| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-30页 |
| ·霉形体概述 | 第12页 |
| ·鸡毒霉形体病的研究 | 第12-17页 |
| ·病原及发病特点 | 第12-13页 |
| ·流行病学 | 第13-14页 |
| ·致病机理 | 第14页 |
| ·免疫机制 | 第14-15页 |
| ·诊断方法研究 | 第15-16页 |
| ·病原的分离和鉴定 | 第15页 |
| ·血清学方法 | 第15页 |
| ·分子生物学诊断方法 | 第15-16页 |
| ·治疗与控制 | 第16-17页 |
| ·鸡毒霉形体蛋白分子生物学研究进展 | 第17-22页 |
| ·鸡毒霉形体结构蛋白的研究 | 第17-20页 |
| ·29KDa蛋白 | 第18页 |
| ·MGC3蛋白 | 第18页 |
| ·MGC1蛋白 | 第18-19页 |
| ·MGC2蛋白 | 第19页 |
| ·PvpA蛋白 | 第19-20页 |
| ·GgpA蛋白 | 第20页 |
| ·鸡毒霉形体血凝素蛋白(pMGA)研究 | 第20-22页 |
| ·pMGA基因家族 | 第20-21页 |
| ·血凝素蛋白 | 第21-22页 |
| ·基因应用的研究 | 第22-30页 |
| ·基因免疫的研究进展 | 第22-23页 |
| ·基因疫苗的结构 | 第23-24页 |
| ·鸡毒霉形体基因的研究 | 第24-26页 |
| ·DNA酶切分析 | 第24-25页 |
| ·物理图谱的构建 | 第25页 |
| ·DNA指纹分析技术 | 第25页 |
| ·rRNA基因的研究 | 第25-26页 |
| ·抗原表位的研究 | 第26-30页 |
| ·抗原表位研究进展 | 第26-27页 |
| ·抗原表位应用研究 | 第27-30页 |
| 2 鸡毒霉形体HS株TM-1基因和mgc3基因表位的原核表达及活性鉴定 | 第30-61页 |
| ·研究的目的与意义 | 第30-32页 |
| ·材料与方法 | 第32-45页 |
| ·材料 | 第32-37页 |
| ·主要仪器 | 第32页 |
| ·菌株、宿主菌 | 第32页 |
| ·载体 | 第32-33页 |
| ·酶、试剂盒及主要试剂 | 第33页 |
| ·主要试剂的配制 | 第33-37页 |
| ·生物学软件与相关的生物学网址 | 第37页 |
| ·方法 | 第37-45页 |
| ·PCR引物 | 第37-38页 |
| ·MG-HS基因组提取 | 第38-39页 |
| ·PCR扩增与检测 | 第39页 |
| ·PCR产物回收 | 第39-40页 |
| ·目的基因的克隆 | 第40-41页 |
| ·TM-1基因、mgc3-1和mgc3-2基因序列预测分析 | 第41-42页 |
| ·mgc3基因的抗原表位mgc3-P1、mgc3-P2、mgc3-P3和mgc3-P4的扩增 | 第42页 |
| ·mgc3-P1、mgc3-P2、mgc3-P3和mgc3-P4扩增片段克隆与测序 | 第42页 |
| ·重组表达质粒的构建 | 第42-43页 |
| ·诱导表达 | 第43页 |
| ·包涵体的纯化 | 第43页 |
| ·可溶性蛋白的提取与纯化 | 第43-44页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第44页 |
| ·Western blot | 第44-45页 |
| ·结果与分析 | 第45-61页 |
| ·TM-1、mgc3基因的克隆测序及序列分析 | 第45-46页 |
| ·TM-1基因的扩增 | 第45页 |
| ·mgc3基因的扩增 | 第45-46页 |
| ·pMD-TM-1、pMD-mgc3-1和pMD-mgc3-2重组质粒的酶切鉴定 | 第46-47页 |
| ·TM-1基因和mgc3基因(mgc3-1+mgc3-2)的序列测定分析 | 第47-51页 |
| ·TM-1和mgc3基因测序及序列分析结果 | 第47-51页 |
| ·氨基酸序列的分析 | 第51-57页 |
| ·跨膜区分析 | 第51-55页 |
| ·DNAStar软件分析MGC3二级结构 | 第55-57页 |
| ·重组表达质粒pKG-TM-1、pKG-mgc3-P1和pKG-mgc3-P2的构建 | 第57-59页 |
| ·重组表达质粒pKG-TM-1的构建 | 第57-58页 |
| ·重组表达质粒pKG-mgc3-P1和pKG-mgc3-P2的构建 | 第58-59页 |
| ·保护性抗原和抗原表位的原核表达及Western blot活性鉴定 | 第59-61页 |
| ·保护性抗原基因TM-1的原核表达及免疫活性鉴定 | 第59页 |
| ·保护性抗原基因mgc3的抗原表位的表达及免疫活性鉴定 | 第59-61页 |
| 3 讨论与结论 | 第61-65页 |
| ·讨论 | 第61-64页 |
| ·鸡毒霉形体HS株保护性抗原TM-1和mgc3基因的克隆 | 第61-62页 |
| ·鸡毒霉形体HS株保护性抗原TM-1基因序列分析 | 第62页 |
| ·MG-HS株保护性抗原MGC3蛋白表位分析 | 第62-64页 |
| ·结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
