| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-16页 |
| 文献综述 | 第16-38页 |
| 第一章 脂肪细胞分化及其研究模型 | 第16-22页 |
| ·脂肪细胞分化 | 第16-20页 |
| ·脂肪细胞分化历程 | 第16-18页 |
| ·脂肪细胞分化过程的形态变化 | 第17-18页 |
| ·脂肪细胞分化过程中的基因表达 | 第18页 |
| ·脂肪细胞分化的转录因子调控 | 第18-20页 |
| ·过氧化物酶体增殖剂激活受体γ(PPARγ) | 第18-19页 |
| ·CAAT/增强子结合蛋白家族(C/EBPs) | 第19-20页 |
| ·脂肪细胞决定与分化因子 1(ADD1) | 第20页 |
| ·脂肪细胞分化的研究模型 | 第20-22页 |
| ·前脂肪细胞系 | 第20-21页 |
| ·原代前体脂肪细胞离体培养模式 | 第21-22页 |
| 第二章 RXRα 在脂肪组织中的作用 | 第22-29页 |
| ·RXR 简介 | 第22-25页 |
| ·核受体 | 第22页 |
| ·RXR 的发现与结构特点 | 第22-24页 |
| ·RXR 的功能 | 第24页 |
| ·RXR 组织分布 | 第24页 |
| ·RXR 的配体和抑制剂 | 第24-25页 |
| ·RXR 在脂肪组织中的作用 | 第25-29页 |
| ·RXR 在脂肪组织中的分布 | 第25-26页 |
| ·RXRα在脂肪细胞分化中的作用 | 第26-27页 |
| ·RXRα 与脂肪细胞凋亡 | 第27-29页 |
| 第三章 RNAi 与脂肪细胞研究 | 第29-38页 |
| ·RNA 干扰的机制 | 第29-30页 |
| ·RNA 干扰现象的研究历史 | 第29页 |
| ·RNAi 的分子机制 | 第29-30页 |
| ·dsRNA产生 | 第29-30页 |
| ·RNAi 效应阶段 | 第30页 |
| ·沉默信号的传递与放大 | 第30页 |
| ·RNAi 的生物学意义、特点、应用领域 | 第30-32页 |
| ·RNAi 的优势 | 第30-31页 |
| ·RNAi 的特点 | 第31页 |
| ·RNAi 应用领域 | 第31-32页 |
| ·RNAi 在脂肪细胞中的应用策略 | 第32-37页 |
| ·靶siRNA 序列选择和设计 | 第33页 |
| ·siRNA 制备方法 | 第33-36页 |
| ·化学合成 | 第34页 |
| ·体外转录法合成siRNA | 第34页 |
| ·用RNase III 或Dicer 消化长片段dsRNA 制备siRNA | 第34页 |
| ·siRNA 表达载体 | 第34-35页 |
| ·siRNA 表达框架 | 第35-36页 |
| ·siRNA 的转染 | 第36页 |
| ·RNAi 干扰脂肪细胞基因功能的检测方法 | 第36-37页 |
| ·RNAi 存在的问题 | 第37-38页 |
| 试验研究 | 第38-89页 |
| 前言 | 第38-40页 |
| 第四章 RXRα在猪前体脂肪细胞分化中的时序表达 | 第40-49页 |
| ·材料与方法 | 第40-45页 |
| ·材料 | 第40-41页 |
| ·实验动物 | 第40页 |
| ·主要试剂 | 第40页 |
| ·实验仪器及器械 | 第40-41页 |
| ·方法 | 第41-45页 |
| ·主要溶液配制 | 第41-42页 |
| ·猪前体脂肪细胞原代培养 | 第42页 |
| ·油红O 染色 | 第42页 |
| ·Hoechst 33342 染色 | 第42页 |
| ·脂肪细胞RNA 提取 | 第42-43页 |
| ·半定量逆转录聚合酶链式反应（SQ RT-PCR） | 第43-44页 |
| ·间接免疫荧光 | 第44-45页 |
| ·统计学分析 | 第45页 |
| ·结果 | 第45-47页 |
| ·猪前体脂肪细胞分化的形态观察 | 第45-46页 |
| ·RXRα在猪前体脂肪细胞分化过程中的表达状况 | 第46页 |
| ·RXRα蛋白在猪前体脂肪细胞分化过程中的表达状况 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-48页 |
| ·猪前体脂肪细胞分化过程 | 第47页 |
| ·RXRα在猪前体脂肪细胞分化过程中的时序表达 | 第47-48页 |
| ·小结 | 第48-49页 |
| 第五章 9 顺式维甲酸对猪前体脂肪细胞分化的影响 | 第49-56页 |
| ·材料与方法 | 第49-51页 |
| ·材料 | 第49-50页 |
| ·实验动物 | 第49页 |
| ·主要试剂 | 第49页 |
| ·实验仪器及器械 | 第49-50页 |
| ·方法 | 第50-51页 |
| ·主要溶液配制 | 第50页 |
| ·猪前体脂肪细胞原代培养 | 第50页 |
| ·油红O 染色提取法 | 第50页 |
| ·油红O 染色 | 第50页 |
| ·脂肪细胞RNA 提取 | 第50页 |
| ·SQ RT-PCR 分析 | 第50-51页 |
| ·GPDH 活性的测定 | 第51页 |
| ·统计学分析 | 第51页 |
| ·结果 | 第51-54页 |
| ·9-cisRA 对猪前体脂肪细胞分化的影响 | 第51-53页 |
| ·9-cisRA 对猪前体脂肪细胞充脂状况的影响 | 第51-53页 |
| ·9-cisRA 对猪前体脂肪细胞分化过程中GPDH 活性的影响 | 第53页 |
| ·9-cisRA 对猪前体脂肪细胞分化过程中转录因子基因表达的影响 | 第53-54页 |
| ·讨论 | 第54-55页 |
| ·9-cisRA 对猪前体脂肪细胞分化的影响 | 第54-55页 |
| ·9-cisRA 影响猪前体脂肪细胞分化的可能机制 | 第55页 |
| ·小结 | 第55-56页 |
| 第六章 超表达RXRα对猪前体脂肪细胞分化的影响 | 第56-67页 |
| ·材料与方法 | 第56-60页 |
| ·材料 | 第56-57页 |
| ·实验动物 | 第56页 |
| ·主要试剂 | 第56页 |
| ·实验仪器 | 第56-57页 |
| ·方法 | 第57-60页 |
| ·主要溶液配制 | 第57页 |
| ·pRXRα-EGFP 载体的构建 | 第57-58页 |
| ·猪前体脂肪细胞获得 | 第58页 |
| ·pRXRα-EGFP 载体的转染 | 第58-59页 |
| ·诱导分化 | 第59页 |
| ·脂肪细胞分化的形态学与生化指标检测 | 第59页 |
| ·SQ RT-PCR | 第59-60页 |
| ·统计学分析 | 第60页 |
| ·结果 | 第60-64页 |
| ·pRXRα-EGFP 载体的构建 | 第60-61页 |
| ·猪前体脂肪细胞的获得 | 第61页 |
| ·pRXRα-EGFP 转染猪前体脂肪细胞 | 第61-62页 |
| ·pRXRα-EGFP 对猪前体脂肪细胞分化的影响 | 第62-63页 |
| ·pRXRα-EGFP 对RXRα、C/EBPα和PPARγ基因表达的影响 | 第63-64页 |
| ·讨论 | 第64-65页 |
| ·提高猪前体脂肪细胞的转染效率 | 第64页 |
| ·超表达RXRα对猪前体脂肪细胞分化的影响 | 第64-65页 |
| ·超表达RXRα影响猪前体脂肪细胞分化的可能机制 | 第65页 |
| ·小结 | 第65-67页 |
| 第七章 沉默RXRα对猪前体脂肪细胞分化的影响 | 第67-80页 |
| ·材料与方法 | 第67-71页 |
| ·材料 | 第67-68页 |
| ·实验动物 | 第67页 |
| ·主要试剂 | 第67-68页 |
| ·实验仪器 | 第68页 |
| ·方法 | 第68-71页 |
| ·主要溶液配制 | 第68页 |
| ·猪前体脂肪细胞获得 | 第68-69页 |
| ·pSUPER-RXRα干扰载体的构建 | 第69页 |
| ·siRNAs 合成、转染及最佳浓度和有效序列的筛选 | 第69-70页 |
| ·脂肪细胞分化的形态学与生化指标检测 | 第70页 |
| ·间接免疫荧光 | 第70页 |
| ·semi-qRT-PCR | 第70-71页 |
| ·Western blotting | 第71页 |
| ·统计学分析 | 第71页 |
| ·结果 | 第71-77页 |
| ·pSUPER-RXRα干扰载体的成功构建 | 第71-72页 |
| ·pSUPER-RXRα干扰载体的转染 | 第72页 |
| ·siRNA 转染猪前体脂肪细胞 | 第72-73页 |
| ·沉默效果的检测 | 第73-75页 |
| ·RXRα-siRNA 对猪前体脂肪细胞分化的影响 | 第75-76页 |
| ·RXRα-siRNA 对RXRα、CEBPα和PPARγ基因表达的影响 | 第76-77页 |
| ·讨论 | 第77-79页 |
| ·RNAi 技术在脂肪细胞中的应用 | 第77-78页 |
| ·沉默RXRα对猪前体脂肪细胞分化的影响 | 第78页 |
| ·沉默RXRα影响猪前体脂肪细胞分化的可能机制 | 第78-79页 |
| ·小结 | 第79-80页 |
| 第八章 RXRα对猪前体脂肪细胞凋亡的影响 | 第80-86页 |
| ·材料与方法 | 第80-81页 |
| ·材料 | 第80-81页 |
| ·实验动物 | 第80页 |
| ·主要试剂 | 第80页 |
| ·实验仪器 | 第80-81页 |
| ·方法 | 第81页 |
| ·猪前体脂肪细胞原代培养 | 第81页 |
| ·吖啶橙（AO）染色 | 第81页 |
| ·Hoechst 33342染色 | 第81页 |
| ·流式细胞术 | 第81页 |
| ·统计学分析 | 第81页 |
| ·结果 | 第81-83页 |
| ·吖啶橙染色结果 | 第81-82页 |
| ·Hoechst 33342染色结果 | 第82页 |
| ·流式细胞仪检测结果 | 第82-83页 |
| ·讨论 | 第83-85页 |
| ·小结 | 第85-86页 |
| 第九章 综合讨论 | 第86-89页 |
| 结论 | 第89-90页 |
| 本研究的创新点 | 第90-91页 |
| 进一步研究内容 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-107页 |
| 缩略词表 | 第107-109页 |
| 致谢 | 第109-110页 |
| 作者简介 | 第110页 |
