| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 1 前言 | 第8-10页 |
| 2 材料和方法 | 第10-21页 |
| ·实验材料与仪器设备 | 第10-13页 |
| ·培养基 | 第10页 |
| ·菌种来源 | 第10-12页 |
| ·第12批、13批红树林样品微生物分离筛选菌种来源 | 第10-11页 |
| ·31株具有抗菌活性和细胞毒活性红树林有丝真菌来源 | 第11-12页 |
| ·本实验使用的仪器与试剂 | 第12-13页 |
| ·仪器与设备 | 第12-13页 |
| ·活性筛选、评价材料 | 第13页 |
| ·主要试剂 | 第13页 |
| ·实验方法 | 第13-21页 |
| ·第12、13批红树林微生物的分离、纯化 | 第13-15页 |
| ·样品及分离培养基制备 | 第13-14页 |
| ·样品菌悬液的制备 | 第13-14页 |
| ·样品浸提液的制备 | 第14页 |
| ·分离培养基中添加抑制剂 | 第14页 |
| ·微生物分离和培养 | 第14-15页 |
| ·样品稀释涂布 | 第14页 |
| ·培养 | 第14页 |
| ·记录菌株编号、单菌落形态及挑菌发酵 | 第14页 |
| ·菌种保藏及发酵液的处理 | 第14-15页 |
| ·红树林第12、13批9个样品微生物初筛和具有活性145株有丝真菌复筛 | 第15-16页 |
| ·菌种的发酵 | 第15页 |
| ·抗肿瘤细胞毒活性(MTT法)检测 | 第15-16页 |
| ·MTT法活性检测原理 | 第15页 |
| ·细胞培养 | 第15页 |
| ·细胞种板及加样 | 第15-16页 |
| ·抗金黄色葡萄球菌与抗白色念珠菌活性检测 | 第16页 |
| ·原理 | 第16页 |
| ·抗金黄色葡萄球菌活性检测原理 | 第16页 |
| ·抗白色念珠菌活性检测原理 | 第16页 |
| ·抗金黄色葡萄球菌、白色念珠菌菌液和抗生素稀释 | 第16页 |
| ·96孔板培养和检测 | 第16页 |
| ·活性评价标准 | 第16页 |
| ·耐盐度实验 | 第16-17页 |
| ·具有抗菌和细胞毒活性31株红树林真菌的形态学鉴定 | 第17页 |
| ·菌落形态特征 | 第17页 |
| ·显微特征 | 第17页 |
| ·具有抗菌和细胞毒活性31株红树林真菌生理生化特征 | 第17-18页 |
| ·碳源利用 | 第17-18页 |
| ·实验原理 | 第17-18页 |
| ·操作过程 | 第18页 |
| ·氮源利用 | 第18页 |
| ·核酸序列分析 | 第18-21页 |
| ·菌株总DNA提取 | 第18-19页 |
| ·菌株的PCR扩增及产物回收 | 第19-21页 |
| ·菌株的PCR扩增 | 第19页 |
| ·PCR产物的回收纯化 | 第19页 |
| ·转化克隆测序 | 第19-21页 |
| ·感受态细胞制备 | 第19-20页 |
| ·连接 | 第20页 |
| ·化学转化 | 第20页 |
| ·克隆载体质粒DNA的微量提取 | 第20-21页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第21页 |
| 3 结果与分析 | 第21-37页 |
| ·第12批、13批红树林9个样品微生物的分离结果 | 第21-22页 |
| ·第12、13批红树林微生物初筛和具有活性的145株真菌复筛 | 第22-24页 |
| ·第12、13批9个红树林样品分离纯化的菌株发酵上清液初筛结果 | 第22页 |
| ·菌种保藏库中31株具有活性红树林真菌复筛结果 | 第22-24页 |
| ·菌种保藏库中145株有丝真菌活性复筛 | 第22-23页 |
| ·31株具有活性红树林真菌活性复筛结果 | 第23-24页 |
| ·耐盐度实验 | 第24-25页 |
| ·31株活性红树林真菌典型形态特征及初步归属 | 第25-27页 |
| ·31株活性红树林真菌生理生化特征 | 第27-29页 |
| ·利用碳源同化对31株有丝真菌分类 | 第27-28页 |
| ·19种常用于真菌鉴定的碳源同化对31株菌的检测结果 | 第28-29页 |
| ·29株真菌rDNA序列分析,系统发育树的构建及聚类分析 | 第29-34页 |
| ·29株真菌rDNA序列分析 | 第29-31页 |
| ·29株真菌系统发育树的构建及聚类分析 | 第31-34页 |
| ·29株真菌系统发育树的构建及聚类分析 | 第31-33页 |
| ·29株真菌与GeneBank数据库中的序列构建系统发育树 | 第33-34页 |
| ·31株具有活性红树林真菌鉴定结果小结 | 第34-37页 |
| ·31株红树林真菌鉴定结果 | 第34-35页 |
| ·鉴定结果的一个例子:菌株094811的鉴定 | 第35-37页 |
| 4 讨论 | 第37-40页 |
| ·红树林真菌优势菌属 | 第37-39页 |
| ·真菌分类鉴定方法 | 第39-40页 |
| 5 结论 | 第40-42页 |
| 文献综述 | 第42-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 附录 | 第58-99页 |
