验第46-47页
       ·转基因植株的离体叶片试验第47-48页
   ·结论与讨论第48-50页
4 农杆菌介导棉花叶绿体Cu-ZnSOD基因在棉花中的表达第50-56页
   ·材料和方法第50-51页
     ·试验材料第50页
     ·试验试剂第50页
     ·试验仪器和设备第50页
     ·试验方法第50-51页
       ·工程菌的制备第51页
       ·遗传转化第51页
       ·转化植株的分子检测第51页
   ·结果与分析第51-54页
     ·品种对愈伤化的影响第51-53页
     ·抗性筛选标记浓度对棉花遗传转化的影响第53页
     ·适应侵染受体材料的农杆菌浊度和时间的选择第53-54页
     ·卡那霉素抗性植株的获得第54页
   ·结论和讨论第54-56页
     ·外植体基因型对棉花遗传转化的影响第54-55页
     ·激素对棉花遗传转化的影响第55-56页
5 结论第56-58页
   ·结论第56-57页
   ·进一步工作的设想第57-58页
参考文献第58-63页
作者简介第63-64页
附录Ⅰ(植物遗传转化载体PBI121结构图)第64-65页
附录Ⅱ(MS培养基配方)第65-66页
附录Ⅲ(DNA提取)第66-67页
致谢第67页

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