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日本七鳃鳗RGD毒素肽Lampetrin1的基因克隆、表达及部分生物学活性

摘要第1-4页
Abstract第4-9页
1. 文献综述第9-22页
   ·整合素的功能及其信号转导通路第9-15页
     ·RGD 肽及其整合素受体家族第9-10页
     ·整合素的功能及其信号转导通路第10-11页
     ·整合素簇与信号复合体第11-13页
     ·整合素在肿瘤发生中的作用第13-14页
     ·整合素与血管新生第14-15页
     ·整合素和血管生长因子第15页
   ·RGD 肽的功能和作用机制第15-22页
     ·抑制血小板粘附、聚集,抗血栓形成第16-17页
     ·RGD 肽对肿瘤的抑制作用第17-19页
     ·RGD 肽促进骨组织再生第19-21页
     ·抑制视网膜色素上皮细胞引起的牵引性视网膜脱落第21-22页
2. RGD毒素肽 Lampetrin1 的基因克隆与序列分析第22-32页
   ·材料第22页
     ·动物材料第22页
     ·试剂第22页
   ·方法第22-29页
     ·引物设计第22页
     ·利用 RT-PCR 方法获取目的基因第22-24页
     ·目的基因的克隆第24-27页
     ·cDNA 序列及其编码蛋白质的计算机分析第27-29页
   ·结果第29-30页
     ·RT-PCR 结果第29-30页
     ·阳性转化子的 PCR 筛选与双酶切鉴定第30页
     ·cDNA 测序结果及由cDNA 序列推导的氨基酸序列第30页
   ·讨论第30-32页
3. RGD 毒素肽Lampetrin1 的诱导表达、鉴定与纯化第32-38页
   ·材料第32页
   ·方法第32-35页
     ·pET23b-Lampetrin1 转化入表达菌第32页
     ·对重组表达菌的鉴定第32页
     ·对重组菌进行不同时间与温度梯度的 IPTG 诱导表达第32-33页
     ·蛋白的诱导表达、提取及鉴定第33页
     ·Tricine-SDS PAGE鉴定第33-34页
     ·重组蛋白 Lampetrin1 的纯化第34-35页
     ·采用 Brodford 检测法进行纯化蛋白的浓度测定第35页
   ·结果第35-37页
     ·对重组菌进行时间梯度与温度梯度的 IPTG 诱导表达第35-36页
     ·蛋白质电泳第36页
     ·蛋白质纯化结果第36-37页
     ·蛋白标准曲线的绘制第37页
     ·纯化蛋白的浓度和产量第37页
   ·讨论第37-38页
   ·结论第38页
4. Lampetrin1 的生物学活性第38-54页
   ·Lampetrin1 对兔血小板聚集的抑制作用第39-42页
     ·材料第39页
     ·方法第39-40页
     ·结果第40页
     ·讨论第40-42页
     ·结论第42页
   ·血管生成的体内实验第42-44页
     ·材料与方法第42-43页
     ·结果与讨论第43-44页
   ·Lampetrin1 对肿瘤细胞的作用第44-54页
     ·材料第45页
     ·方法第45-48页
     ·结果第48-53页
     ·讨论第53-54页
5. Lampetrin1 多克隆抗体的制备第54-59页
   ·材料与方法第54-55页
     ·器材第54页
     ·试剂第54页
     ·兔子的选择第54页
     ·方法第54-55页
     ·血清的分离第55页
   ·Western Blotting 检测第55-59页
     ·材料第55-56页
     ·方法第56-59页
参考文献第59-65页
附录第65-66页
致谢第66-67页

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