| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 第1章 绪论 | 第9-19页 |
| ·天青蛋白 | 第10-14页 |
| ·azurin的来源、组成和生物学意义 | 第10-11页 |
| ·azurin的三维结构及其构象特点 | 第11-12页 |
| ·稳定性和二硫键的作用 | 第12-13页 |
| ·电子传递及其特点 | 第13页 |
| ·azurin的生物性质 | 第13-14页 |
| ·展望 | 第14页 |
| ·p53蛋白 | 第14-15页 |
| ·电子顺磁共振波谱仪(ESR)和电子自旋标记方法 | 第15-19页 |
| ·电子顺磁共振技术 | 第15-17页 |
| ·电子自旋标记方法 | 第17-19页 |
| 第2章 实验原理 | 第19-29页 |
| ·亲和层析 | 第19-20页 |
| ·凝胶层析 | 第20-22页 |
| ·基本原理 | 第20-21页 |
| ·凝胶类型 | 第21-22页 |
| ·SDS-PAGE | 第22-23页 |
| ·考马斯亮蓝法 | 第23页 |
| ·荧光分光光度法 | 第23-24页 |
| ·圆二色法 | 第24-25页 |
| ·透析 | 第25-26页 |
| ·电子顺磁共振波谱 | 第26-28页 |
| ·顺磁共振基本原理 | 第26-27页 |
| ·电子顺磁共振波谱特性 | 第27-28页 |
| ·本章小节 | 第28-29页 |
| 第3章 天青蛋白的表达及纯化 | 第29-35页 |
| ·材料与方法 | 第29页 |
| ·主要试剂 | 第29页 |
| ·主要仪器 | 第29页 |
| ·azurin的表达与纯化 | 第29-31页 |
| ·azurin重组质粒构建 | 第29-30页 |
| ·azurin的表达 | 第30页 |
| ·azurin的纯化 | 第30-31页 |
| ·azurin的SDS-PAGE检测 | 第31-32页 |
| ·SDS-PAGE的配制 | 第31-32页 |
| ·样品制备及上样 | 第32页 |
| ·用考马斯亮蓝法检测蛋白含量 | 第32页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第32页 |
| ·样品的检测 | 第32页 |
| ·DNA测序 | 第32-33页 |
| ·结果及讨论 | 第33-34页 |
| ·本章小节 | 第34-35页 |
| 第4章 天青蛋白的理化性质检测 | 第35-42页 |
| ·材料与方法 | 第35页 |
| ·光谱检测 | 第35-36页 |
| ·UV-vis检测 | 第35页 |
| ·荧光分光光度计检测 | 第35页 |
| ·圆二色谱检测 | 第35-36页 |
| ·azurin的铜定量分析 | 第36页 |
| ·结果及讨论 | 第36-40页 |
| ·本章小节 | 第40-42页 |
| 第5章 电子自旋标记法对azurin特征分析 | 第42-55页 |
| ·主要材料 | 第42页 |
| ·主要仪器 | 第42页 |
| ·主要试剂 | 第42页 |
| ·自旋标记物 | 第42-44页 |
| ·自旋标记物的性质 | 第42-44页 |
| ·自旋标记的应用 | 第44页 |
| ·关于氮氧自由基(3-MP) | 第44-45页 |
| ·方法 | 第45-46页 |
| ·自旋标记物的制备 | 第45页 |
| ·标记的蛋白样品的制备 | 第45-46页 |
| ·脂质体 | 第46页 |
| ·血影的制备 | 第46页 |
| ·盐酸胍变性的样品的制备 | 第46页 |
| ·热变性样品的制备 | 第46页 |
| ·样品的检测 | 第46页 |
| ·ESR波谱解析 | 第46-47页 |
| ·统计学处理 | 第47页 |
| ·结果 | 第47-54页 |
| ·水相的信号 | 第47-48页 |
| ·不同的溶剂相的信号 | 第48-49页 |
| ·不同浓度的甘油相的ESR信号及其τ_c | 第49-50页 |
| ·不同浓度的变性溶液中ESR谱图,τ_c,UV-vis检测 | 第50-52页 |
| ·不同温度下热变性ESR谱图,τ_c以及UV-vis检测 | 第52-54页 |
| ·本章小节 | 第54-55页 |
| 结论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 硕士论文期间发表的论文以及科研成果 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 附录 | 第65页 |