| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-10页 |
| 文献综述 | 第10-18页 |
| 1 小球藻研究概况 | 第10-14页 |
| ·小球藻的保健药理作用 | 第10-12页 |
| ·促进免疫力 | 第10-11页 |
| ·抗肿瘤 | 第11页 |
| ·抗病原微生物 | 第11-12页 |
| ·抗辐射作用 | 第12页 |
| ·降血脂和抗动脉粥样硬化活性 | 第12页 |
| ·其他作用 | 第12页 |
| ·小球藻糖蛋白研究进展 | 第12-14页 |
| 2 报告基因的选择 | 第14-15页 |
| ·绿色荧光蛋白的性质 | 第14页 |
| ·绿色荧光蛋白的优点 | 第14-15页 |
| 3 化学预防剂的研究进展 | 第15-17页 |
| ·Ⅱ相酶的概念 | 第15-16页 |
| ·化学预防剂的筛选 | 第16-17页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
| 第一章 小球藻糖蛋白的分离纯化 | 第18-27页 |
| 1 实验材料 | 第18页 |
| ·小球藻来源 | 第18页 |
| ·试剂 | 第18页 |
| ·主要仪器 | 第18页 |
| 2 实验方法 | 第18-20页 |
| ·糖和蛋白质含量的测定 | 第18页 |
| ·糖蛋白粗提的工艺流程 | 第18-19页 |
| ·糖蛋白提取工艺参数的单因素实验 | 第19页 |
| ·糖蛋白的纯化 | 第19-20页 |
| ·凝胶柱层析鉴定 | 第20页 |
| ·SDS-PAGE 电泳鉴定 | 第20页 |
| 3 结果与分析 | 第20-25页 |
| ·糖蛋白提取工艺参数的比较 | 第20-23页 |
| ·料水比对糖蛋白得率的影响 | 第20-21页 |
| ·温度对糖蛋白得率的影响 | 第21页 |
| ·提取时间对糖蛋白得率的影响 | 第21-22页 |
| ·提取次数对糖蛋白得率的影响 | 第22页 |
| ·优化小球藻糖蛋白提取工艺的正交实验 | 第22-23页 |
| ·糖蛋白的提纯与分析 | 第23-25页 |
| ·纯化 | 第23-24页 |
| ·柱层析鉴定 | 第24页 |
| ·PAGE 电泳鉴定 | 第24-25页 |
| 4 讨论 | 第25-27页 |
| 第二章 绿色荧光蛋白真核表达载体的构建 | 第27-41页 |
| 1 实验材料 | 第27-28页 |
| ·质粒和菌株 | 第27页 |
| ·试剂 | 第27页 |
| ·主要仪器 | 第27页 |
| ·主要试剂的配制 | 第27-28页 |
| 2 实验方法 | 第28-36页 |
| ·启动子的选择与克隆 | 第28-31页 |
| ·PCR 引物的设计与合成 | 第28-29页 |
| ·第一轮PCR 反应 | 第29页 |
| ·第二轮PCR 反应 | 第29-30页 |
| ·TA 克隆 | 第30-31页 |
| ·绿色荧光蛋白（GFP）表达载体的构建 | 第31-36页 |
| ·ARE 的设计、退火和磷酸化 | 第31-32页 |
| ·pTK-GFP 载体的构建 | 第32-33页 |
| ·pARE-TK-GFP 载体的构建 | 第33-34页 |
| ·pTK-GFP/neo 真核表达载体的构建 | 第34-35页 |
| ·pARE-TK-GFP/neo 真核表达载体的构建 | 第35-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-39页 |
| ·重组TK 启动子的扩增 | 第36-37页 |
| ·TA 克隆的酶切鉴定 | 第37页 |
| ·pTK-GFP 和pARE-TK-GFP 表达载体的鉴定 | 第37-38页 |
| ·pTK-GFP/neo 和pARE-TK-GFP/neo 真核表达载体的鉴定 | 第38-39页 |
| ·酶切鉴定 | 第38页 |
| ·测序鉴定 | 第38-39页 |
| 4 讨论 | 第39-41页 |
| 第三章 转基因细胞模型的建立及对糖蛋白的筛选 | 第41-50页 |
| 1 实验材料 | 第41-42页 |
| ·细胞 | 第41页 |
| ·试剂 | 第41页 |
| ·主要仪器 | 第41页 |
| ·主要试剂的配制 | 第41-42页 |
| 2 实验方法 | 第42-44页 |
| ·HepG2 细胞的培养 | 第42页 |
| ·转染用质粒的制备 | 第42-43页 |
| ·pTK-GFP/neo 和pARE-TK-GFP/neo 表达载体的大量提取 | 第42页 |
| ·聚乙二醇法纯化 | 第42-43页 |
| ·表达载体的浓度测定 | 第43页 |
| ·脂质体法转染 HepG2细胞 | 第43页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第43页 |
| ·转基因细胞中 GFP 荧光与DNA 含量的检测 | 第43-44页 |
| ·转基因细胞模型对糖蛋白的筛选 | 第44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-48页 |
| ·转基因细胞模型的建立 | 第44-45页 |
| ·报告基因表达体系对人工合成PDTC 的实验研究 | 第45-46页 |
| ·报告基因表达体系对天然化学物香菇多糖的实验研究 | 第46-47页 |
| ·报告基因表达体系对糖蛋白的实验研究 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-50页 |
| 全文结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第59页 |
