| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 1 引言 | 第8-21页 |
| ·骨形态发生蛋白(BMPS)概述 | 第9-10页 |
| ·BMP-15 的研究现状 | 第10-18页 |
| ·BMP-15 的发现 | 第10-11页 |
| ·BMP-15 的结构 | 第11页 |
| ·BMP-15 的染色体定位 | 第11-12页 |
| ·BMP-15 的表达 | 第12页 |
| ·BMP-15 的生物学功能 | 第12-15页 |
| ·BMP-15 的作用机制 | 第15-17页 |
| ·BMP-15 的应用和研究方向 | 第17-18页 |
| ·ISH 技术及其探针 | 第18-20页 |
| ·ISH 技术的原理 | 第18页 |
| ·ISH 技术的特点 | 第18-19页 |
| ·地高辛标记的cRNA 探针的优点 | 第19-20页 |
| ·本研究的目的、意义和研究方法 | 第20-21页 |
| 2 实验一牛骨形态发生蛋白15（BMP-15）基因部分CDNA 的克隆 | 第21-31页 |
| ·实验材料 | 第21-22页 |
| ·菌株和载体 | 第21页 |
| ·实验动物及其组织 | 第21页 |
| ·主要仪器和设备 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-28页 |
| ·PCR 引物的设计及合成 | 第22页 |
| ·母牛卵巢组织总 RNA 的提取 | 第22-23页 |
| ·RT-PCR 反应 | 第23-24页 |
| ·牛 BMP-15 基因cDNA 的克隆 | 第24-26页 |
| ·重组质粒的筛选和鉴定 | 第26-28页 |
| ·重组质粒的序列测定 | 第28页 |
| ·结果与分析 | 第28-31页 |
| ·总 RNA 提取结果 | 第28-29页 |
| ·目的基因的 RT-PCR 扩增结果 | 第29页 |
| ·扩增产物的克隆及重组质粒的鉴定结果 | 第29-31页 |
| ·重组质粒的测序结果 | 第31页 |
| ·序列分析 | 第31页 |
| 3 实验二牛BMP-15 基因MRNA 在卵巢中的表达 | 第31-44页 |
| ·实验材料 | 第32-34页 |
| ·实验动物及其组织 | 第32页 |
| ·主要仪器和设备 | 第32页 |
| ·主要试剂 | 第32-33页 |
| ·主要溶液及试剂配制 | 第33-34页 |
| ·实验方法 | 第34-39页 |
| ·RNA 酶的灭活 | 第34页 |
| ·组织样品的固定与石蜡包埋 | 第34-35页 |
| ·载玻片的处理 | 第35-36页 |
| ·cRNA 核酸探针的制备 | 第36-37页 |
| ·原位杂交 | 第37-39页 |
| ·结果与分析 | 第39-44页 |
| ·牛BMP-15 cRNA 探针的合成及标记结果 | 第39-41页 |
| ·原位杂交结果 | 第41-44页 |
| 4 讨论 | 第44-48页 |
| ·牛 BMP-15 基因的克隆 | 第44页 |
| ·BMP-15 的表达分析 | 第44-46页 |
| ·CRNA 探针的合成策略 | 第46-47页 |
| ·ISH 技术的应用 | 第47-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 作者简介 | 第56页 |