| 摘要 | 第1-3页 |
| SUMMARY | 第3-8页 |
| 英文缩写 | 第8-9页 |
| 前言 | 第9-12页 |
| 第一部分 引言及综述 | 第12-28页 |
| 第一章 杜氏盐藻部分 | 第12-13页 |
| 第二章 钙依赖蛋白激酶(CDPK)部分 | 第13-21页 |
| 第一节 概述 | 第13-14页 |
| 第二节 CDPK 在植物体内的分布及其结构特点 | 第14-15页 |
| 第三节 CDPK 的生化性质 | 第15-16页 |
| 第四节 CDPK 的底物 | 第16-17页 |
| 第五节 CDPK 在植物体内的生理功能 | 第17-21页 |
| 第三章 拟南芥部分 | 第21-28页 |
| 第一节 拟南芥的生物学特性 | 第21-22页 |
| 第二节 拟南芥的研究历史 | 第22-24页 |
| 第三节 影响拟南芥生长的因素 | 第24-25页 |
| 第四节 拟南芥的遗传转化 | 第25-26页 |
| 第五节 拟南芥的基因组学研究 | 第26-28页 |
| 第二部分 杜氏盐藻CDPK 基因的克隆 | 第28-35页 |
| 第一章 材料和方法 | 第28-31页 |
| 第一节 材料 | 第28-29页 |
| ·菌株和藻种 | 第28页 |
| ·试剂盒、工具酶和其他试剂 | 第28页 |
| ·引物的设计和克隆的测序 | 第28-29页 |
| ·盐藻培养基的配置 | 第29页 |
| 第二节 方法 | 第29-31页 |
| ·简并引物的设计 | 第29页 |
| ·杜氏盐藻细胞的低渗和高渗培养 | 第29-30页 |
| ·杜氏盐藻总RNA 的提取 | 第30页 |
| ·杜氏盐藻CDPK 基因部分cDNA 片段的克隆 | 第30页 |
| ·杜氏盐藻CDPK 基因全长cDNA 的构建 | 第30-31页 |
| ·核酸与蛋白质的序列分析 | 第31页 |
| 第二章 结果和讨论 | 第31-35页 |
| 第一节 结果 | 第31-33页 |
| ·杜氏盐藻总RNA 的提取 | 第31页 |
| ·杜氏盐藻CDPK 基因cDNA 片段的同源克隆 | 第31-32页 |
| ·杜氏盐藻CDPK 基因全长cDNA 的构建 | 第32页 |
| ·盐藻CDPK 基因cDNA 的序列分析 | 第32-33页 |
| 第二节 讨论 | 第33-34页 |
| ·杜氏盐藻总RNA 的提取 | 第33页 |
| ·杜氏盐藻CDPK 基因全长cDNA 的构建 | 第33-34页 |
| 第三节 小结 | 第34-35页 |
| 第三部分 杜氏盐藻CDPK 基因农杆菌表达载体的构建 | 第35-43页 |
| 第一章 材料和方法 | 第35-40页 |
| 第一节 材料 | 第35-36页 |
| ·菌株 | 第35页 |
| ·质粒 | 第35页 |
| ·试剂 | 第35页 |
| ·仪器 | 第35页 |
| ·溶液及培养基的配置 | 第35-36页 |
| 第二节 方法 | 第36-40页 |
| ·质粒的提取 | 第36页 |
| ·质粒的酶切、回收 | 第36-37页 |
| ·PCR 引物的设计和目的基因扩增 | 第37-38页 |
| ·目的片段的酶切、回收 | 第38页 |
| ·粘性连接反应 | 第38页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第38页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定和PCR 检测 | 第38-39页 |
| ·重组质粒转化农杆菌 | 第39页 |
| ·农杆菌表达载体的鉴定 | 第39-40页 |
| 第二章 结果和讨论 | 第40-43页 |
| 第一节 结果 | 第40-42页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定和PCR 检测 | 第40页 |
| ·农杆菌表达载体的构建和鉴定 | 第40-42页 |
| 第二节 讨论 | 第42页 |
| ·农杆菌表达载体的构建策略 | 第42页 |
| ·农杆菌表达载体的鉴定 | 第42页 |
| 第三节 小结 | 第42-43页 |
| 第四部分 拟南芥转基因植株的获得和检测 | 第43-55页 |
| 第一章 材料和方法 | 第43-47页 |
| 第一节 材料 | 第43-44页 |
| ·拟南芥的品种 | 第43页 |
| ·农杆菌菌种 | 第43页 |
| ·营养土 | 第43页 |
| ·溶液及培养基的配制 | 第43-44页 |
| ·测序仪 | 第44页 |
| 第二节 方法 | 第44-47页 |
| ·野生型拟南芥Kan 浓度的确定 | 第44页 |
| ·农杆菌浸染液的制备 | 第44-45页 |
| ·拟南芥的花序浸泡法 | 第45-47页 |
| ·DNA 序列测定 | 第47页 |
| 第二章 结果和讨论 | 第47-55页 |
| 第一节 结果 | 第47-52页 |
| ·野生型拟南芥Kan 浓度的确定 | 第47页 |
| ·拟南芥的花序浸泡转化 | 第47-50页 |
| ·转基因拟南芥的PCR 鉴定 | 第50-51页 |
| ·DNA 序列的测序结果 | 第51-52页 |
| 第二节 讨论 | 第52-54页 |
| ·拟南芥种子灭菌及无菌苗的培养 | 第52页 |
| ·拟南芥总DNA 的提取和拟南芥的种植 | 第52-53页 |
| ·拟南芥的花序浸泡转化 | 第53页 |
| ·转基因植株的PCR 鉴定 | 第53页 |
| ·DNA 序列的测定 | 第53-54页 |
| 第三节 小结 | 第54-55页 |
| 结论 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-64页 |
| 作者简介 | 第64-65页 |
| 导师简介 | 第65-66页 |